泡菜优质乳酸菌的筛选及其产酸性能鉴定

实验选择自然发酵的泡菜汁为原料,采用平板稀释培养和钙溶圈方法分离纯化菌株后,其筛选出12株透明圈较大的菌株,经反复在培养基上划线纯化,将分离得到的单菌落进行革兰氏染色,显微镜油镜观察鉴定菌株,其中6株为革兰氏阳性菌.再经扩大培养反接种于白菜中,从而筛选出3种产酸性能优良的乳酸菌纯种.     

糖化酶的研究概况

糖化酶是世界上生产量最大应用范围最广的酶类，介绍了糖化酶的结构组成、特性、生产、提取、活力检测以及提高酶活力的研究。     

超临界流体萃取银杏叶黄酮类物质的研究

采用乙醇浸提与超临界CO2萃取的方法,研究了从银杏叶中提取黄酮类化合物的工艺条件,结果表明:在较低的操作压力下,可有效地提取出银杏叶中的药用活性成分黄酮类化合物。重要的是纯度大大提高,且银杏叶中的有毒物质银杏酚类的含量得到了较好的控制。其中黄酮类化合物的提取率达到2.61%,纯度达到27.7%,其纯度是直接用乙醇提取的2.43倍。     

抗甲硝唑单链抗体融合蛋白的表达及其ELISA检测方法建立

为实现甲硝唑单链抗体(single-chain variable fragment,scFv)在大肠杆菌中的可溶性表达,以甲硝唑抗体可变区基因(VH、VL)为模板,扩增甲硝唑的scFv基因,scFv双酶切后与PLIP6/GN载体重组,构建重组质粒PLIP6/GNscFv,转化大肠杆菌JM109,阳性克隆转大肠杆菌BL21经温度诱导表达重组单链抗体,并通过聚丙酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)对其鉴定。采用竞争酶联免疫(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测重组单链抗体的抗原结合活性。结果表明诱导表达的scFv分子量接近33 kDa,能够特异性识别兽药甲硝唑,半抑制率(IC50)为(0.72±0.04)ng/mL。选择虾样品进行添加回收试验,建立的方法检测其回收率在88.54%到113.27%之间。这说明成功构建重组质粒PLIP6/GN-scFv并实现可溶性表达并可用于实际样品检测。     

沙葱及其提取物对小尾寒羊不同部位脂肪酸组成和含量的影响

本实验旨在研究沙葱及其提取物对肉羊不同部位脂肪酸组成和含量的影响。将健康小尾寒羊分为对照组（饲喂基础饲粮）、多糖组（饲喂基础饲粮中添加基础饲料质量0.1%的沙葱多糖）、沙葱组（饲喂基础饲粮中添加沙葱10 g/（只·d））、滤渣组（饲喂基础饲粮中添加滤渣10 g/（只·d））,预实验期15 d,正式实验期60 d,实验结束后,分别采集背最长肌、臀肌、皮下脂肪后采用气相色谱-质谱联用法测定脂肪酸的组成和含量。结果表明：与对照组相比,沙葱组背最长肌中的C14:1、C16:1、C17:1和中链膻味脂肪酸（midchain mutton odour fatty acid,MCMOFA）、3 个实验组臀肌中的C22:6n3、沙葱组皮下脂肪中的C18:1n9c、滤渣组皮下脂肪中的C18:3n3、多糖组和沙葱组皮下脂肪中的C18:3n6相对含量均显著降低（P＜0.05）,沙葱组和滤渣组臀肌中的C20:0、沙葱组臀肌中的C18:3n6和C20:1、滤渣组臀肌中的C10:0、C23:0和MCMOFA、沙葱组和滤渣组皮下脂肪中的C17:0、沙葱组皮下脂肪中的C18:0和C18:1n9t、3 个实验组皮下脂肪中的C15:1相对含量均显著升高（P＜0.05）;沙葱组背最长肌中的饱和脂肪酸和MCMOFA、3 个实验组背最长肌中的多不饱和脂肪酸（polyunsaturated fatty acid,PUFA）、滤渣组臀肌中的PUFA、沙葱组和滤渣组背最长肌的C18:0含量均显著降低（P＜0.05）,3 个实验组背最长肌和臀肌中总脂肪酸含量均有降低趋势（P＞0.05）;多糖组和沙葱组3 个部位中的致动脉粥样化指数、沙葱组和滤渣组背最长肌中的形成血栓指数均呈降低趋势（P＞0.05）。由此可见,基础饲粮中分别添加沙葱多糖、沙葱、滤渣饲喂肉羊均可调控肉羊不同部位的脂肪酸组成和含量,从而改善羊肉的风味和营养价值。     

沙葱总黄酮水洗组分的体外抗炎活性

本实验在体外应用脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）诱导小鼠腹腔巨噬细胞建立炎症模型的基础上,探讨沙葱总黄酮水洗组分的体外抗炎活性。应用CCK-8法检测0、50、100、200、400、800 μg/mL沙葱总黄酮水洗组分对小鼠腹腔巨噬细胞增殖活力的影响;将细胞分为空白对照组、LPS应激模型组及不同质量浓度沙葱总黄酮水洗组分预处理组,采用Griess法及酶联免疫吸附测定法分别测定各处理组细胞上清液中NO浓度和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素（interleukin,IL）-1β、IL-6、IL-10的质量浓度,反转录实时荧光定量聚合酶链式反应法检测各处理组细胞中诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、髓样分化蛋白（myeloid differential protein,MyD）88、核因子 κB（nuclear factor κB,NF-κB）mRNA的表达水平。结果显示：与对照组相比,沙葱总黄酮水洗组分在50～800 μg/mL时对小鼠腹腔巨噬细胞无明显细胞毒性作用。与LPS应激模型组相比,沙葱总黄酮水洗组分能够极显著抑制促炎介质NO、TNF-α、IL-1β、IL-6质量浓度及其mRNA的表达（P＜0.01或P＜0.001）;高度显著提高抗炎细胞因子IL-10质量浓度及其mRNA的表达（P＜0.001）,且呈剂量依赖效应;极显著降低MyD88、NF-κB mRNA的表达水平（P＜0.01或P＜0.001）。由此得出,沙葱总黄酮水洗组分对LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞具有抗炎作用,其抗炎活性可能是通过抑制促炎性介质NO、TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌并提高抗炎性细胞因子IL-10的质量浓度实现的,其作用机制可能与NF-κB信号通路有关。     

凝乳酶水解酪蛋白生产酪蛋白糖巨肽工艺条件的研究

酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptide,简称CGMP)是K-酪蛋白经酶解后生成的一类舍有糖链的多肽,具有许多功能特性.本文研究了凝乳酶水解酪蛋白生产CGMP的工艺条件,通过正交实验得到最佳工艺条件是底物浓度10mg/mL、酶的添加量为0.6%、酶解时间为2.5h.唾液酸回收率为80.7%,蛋白质回收率为3.03%,糖基化程度(唾液酸/蛋白质)为77.6μg/mg.     

基于ELISA克罗诺杆菌单链抗体制备与鉴定

利用基因工程技术制备克罗诺杆菌特异性单链抗体(sc Fv)。从克罗诺杆菌单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取总RNA,利用RT-PCR反转录合成第一链c DNA后再扩增出抗体的重链可变区(VH)和轻链变区(VL)基因片段,采用重叠延伸PCR的方法,用柔性多肽Linker接头(Gly4Ser)3将VH基因和VL基因拼接成sc Fv基因片段,XhoⅠ﹑Eco RⅠ限制性内切酶双酶切sc Fv后克隆到原核表达载体p ET-26b中构建重组质粒sc Fv-pet-26b,挑取阳性克隆提取重组质粒后转入大肠杆菌BL21中进行诱导表达,通过His柱进行亲和层析,最后利用ELISA检测单链抗体的活性。成功构建了表达克罗诺杆菌单链抗体的基因工程菌株,通过SDS-PAGE和ELISA试验结果表明,诱导表达的罗诺杆菌单链抗体分子量约为30 k Da,其能与罗诺杆菌特异性结合,可作为免疫检测罗诺杆菌的候选抗体分子。     

量子点标记荧光免疫试纸条可视化检测肉品中志贺氏菌研究

志贺氏菌是一类具有强传染性和危害严重的革兰阴性食源性致病菌。该文利用自制的CdTe量子点偶联志贺氏菌单克隆抗体,将志贺氏菌单克隆抗体和羊抗鼠二抗分别喷涂硝酸纤维素膜,并分别作为试纸条检测线和质控线,研制一种可视化检测志贺氏菌的量子点免疫荧光试纸条。该试纸条对肉类实际样品的检测限为1×104 CFU/mL,单个样品检测时间只需15 min,对常见的5种食源性致病菌均无交叉反应性。该方法构建的基于量子点免疫荧光试纸条满足快速、可视化、高灵敏检测志贺氏菌需求,可用于肉类食品的快速检测。     

杏仁乳发酵果酒的工艺优化研究

杏仁具有很好的营养和保健作用,以杏仁为主料山楂为辅料红曲作为发酵剂进行杏仁果酒发酵研究。通过实验得出杏仁果酒最佳工艺为:主发酵时间7 d,初始pH为4.5,酵母菌接种量为7%,在26℃的温度下后发酵后陈酿,澄清过滤后得到酒度在8.5%的保健型杏仁果酒。