玉米低聚肽中ACE抑制肽的分离纯化及结构鉴定

为了考察玉米低聚肽中血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽的活性和结构,以玉米黄粉为原料,采用两步酶解法制备出玉米低聚肽,在对其基础理化成分进行分析的基础上,测定其总抗氧化活性。结果表明,玉米低聚肽中总蛋白质含量为92.15%±5.26%,酸溶蛋白质含量为87.57%±5.98%,脂肪含量为0.06%±0.01%,灰分含量为3.12%±0.38%,水分含量为3.54%±0.29%。玉米低聚肽的ACI抑制活性为0.55±0.03 mg/mL。利用反相高效液相色谱对玉米低聚肽进行分离纯化,选择ACE抑制活性最高的组分峰,利用质谱仪测定肽段序列,鉴定出4个ACE抑制肽段:AY、SAP、NAP、VNAP, IC50值分别为0.036±0.005, 0.039±0.004, 0.112±0.010和0.205±0.018 mg/mL,大约是玉米低聚肽的15.3, 14.1, 4.9和2.7倍,是具有较高ACE抑制活性的肽段。     

超声-闪式协同提取白及须根多糖工艺优化及其抗肿瘤活性

以白及须根为原料,多糖提取量为考察指标,在单因素试验的基础上,选取料液比、闪提电压、超声功率和提取温度4个影响因素为自变量,采用响应面法对超声-闪式协同提取白及须根多糖的工艺参数进行优化,并通过建立皮下荷瘤小鼠模型,灌胃处理后观测白及须根多糖对S₁₈₀荷瘤小鼠的抑瘤作用,测定血清中TNF-α及IL-2水平。结果表明,超声-闪式协同提取白及须根多糖的最佳工艺为:以去离子水作为提取溶剂,在料液比为1:21 g/mL、闪提电压为190 V、超声功率为82 W、提取温度为62℃的条件下提取60 s;抗肿瘤活性研究结果显示三个不同剂量组小鼠瘤重较模型组均明显降低(P<0.05,P<0.01),表明白及须根多糖对S₁₈₀荷瘤小鼠肿瘤的生长具有明显的抑制作用,其机制可能是通过调节血清中TNF-α与IL-2水平来增强机体免疫功能而发挥抗肿瘤作用。     

涡旋振荡提取-高效液相色谱-紫外检测法测定铁叶酸片中的叶酸含量

摘要：目的建立涡旋振荡提取-高效液相色谱-紫外检测法（high performance liquid chromatography-ultraviolet, HPLC-UV）快速测定保健食品铁叶酸片中叶酸含量的分析方法。方法样品研磨成粉后,取样0.1 g, 加入0.3%的氨溶液25 mL,之后立即在旋涡混合器中涡旋振荡提取3 min。静置3 min后取上清液,滤膜过滤后,结合HPLC-UV方法进行含量检测。结果改进后的涡旋振荡提取法相比于常规的超声及加热提取法,前处理时间更短,提取效率更高,而且能够良好的避免基质中亚铁离子对含量测定的影响。叶酸在0.0054~0.2143 mg/mL浓度范围内线性良好（r2=0.9999）,实际样品平均回收率为98.18%~99.88%,相对标准偏差为0.89%~1.12%（n=6）。结论此改进后的方法准确、高效、简便、重现性良好,适用于保健食品铁叶酸片中叶酸含量的测定。     

高效液相色谱法测定复合营养素补充剂中叶酸含量

目的：通过建立一种提取效率高、耐复杂基质干扰能力强的样品前处理方式结合高效液相色谱紫外(High performance liquid chromatography-ultraviolet, HPLC-UV)检测方法,解决复合营养素补充剂中叶酸的准确定量检测难题。方法：以多种维生素矿物质片为特征样品,首次采用弱碱性饱和乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA)溶液为样品提取液并结合操作简便的超声提取前处理方法,高效提取供试品中的叶酸成分并有效屏蔽基质因素干扰,最终使用HPLC分离高灵敏检测。结果：叶酸在浓度范围0.991 2～49.561 5μg/mL内保持良好现行关系(r²=0.999 9);加标回收率达99.08%;平行试验结果RSD=1.01%(n=6);方法定量限LOQ=0.15μg/mL。改进后的分析方法通过系统的方法学验证后发现能够针对多种维生素矿物质片中的叶酸进行准确定量,并成功应用于市面上多种剂型叶酸类保健食品的实际检测中,结果均与产品标示量保持一致。结论：本方法简便易操作、提取效率高、抗基质干扰能力强、应用范围广,适用于多种维生素矿物质片中的叶酸含量测定,并...     

牡蛎过敏原Crag 1的结构与功能

Crag 1是牡蛎中主要过敏原,属于一种原肌球蛋白。原肌球蛋白是存在于肌肉和非肌肉细胞中高度保守的、分子量大约为34~38 kDa的一种结合蛋白。目前已经明确Crag 1的一级结构是由284个氨基酸构成,二级结构以α-螺旋为主,软体类主要过敏原原肌球蛋白均没有复杂的三、四级空间结构。Crag 1的过敏原性不是来自构象、非连续性表位而是来自于线性、连续性表位。Crag 1在92~105区段(IQLLEEDMERSEER)中具有IgE抗原结合表位,其他的IgE抗原结合表位有待进一步试验确认。Crag 1作为一种原肌球蛋白,对肌肉有一定的调节作用。不同物种原肌球蛋白的序列同源性较高并且存在一定的交叉反应。综述介绍了Crag 1的基本结构性质与功能,系统地描述了Crag 1,讨论了现阶段研究牡蛎过敏的意义及存在的问题,为以后治疗软体动物、甲壳类动物食品的过敏性疾病,尤其是治疗牡蛎引起的过敏疾病,提供一定的参考依据。     

分光光度法测定固体蛋白饮料中蛋白质含量

目的建立分光光度法测定固体蛋白饮料中蛋白质含量的分析方法。方法采用分光光度法测定固体蛋白饮料中蛋白质含量,考察了该方法的线性、精密度及回收率,并与凯氏定氮法测得的结果进行比较评价。结果在氮含量为0~100μg时,分光光度法的标准曲线方程为C=229.6A_(400nm)-1.418,r~2=0.998,精密度实验相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为1.51%~2.53%,重现性实验RSD为1.46%~2.80%,5种饮料回收率分别为98.6%、99.2%、99.2%、98.3%、99.1%,与凯氏定氮法测的结果进行比较,无显著性差异。结论该法具有简便快速、准确度高、精密度高、重现性好、检测效率高优势,适合于固体蛋白饮料中蛋白质含量的测定。     

牡蛎过敏原Crag1蛋白的结构分析

通过生物信息学方法,分析牡蛎过敏原Crag1蛋白的理化性质和各级结构。结果显示,牡蛎Crag1蛋白由284个氨基酸组成,其酸性氨基酸和亲水性氨基酸较多; Crag1蛋白氨基酸序列与角蝾螺、九孔螺原肌球蛋白(Tropomyosin, Tm)的同源性较高,亲缘关系较近,亲疏水性区域相似; DNA Star分析可知α-螺旋是Crag1蛋白二级结构的主要部分; Swiss-Model建模的结果表明,模拟形成的Crag1三维构象有较高的稳定性和合理性,且空间结构比较简单,没有复杂的三四级结构;此次试验为研究牡蛎Crag1蛋白结构和过敏性的关系及不同物种过敏原间的交叉反应提供了理论依据。     

牡蛎肽螯合锌成分分析、结构表征及促细胞增殖作用

为探究一种补锌产品——牡蛎肽螯合锌的组成成分、结构特征及促细胞增殖作用,分别研究了牡蛎肽螯合锌的氨基酸组成、相对分子量分布、锌含量,并采用傅里叶红外光谱、扫描电镜对牡蛎肽螯合锌进行表征分析,利用HL-7702人肝细胞进行增殖培养试验。结果表明:牡蛎肽螯合锌相比牡蛎肽在氨基酸组成及相对分子量分布上有明显差异,牡蛎肽螯合锌中锌的质量百分比为4.48%。红外光谱检测表明,牡蛎肽中羧基上的C==O和氨基上的N—H均参与了螯合反应。扫描电镜结果显示,牡蛎肽与牡蛎肽螯合锌之间的表面形貌特征存在明显区别,为不同种类物质。MTT法检测结果证明,牡蛎肽螯合锌安全性高,在一定程度上促进了HL-7702人肝细胞的增殖。     

玉米低聚肽中抗氧化肽的分离纯化及结构鉴定

为了考察玉米低聚肽中抗氧化肽的活性和结构,以玉米黄粉为原料,采用两步酶解法制备出玉米低聚肽,在对其基础理化成分进行分析的基础上,测定了其总抗氧化活性。结果表明,玉米低聚肽中总蛋白质含量为92.15%±5.26%,酸溶蛋白质含量为87.57%±5.98%,脂肪含量为0.06%±0.01%,灰分含量为3.12%±0.38%,水分含量为3.54%±0.29%。玉米低聚肽的总抗氧化能力为0.48±0.01 mmol/100 g。利用反相高效液相色谱对玉米低聚肽进行分离纯化,收集到12个主要的组分峰,利用质谱仪测定肽序列,鉴定出的12个肽段中,有4个肽段YGPQ、LSPY、AYPQ和AYLQQQ的总抗氧化能力比玉米低聚肽强,其含量分别为2.64±0.12, 2.51±0.19, 1.71±0.12和1.70±0.15mmol/100 g。     

“肽植”固体饮料的体外活性和对斑马鱼肝脏保护作用的评价

主要研究了以药食两用中药和玉米低聚肽为基础原料而开发的一款固体饮料的体外活性评价和护肝功能特性。分别采用还原Fe~(3+)和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法测定了该固体饮料的总还原力和DPPH自由基的清除率,并且通过HepG2细胞脂肪变性模型考察了其促进甘油三酯代谢的能力,最后通过斑马鱼实验观察该产品对斑马鱼肝损伤保护作用。实验表明该产品具有很好的抗氧化能力,具有明显的调控脂质代谢的作用,同时对对乙酰氨基酚诱发的斑马鱼肝损伤有保护作用。