燕窝唾液酸糖蛋白间接竞争酶联免疫检测方法的建立

目的 建立间接竞争酶联免疫（indirect competitive enzyme linked immunesorbent assay，IC-ELISA）检测燕窝中唾液酸糖蛋白的分析方法。方法 以唾液酸糖蛋白为抗原，制备单克隆抗体，对IC-ELISA步骤中相关参数进行优化，确定最佳反应条件。结果 最佳包被抗原为1∶2000，抗体稀释倍数为1∶5000；封闭液浓度为1%牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA），封闭时间为150 min；竞争时间30 min；酶标二抗浓度稀释倍数为1∶1000，孵育时间30 min；显色时间为10 min。建立的IC-ELISA检测方法半抑制浓度(50% inhibition concentration，IC50)为8.61 μg/mL，线性范围为2.23~33.25 μg/mL，回收率为82.7%~92.0%，相对标准偏差(relative standard deviation，RSD)为1.7%~8.9%。结论 该方法灵敏度较高、特异性强，可以有效地鉴别假冒伪劣燕窝产品，具有较好的实际应用价值。