葡萄籽多酚化合物抗氧化能力与抗癌细胞增殖活性的评价

目的:探讨葡萄鲜果及酿酒皮渣中葡萄籽提取物中的酚类化合物含量,抗氧化特性及对癌细胞增殖的抑制作用。方法:乙醇法提取葡萄籽中多酚化合物,分光光度计法测定三大酚类化合物参数(总酚、类黄酮类、黄烷-3-醇类)及3种抗氧化性能参数(DPPH及ABTS自由基清除能力,FRAP分析)。体外培养肝癌细胞HepG2,建立细胞模型,不同浓度的提取物作用于癌细胞后,采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测多酚提取物对癌细胞增殖的抑制作用。结果:不同样品葡萄籽所含酚类化合物、抗氧化性能、抗癌细胞增殖能力均不同,酿酒皮渣的葡萄籽中仍含有大量的多酚化合物,其中欧亚种赤霞珠鲜果及酿酒皮渣中葡萄籽所含酚类化合物、抗氧化能力及抗癌细胞增殖活性高于圆叶葡萄Noble鲜果及酿酒皮渣。结论:葡萄鲜果与酿酒皮渣中的葡萄籽多酚化合物具有抗氧化能力及抗癌细胞增殖活性。     

两种乙烯吸收剂对香蕉和番茄后熟影响的比较

主要比较了氯化钯型与高锰酸钾型乙烯吸收剂对外源乙烯的吸收能力和对香蕉、番茄采后贮藏保鲜效果。结果表明,在外源乙烯处理12h后,高锰酸钾型乙烯吸收剂的乙烯吸收能力基本饱和,而氯化钯型乙烯吸收剂在处理24h后仍具有较强的乙烯吸收能力,因此氯化钯型乙烯吸收剂对外源乙烯的吸收能力要优于高锰酸钾型乙烯吸收剂。在香蕉和番茄的贮藏保鲜中,氯化钯型乙烯吸收剂能够显著降低聚乙烯袋内的乙烯浓度,并将其维持在0.2μL/L左右。此外氯化钯型乙烯吸收剂能够延缓香蕉退绿和番茄红熟,并能延迟番茄硬度下降,均比高锰酸钾型乙烯吸收剂延迟2d。因此,氯化钯型乙烯吸收剂对香蕉、番茄保鲜效果要优于高锰酸钾型乙烯吸收剂。     

番茄果实组织在衰老和热胁迫中死亡率及DNA片段化的测定

组织、细胞死亡率及DNA片段化分析是番茄果实细胞程序性死亡(PCD)必不可少的检测指标。优化了番茄果实的电导率测定方法和TUNEL原位杂交方法,比较了不同甘露醇浓度和水作为介质对番茄果实圆片电导率测定的影响。0.2 mol/L~0.3mol/L的甘露醇溶液下番茄果实圆片的电导率较低,120 min后趋于稳定,而水为介质使番茄果实圆片电导率在测定的240 min内一直呈上升趋势,由30 min时的(23.95±0.85)%升至240 min的(63.95±0.35)%。结果表明0.3 mol/L甘露醇,震荡120 min为番茄果实电导率测定的适宜条件。进一步对成熟衰老和45℃热激处理的番茄果皮圆片电导率进行了测定,发现成熟的番茄及热激处理绿熟期果实细胞死亡率升高。对番茄果皮进行徒手切片的TUNEL原位荧光染色方法检测果实细胞DNA片段化简便可行,TUNEL原位杂交方法分别检测出了衰老果实和热激处理绿熟番茄果实TUNEL阳性细胞核。     

1-MCP处理对苹果采后常温贮藏品质的影响

以‘红富士’和‘黄元帅’两个品种苹果为实验材料,研究1-甲基环丙烯（1-methylcyclopropene ,1-MCP）处理后苹果在20 ℃常温贮藏条件下果实品质的变化,探讨1-MCP对短期贮藏苹果品质的影响。结果表明,与对照相比,1 μL/L 1-MCP处理对‘红富士’和‘黄元帅’苹果的质量损失率、硬度及可溶性固形物含量无显著影响（P＞0.05）;处理组可滴定酸含量在7 d后显著高于对照组（P＜0.05）;‘红富士’苹果1-MCP处理在14 d后可以延缓pH值上升,而‘黄元帅’处理组7 d后即可延缓pH值升高;1-MCP处理对‘红富士’VC含量无显著影响（P＞0.05）,而‘黄元帅’中1-MCP组VC含量在第1天开始即显著高于对照组（P＜0.05）。由此可见,1-MCP处理对不同品种苹果不同品质指标的影响不同。     

利用绿色荧光蛋白GFP作为报告基因检测转基因植物

GFP作为报告分子被广泛地运用在转基因植株检测中.利用PCR技术扩增得到番茄Bax inhibitor-1基因(LeBI-1),亚克隆到含GFP基因的pEGFP载体上,进一步将中间载体构建到植物表达载体pBI121上.重组pBI121-LeBI-1-EGFP经农杆菌介导的叶盘转化法转化烟草,分化筛选后获得抗性烟草植株.利用GFP作为报告基因,采用PCR、southern blot及荧光方法验证外源基因LeBI-1成功转化到烟草中.分析讨论报告蛋白GFP不同检测方法的优缺点.     

高效液相法测定市售腌制蔬菜商品中8种生物胺的含量

采用丹磺酰氯为衍生试剂,建立反相高效液相色谱法同时测定腌制蔬菜中色胺,β-苯乙胺,腐胺,尸胺,组胺,酪胺,亚精胺和精胺含量的方法。色谱条件:C18色谱柱分离,以水和乙腈为流动相梯度洗脱,流速0.8 mL/min,紫外检测器,检测波长:254 nm。在设定的试验条件下,8种生物胺在30 min内实现了良好的分离,待测生物胺峰面积同其相应浓度呈良好的线性相关性(R2>0.998)。仪器重复性良好(RSD<0.63%),方法重复性在可接收范围内(RSD<10%),8种生物胺的平均回收率在89.19%～103.02%之间。结果表明生物胺的HPLC检测方法,灵敏度高,精密度和重复性好,可快捷、准确地对腌制蔬菜中的生物胺进行检测。对市售腌制蔬菜样品中的生物胺含量进行了分析,检测出生物胺总量范围在39.38～628.82 mg/kg,属于目前我国安全标准范围之内。