含重组人组织激肽释放酶降血压牛奶的开发

人组织激肽释放酶(human tissue kallikrein,KLK1)具有降血压和肾脏损伤修复等广泛的生物学作用,在心血管疾病防治方面具有广阔的应用前景.我们将KLK1cDNA克隆入自行构建的鸡输卵管特异表达载体pOV中,获得的重组载体pOV KLK1经脂质体包裹后,经翅静脉等途径注射产蛋鸡,在收集的鸡蛋蛋清中检测到KLK1活性,表达量高达45U/ml蛋清,有效表达持续7天左右.用含2～4U KLK1的蛋清饲喂高血压大鼠,可使其血压降低70mmHg,5天后回升至饲喂前水平.这些试验结果表明,表达在鸡蛋清中的重组KLK1具有产业化开发价值,由于口服具有降血压作用,所以不需纯化即可添加在牛奶中制成降血压牛奶.     

甘薯糖蛋白功能研究--体外抗肿瘤与Ames实验

对两个品种的甘薯糖蛋白提取物的功能进行了研究,Ames实验结果表明两个实验样品均具有显著的抗突变作用,在实验剂量0～5000μg/皿的范围内,抑制强度与剂量呈相关趋势;体外抗肿瘤实验揭示,实验样品对COS-1、SHG-44、SKOV3细胞的抑制作用呈现剂量依赖性,最小抑制量为1.5μg/ml。     

重组人溶菌酶理化及生物学特性的鉴定

为了研究转基因小鼠乳腺表达的重组人溶菌酶(rhLYZ)的理化特性及抑菌活性，将适当稀释的含rhLYZ的母鼠乳汁置于60，72，85，100℃的水浴中，每隔0，1，3，5，10，15，20，30rnjn取样，用微球菌溶解法测定rhLYZ的热稳定性：将稀释乳样的pH值调节为2．0，4．0，5．0，7．4，9．0和10．0，37℃作用30min后检测乳样中rhLYZ的活性；将不同的金属离子加入乳样中，使其终浓度为10mmol／L，然后测定金属离子对rhLYZ活性的影响；用培养的革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌及真菌涂布琼脂平板，以平板扩散法检测乳样中rhLYZ抑菌谱，在此基础上挑选敏感菌株进行定量抑菌试验。结果表明，转基因小鼠乳腺表达的rhLYZ与人乳中天然hLYZ都具有很强的热稳定性、相似的pH值活性范围和金属离子敏感性，对多种革兰阳性及阴性细菌具有不同程度的抑菌作用。     

防治奶牛乳房炎基因药物的安全性试验

用乳腺特异表达人溶菌酶(hLYZ)基因的重组质粒作为防治奶牛乳房炎的基因药物,初步试验结果表明具有良好的治疗效果.为了证明该基因药物临床使用的安全性,本研究用纯化的重组质粒注射小鼠、奶牛犊和奶牛,对质粒注射动物的临床表现、质粒在牛乳中的残留时间、在实验动物消化道内的降解动态及转化肠道细菌的可能性进行了观察和检测,结果表明重组质粒注射对小鼠、奶牛犊和患乳房炎奶牛均无不良反应,注入乳池的重组质粒的PCR扩增阳性时间达10天,重组质粒在小鼠胃内完全降解的时间小于1分钟,从灌服重组质粒小鼠的粪便中未分离到质粒转化细菌.这些初步试验结果表明,该重组质粒不存在生物安全隐患,可以作为防治奶牛乳房炎的新型药物加以开发.     

甘薯糖蛋白功能研究一体外抗肿瘤与Ames实验

摘要：对两个品种的甘薯糖蛋白提取物的功能进行了研究，Ames实验结果表明两个实验样品均具有显著的抗突变作用，在实验剂量0～5000μg／皿的范围内，抑制强度与剂量呈相关趋势；体外抗肿瘤实验揭示，实验样品对COS-1、SHG-44、SKOV，细胞的抑制作用呈现剂最依赖性，最小抑制量为1．5μg/m1。     

重组质粒pcDNKCpG在动物体内分布、残留及水平传播检测

通过肌肉注射的途径将重组质粒pcDNKCpG导入到鸡和猪体内,提取不同时间段的动物组织DNA,特异性的PCR扩增结果提示重组质粒pcDNKCpG主要分布在鸡和猪的血液和注射部位肌肉中,残留时间分别不超过16天和8天;凝胶电泳回收的组织DNA经过酶切、电泳和转膜后的Southern检测表明,重组质粒pcDNKCpG没有整合到鸡和猪的任何组织DNA中去;地高辛标记的CpG核酸探针的Southern检测结果显示重组质粒pcDNKCpG没有整合入宿主的基因组中;特异性的PCR扩增结果证实重组质粒pcDNKCpG没有转移到其他的环境微生物中去.因此,重组质粒pcDNKCpG具有良好的生物安全性.