双波长紫外分光光度法快速测定发酵液中纳他霉素含量

采用双波长紫外分光光度法测定发酵液中的纳他霉素的含量,选定了测定波长为303nm及参比波长为290nm,对测定方法的线性及线性范围、精密度、准确度、检测限及定量限等进行了方法学上的研究。结果表明,该法在0.5～6μg/mL之间相关系数为0.999,回收率为100.6%。实验中同时并采用高效液相色谱法平行测定同一纳他霉素真实发酵过程的产物浓度,结果表明,2种方法之间无显著差异。     

航天诱变提高Streptomyces gilvosporeus的那他霉素产量

Mutants of the strain producing natamycin, Streptomyces gilvosporeus, were obtained after space-flight mutation. With respect to the sand spores and slant spores, the mutation ratios were up to 67.6% and 78.3% and the survival ratio was 43.1% and 3.0%, respectively. An improved mutant producing natamycin, S. gilvosporeus LK-45, was screened, which showed natamycin productivity of 1420mg·L^-1. A mutant resistant to 2-deoxy glucose, S.gilvosporeus LK-119, was further obtained using a＇rational screening procedure. The natamycin productivity of 1940mg·L^-1 was achieved when glucose was used as the carbon source.     

利用玉米浸泡水生产酵母及其在赖氨酸下游工艺中的应用

利用玉米浸泡水生产酵母,将培养基pH调至4.0后在未灭菌的情况下接入酵母培养,摇瓶培养酵母菌,湿菌体量可达约10g/100mL,发酵罐培养可达20～30g/100mL。将培养好的酵母添加到已调至pH4.0的赖氨酸发酵液中,非无菌条件下再发酵约6h,降低了赖氨酸发酵液残糖,降低了发酵液黏度。该工艺不仅解决了玉米浸泡水的污染问题,同时也极大地改善了赖氨酸下游工艺,取得了良好的经济效益和社会效益。     

高效液相色谱法同时测定尼卡巴嗪中4,4'-二硝基均苯二脲和2-羟基-4,6-二甲基嘧啶的含量

建立了同时测定尼卡巴嗪中4,4'-二硝基均苯二脲(DNC)和2-羟基-4,6-二甲基嘧啶(HDP)双组分的高效液相色谱法。实验采用安捷伦Poroshell 120 Bonus-RP色谱柱(4. 6 mm×150 mm,2. 7μm),水和乙腈为流动相梯度洗脱,流速为0. 8 m L/min,柱温为40℃,HDP和DNC的检测波长均选择300 nm。试验结果表明HDP和DNC分别在23. 3～34. 9μg/m L和56. 7～85. 1μg/m L范围内线性关系良好,相关系数(r)分别为0. 999 8和0. 999 6。HDP平均回收率为100. 4%,RSD为0. 9%(n=9); DNC的平均回收率为99. 2%,RSD为0. 8%(n=9)。建立的方法简便、准确、可靠,可更好地控制尼卡巴嗪的质量。     

亲水作用液相色谱法测定注射液中泰地罗新含量

采用XBridge-BEH Amide(150 mm×4. 6 mm,5μm)亲水作用色谱柱,建立了泰地罗新的检测方法。确定了检测波长,考察了流动相pH、流动相盐体系、流动相洗脱方式对保留时间、对称因子和理论塔板数的影响。结果表明,采用亲水作用色谱柱分离,以乙腈(含10 mmol/L甲酸铵、0. 125%甲酸、5%水)-0. 125%甲酸水溶液(含10 mmol/L甲酸铵)为流动相梯度洗脱,流速为1. 0 m L/min,柱温为30℃,紫外检测波长为280 nm,在此条件下泰地罗新可以获得良好的分离效果。泰地罗新药物质量浓度与峰面积在6. 25～100μg/m L范围内线性关系良好,相关系数R=0. 999 9,检出限为0. 05μg/m L,定量限为0. 14μg/m L,批内添加回收率在97. 8%～102. 1%之间,批内变异系数为1. 69%～3. 12%;批间添加回收率在96. 9%～104. 3%之间,批间变异系数为3. 39%～4. 05%。该方法能够快速、准确地检测泰地罗新含量,且成本低廉,可应用于药物生产中泰地罗新的质量控制。