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目的制备生物素标记的兔抗牛种布鲁菌544A多克隆抗体,并进行鉴定。方法复苏并扩大培养牛种布鲁菌544A,灭活后制备灭活疫苗,经背部皮下多点注射免疫新西兰大白兔,5次免疫后,经心脏采血,分离血清,采用硫酸铵盐析法对血清中的多克隆抗体进行粗提,再通过蛋白亲和柱层析法对抗体进一步纯化,利用SDS-PAGE分析抗体的纯度,间接ELISA法检测抗体的效价和特异性,Bradford法检测抗体的蛋白含量,并利用生物素对抗体进行标记。结果制备的牛种布鲁菌544A的兔多克隆抗体纯度较高,效价为1:256 000,特异性较好,蛋白含量为2.83 mg/ml,每摩尔蛋白中标记的生物素摩尔数为3.09。结论成功制备了生物素标记的牛种布鲁菌多克隆抗体,为下一步研制牛种布鲁菌免疫检测试剂盒奠定了物质基础。 相似文献
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在大直径盾构隧道内设置中隔墙以实现单管双线运营,是轨交工程中的一项重大技术创新。但在相对狭小的隧洞空间内建造中隔墙,却又是施工的一大难题。结合工程实际,通过模拟计算和分析,找出施工症结和关键点,为此制订了相应的工法,并专门研制了预制中隔墙拼装机,实现了在狭小隧道空间内预制中隔墙的快捷拼装,使施工质量得以提高,工期得以压缩,取得了理想的社会和经济效益。 相似文献