魔芋葡甘露聚糖和香蕉抗性淀粉对小鼠肠道短链脂肪酸分泌及血脂影响的研究

本研究意在探索一种KGM与BRS复合的益生元,最终获得一种较好的有维持及增强肠道和心血管健康的益生元制剂。以健康雄性BALB/c小鼠为模型,设定对照组和6个试验组,设计制造三组不同添加剂量的BRS和三组不同配比BRS+KGM的AIN93纯化饲料饲喂小鼠,4周后测定小鼠盲肠SCFA含量和血脂指标。在SCFA分泌水平研究中,BRS组1、组2和BRS+KGM组2小鼠盲肠内容物中丙酸的分泌量显著增加(p0.05),而BRS组3和BRS+KGM组2乙酸、丁酸和总SCFA的分泌增加量极显著(p0.01),BRS+KGM组3丁酸分泌量明显增加(p0.01)。在血脂水平研究中,BRS组3HDL-C的含量极显著升高(p0.01),在BRS+KGM组2和组3中,均为TG、TC含量分别极显著(p0.01)、显著(p0.05)降低,HDL-C含量显著升高(p0.05)。BRS和KGM对SCFA的分泌水平和血脂水平均表现明显的剂量依赖性。综合比较,BRS+KGM组2复合制剂(5%KGM+23.5%BRS)为本研究中最佳复合益生元。     

嗜酸乳杆菌胞外蛋白调控MAPK和PI3K-AKT信号途径关键蛋白活化水平

探讨并揭示嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)CICC6005分泌的相关蛋白质促进肠道健康及分子机制具有重要研究价值。本实验在确定了L.acidophilus CICC6005分泌的胞外蛋白抑制HT-29结肠癌细胞增殖的基础上,进一步探讨67 ku和37 ku的胞外蛋白通过何种途径发挥抑制结肠癌细胞增殖。研究以HT-29细胞作为靶细胞,用丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)和磷脂酰肌醇-3激酶-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(phosphatidylinositol 3-kinase-protein kinase B,PI3K-AKT)信号通路为考察对象,以Western Blotting为手段,分析两个通路中关键的靶点蛋白p38、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)、磷酸化p38(phosphorylated p38,p-p38)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(phosphorylated c-Jun N-terminal kinase,p-JNK)、磷酸化的细胞外信号调节蛋白激酶(phosphorylated extracellular signal-regulated kinase,p-ERK)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated AKT,p-AKT)、PI3K的表达水平,以探讨并阐述源于L.acidophilus CICC6005胞外蛋白调控结肠癌细胞增殖状况的分子机制。结果表明,不同质量浓度的67 ku和37 ku胞外蛋白分别作用HT-29细胞一定时间后,两种胞外蛋白均具有下调两个信号通路途径中p-ERK1/2、p-p38、p-AKT、PI3K蛋白的表达,且存在浓度依赖关系;但对p-JNK、ERK1/2、p38、JNK蛋白的表达没有影响。因此,源于L.acidophilus CICC6005分泌的37 ku和67 ku胞外蛋白表现出显著的抑制HT-29细胞增殖的功能,其机制可能与调控MAPK和PI3K-AKT两个信号通路中几个关键的靶点蛋白的活化水平相关。该研究结果提示,食用嗜酸乳杆菌其分泌的胞外蛋白质将达到维护肠道健康的目标。     

味觉受体及其传感器研究与应用

中国传统饮食和食品的烹制与加工讲究色、香、味俱全,其中"酸、甜、苦、辣、咸五味调和"又构成其核心标准。国际上也分为"五味",分别为"酸、甜、苦、咸、鲜",其中少了辣味,多了鲜味。也有人建议将脂肪的味道定义为"香"味,但是中国人的"香"实际上是"香气",属于嗅觉,而非味觉。大量研究证明,多数味觉受体作为营养传感系统,如苦、甜、鲜都属于G蛋白偶联受体超家族成员,而且其分布并不限于味蕾、肠道等,其他组织均有分布,是药物筛选的重要靶标。然而,到目前为止,市场上进行味觉测定仍然依赖于电子鼻和电子舌等仪器设备,味觉受体传感器及其有关技术则仍处于探索和研究阶段。其主要原因是:味觉受体和其他大多数受体一样,在与配体识别和启动信号传递时主要依赖于弱相互作用,如何将这些弱相互作用转变为传感器可以处理并放大的光、声、电、磁、热等信号,从而实现其定量测定是一个关键性难题。但是,由于味觉受体在医药筛选、食品添加剂、食品的功能性评价和代谢综合征预防等方面的巨大应用与开发前景,其检测方法一直是科学家关注的焦点之一。本文将针对味觉受体及其传感器检测技术的研究进展进行综合评述,讨论其未来发展和应用前景。     

乳源酪蛋白糖巨肽对NF-κB信号通路中关键蛋白的调控作用

以结肠癌细胞HT-29为细胞系,在确定乳源性酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptide,CGMP)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的HT-29细胞核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)亚单位p65蛋白影响的基础上,在最适作用时间条件下,利用Western blotting技术进一步检测乳源CGMP对NF-κB信号通路上关键蛋白IκBα、p-IκBα、E3RSIκB、UBC5表达水平的影响,以阐述乳源CGMP调控NF-κB信号通路中关键蛋白的作用机制。结果表明:乳源CGMP组的3种质量浓度(0.001、0.010、0.100?μg/m L)均可在一定程度上抑制LPS诱导的HT-29细胞NF-κB信号通路上IκBα蛋白的降解,0.100?μg/m L作用较为明显,与空白对照组比较有显著性差异(P0.01)。研究明确地证实了乳源CGMP可通过抑制p-IκBα、E3RSIκB、UBC5蛋白的表达来抑制IκBα蛋白的降解,进而抑制NF-κB信号通路的激活。结论:乳源CGMP可显著降低NF-κB信号通路关键蛋白IκBα的降解,其机制是抑制了IκBα的磷酸化和泛素化,使p-IκBα和泛素化关键蛋白E3RSIκB和UBC5的表达均有所下降,进而减少了IκBα的降解,增加了IκBα-p65-p50蛋白三聚体的数量,使p65蛋白核移位效应降低,进而减少下游基因的表达。因此,研究结果科学地阐释了乳源CGMP是通过调控NF-κB信号通路发挥抗炎的作用。     

瑞士乳杆菌对小鼠肠道微生物区系的影响

本实验探讨瑞士乳杆菌对小鼠肠道微生物区系的影响,分析小鼠灌喂益生菌后肠道内各种微生物变化规律。研究将小鼠分成4组,日食对照组、生理盐水对照组、瑞士乳杆菌灌喂组和大肠杆菌灌喂组,连续灌喂15d,采集小鼠粪便利用选择性培养基对不同组别的小鼠肠道菌群作平板计数分析。研究结果表明,瑞士乳杆菌灌喂组与日食组和生理盐水组相比其肠道中乳酸菌类、双歧杆菌类、肠杆菌类、大肠杆菌类差异极显著（p〈O．01）,肠球菌类含量具有显著性差异（p〈0．05）;大肠杆菌灌喂组其肠道中乳酸菌类、双歧杆菌类、肠杆菌类、大肠杆菌类含量与对照组相比具有显著性差异（p〈0．05）,而肠球菌类的分析结果显示变化差异不显著。研究证实了瑞士乳杆菌能够促进小鼠肠道内有益菌的显著增殖,而对肠道内过路菌和可疑致病菌均有一定的抑制作用,表明灌喂瑞士乳杆菌对小鼠肠道微生物区系具有一定的调节作用。     

虾蛄冷藏条件的研究

鲜虾蛄包装条件分别为:充氮包装、抽真空包装和普通包装.在-25℃下冷冻8h,然后分别在-5、-10、-15、-20、- 25℃等温度条件下贮存,并在不同的贮存时间对虾蛄的感官指标评价、K值和TVB-N(挥发性盐基氮)值进行测定.结果表明虾蛄的K值与TVB-N值有较好的相关性.当虾蛄的K值在20%以下,TVB-N 值在30mg/100g以下时,其感官指标在C级以上.在-20℃和-25℃条件下贮存的虾蛄不论是感官指标还是化学指标均无明显的区别.真空和充氮包装使K值与TVB-N值增加的速度放缓,可以延长保鲜时间.     

高压匀浆破碎螺旋藻细胞释放藻蛋白的研究

采用工业化常用的高压匀浆破碎法对螺旋藻细胞破碎释放藻蛋白的过程进行系统研究。考察了匀浆次数、操作压力、悬浮体系、进料藻细胞密度等对螺旋藻细胞破碎率的影响。优化得到的高压均浆破碎螺旋藻细胞的工艺为：操作压力为80MPa,悬浮体系为pH6．810mmol／L磷酸盐缓冲液,匀浆破碎次数为三次。螺旋藻细胞破碎率为86％,此时可获得的粗藻蛋白总含量为73％。本研究还对高压匀浆破碎螺旋藻过程的动力学进行了分析。     

酪蛋白糖巨肽分离纯化方法的研究进展

酪蛋白糖巨肽(CGMP)主要是κ-酪蛋白经凝乳酶降解产生的一类含有糖链的多肽,具有许多的生理活性功能和独特的营养特性,可广泛地应用于保健食品和医药品。本文对酪蛋白糖巨肽的来源及结构作了简要概括,对其分离纯化方法及进展作出了详细论述。     

牛初乳中IGF-I分离纯化过程中前处理条件的优化研究

本实验从牛初乳中分离纯化胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ),重点对分离获取高水甲IGF-I的前处理条件进行了较为细致的条件优化,每一步骤中IGF-Ⅰ的质量浓度检测均采用放射免疫法测定.为后续工作中采用超滤法规模化、高水平生产IGF-I提供了实验依据.     

透性化细胞乳糖酶与提纯的乳糖酶酶学性质比较

通过透性化细胞处理技术和提取纯化两种方法制备乳糖酶,对两种乳糖酶的酶学性质进行了分析比较,结果表明,两种酶的最适反应温度和最适反应pH值相近,透性化细胞乳糖酶pH值稳定性和热稳定性范围大于纯乳糖酶.K 、Mn2 、Mg2 、Ca2 对两种乳糖酶都有激活作用,Cu2 有较强的抑制作用,金属离子对纯乳糖酶活性的影响大于对透性化细胞乳糖酶的影响.麦芽糖、葡萄糖等糖类对两种乳糖酶的活性有抑制作用.在完全相同的反应条件下测定的两种乳糖酶的Km和Vmax有所不同.