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为实现甲硝唑单链抗体(single-chain variable fragment,scFv)在大肠杆菌中的可溶性表达,以甲硝唑抗体可变区基因(VH、VL)为模板,扩增甲硝唑的scFv基因,scFv双酶切后与PLIP6/GN载体重组,构建重组质粒PLIP6/GNscFv,转化大肠杆菌JM109,阳性克隆转大肠杆菌BL21经温度诱导表达重组单链抗体,并通过聚丙酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)对其鉴定。采用竞争酶联免疫(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测重组单链抗体的抗原结合活性。结果表明诱导表达的scFv分子量接近33 kDa,能够特异性识别兽药甲硝唑,半抑制率(IC50)为(0.72±0.04)ng/mL。选择虾样品进行添加回收试验,建立的方法检测其回收率在88.54%到113.27%之间。这说明成功构建重组质粒PLIP6/GN-scFv并实现可溶性表达并可用于实际样品检测。 相似文献
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阐述了宣钢炼铁厂工业用水,主要是高炉循环水、冲渣水及烧结球团用水三个方面的现状及存在问题,并给出了节水降耗的改造措施与解决办法,力图达到节水降耗的目的。 相似文献
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志贺氏菌是一类具有强传染性和危害严重的革兰阴性食源性致病菌。该文利用自制的CdTe量子点偶联志贺氏菌单克隆抗体,将志贺氏菌单克隆抗体和羊抗鼠二抗分别喷涂硝酸纤维素膜,并分别作为试纸条检测线和质控线,研制一种可视化检测志贺氏菌的量子点免疫荧光试纸条。该试纸条对肉类实际样品的检测限为1×104 CFU/mL,单个样品检测时间只需15 min,对常见的5种食源性致病菌均无交叉反应性。该方法构建的基于量子点免疫荧光试纸条满足快速、可视化、高灵敏检测志贺氏菌需求,可用于肉类食品的快速检测。 相似文献
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以谷氨酸作交联剂制备马铃薯交联淀粉,对其制备条件进行研究,考察影响其交联效果因素。结果表明,谷氨酸制备马铃薯交联淀粉工艺条件为:谷氨酸用量5%、pH为8、反应温度45℃、反应时间90 min,在该条件下,制备马铃薯交联淀粉交联度最高。 相似文献
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志贺氏菌(Shigella)通称痢疾杆菌,是一类具有传染性强和危害严重的革兰阴性食源性致病菌,广泛污染各类动物源性食品。该研究将志贺氏菌经0.5%福尔马林溶液灭活后,多次免疫雌性大耳兔获得抗志贺氏菌多克隆抗体,以抗志贺氏菌多克隆抗体作为捕获抗体,以辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)标记抗志贺氏菌多克隆抗体作为检测抗体,建立快速检测志贺氏菌双抗夹心酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法。结果表明:建立的双抗夹心ELISA方法检测曲线的线性范围为4.12×104cfu/mL~3.4×106cfu/mL,检测限为4.12×104 cfu/mL;用此体系检测大肠埃希氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌及副溶血弧菌等无交叉反应;水产品实际样品志贺氏菌检出限(limit of detection,LOD)为105cfu/mg,具备较好的灵敏性和特异性。 相似文献
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针对西铭矿选煤厂筒仓瓦斯抽放系统瓦斯抽排效果不理想,提出了瓦斯抽放系统优化改造,采用风机“一用一备”集中布置与主管路仓外铺设和基于PLC的自动切换闭锁远程监控控制的配套方案,三个月的运行实践表明:系统运行稳定,瓦斯未出现超限情况,从根本上提升了选煤厂通风系统的稳定性、可靠性、连续性。 相似文献