原花青素B2对D-半乳糖模型小鼠的代谢组学研究

为探究原花青素B2对D-半乳糖诱导的亚急性衰老模型小鼠的抗衰老作用及特征代谢产物的变化差异,将 C57BL/6小鼠随机分为3 组：对照组、模型组、原花青素B2组。采用旷场迷宫、Y型食物诱导型迷宫和Morris水迷 宫检测各组小鼠的学习记忆能力,并测定小鼠肝、脑、肾中丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量、总抗氧化能 力（total antioxidant capacity,T-AOC）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力、谷胱甘肽过氧化物 酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力,通过液相色谱-质谱联用技术寻找各组间代谢产物的差异。结果显示： 原花青素B2能改善衰老小鼠的学习行为能力,在肝、脑、肾组织中,原花青素B2提高了T-AOC、SOD和GSH-Px活 力,而显著降低了MDA的含量（P＜0.05）。小鼠血浆代谢组学数据显示泛酸、丙酮酸、亚油酸、α-酮戊二酸、马 尿酸等17 种标志性代谢产物含量发生变化,其抗衰老机制可能涉及糖代谢、脂类代谢等多条代谢通路。     

原花青素B2对D-半乳糖模型小鼠肠道菌群的影响

以D-半乳糖皮下注射诱导小鼠衰老模型,探究原花青素B2对衰老小鼠肠道菌群结构的影响。将C57/BL小鼠随机分为对照组、衰老组和原花青素B2组,7 周后测定其十二指肠及结肠组织中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶活力、过氧化物酶活力和丙二醛含量,利用Illumina MiSeq高通量测序技术检测其肠道菌群16S rDNA基因,探索原花青素B2与衰老小鼠肠道菌群之间的关系,利用气相色谱-质谱联用仪检测小鼠粪便短链脂肪酸（shortchain fatty acids,SCFAs）含量。结果表明：D-半乳糖模型小鼠的十二指肠及结肠的抗氧化酶活力显著下降,MDA含量显著上升（P＜0.05）;在原花青素B2干预后,小鼠体内的多种抗氧化酶活力上升,MDA含量显著降低（P＜0.05）,与对照组没有显著差异（P＞0.05）;利用高通量测序技术发现3 组小鼠肠道菌群中主要发生变化的是norank-f-Bacteroidales-s24-7、Bacteroides、Blautia、unclassified-Lachnospiraeae、Ruminiclostridium、Lachnospiraeae-NK4A136、Roseburia 7 种菌属;相比于对照组,衰老组norank-f-Bacteroidales-s24-7的相对丰度显著降低,其他菌属的相对丰度显著上升（P＜0.05）;与衰老组相比,原花青素B2组norank-f-Bacteroidales-s24-7、Roseburia、Lachnospiraeae-NK4A136和Bacteroides的相对丰度显著上升,而Blautia、unclassified-Lachnospiraeae和Ruminiclostridium的相对丰度显著降低（P＜0.05）。原花青素B2可提高衰老小鼠体内SCFAs含量,改善肠道环境,进而延缓衰老进程。     

原花青素B_2代谢产物在小鼠体内组织的分布

为了探究原花青素B_2在小鼠体内主要代谢产物形式及其组织分布。采用高效液相色谱-二级阵列-电喷雾-离子阱-飞行时间质谱技术测定分析原花青素B_2灌胃小鼠的血浆、肝、心、脾、肺、肾、脑、小肠样品中代谢产物。结果表明,原花青素B_2在小鼠体内结合代谢产物形式主要包括:甲基化(8种)、磺酸化(7种)、水合(5种)、羟基化(1种)、葡糖苷酸化(1种);在血浆、肝、小肠、肾、肺、心、脑和脾中检出的原花青素B_2代谢产物的种类分别为6、8、8、6、3、6、2、2种,且发现3种单体表儿茶素及其代谢产物。原花青素B_2结合型代谢产物多样,在小鼠体内组织分布范围广,甲基化、磺酸化和水合代谢是主要的结合型产物形式,肝脏是原花青素B_2结合产物(M_r577.13)形成的主要器官,黄烷键(4β→8)的断裂产物是原花青素B_2重要的吸收形式之一。