陈化烟叶中纤维素降解菌群的分离及其特性研究

从陈化烟叶中分离到具有降解纤维素活性的菌群,分析了温度、pH和纤维素材料对菌群酶活性的影响,采用16SrDNA片段的PCR-DGGE（变形梯度凝胶电泳）技术分析菌群组成。结果显示,菌群主要由5种细菌组成。20℃时菌群纤维素酶活性很低,随着温度升高酶活性升高,在60℃时纤维素酶活性达到最高值,继续升温则酶活性下降。pH从3升高到8时,菌群纤维素酶活性不断增大,pH为8时酶活性达到最大,pH继续升高到9时则酶活性下降。菌群对烟叶、滤纸和烟梗中的纤维素都有降解作用,在以烟叶作为纤维素材料培养菌群时,纤维素酶活性明显高于滤纸和烟梗。陈化过程中微生物可能对烟叶纤维素有降解作用,从而影响烟叶的陈化效果;可以利用分离到的菌群在烟叶或烟梗发酵中降解纤维素,改善烟叶或烟梗的品质。     

应用16S rDNA克隆文库技术分析陈化烟叶细菌多样性

为较全面地分析陈化烟叶的细菌多样性,利用16S rDNA基因克隆文库技术分析了产自于福建的3个等级处于不同陈化阶段的12个烟叶样品中的细菌组成.采集C/S挑、B22、X21三个等级的陈化烤烟烟叶,陈化时间分别为3、6、12、24个月.实验结果表明,烤烟烟叶在陈化过程中共存在25种细菌,γ-变形菌纲(Gamma-proteobacteria)细菌种类最丰富,含有19种细菌,α-变形菌纲(Alpha-proteobacteria)含有3种细菌,芽孢杆菌纲(Bacilli)含有2种细菌,β-变形菌纲(Beta-proteobacteria)含有1种细菌.在12个烟叶样品中,肠杆菌属(Enterobacter)在8个样品中的比例最高,假单胞菌属(Pseudomonas)在2个样品中比例最高,泛菌属(Pantoea)和克洛诺菌属(Cronobacter spp.)分别在样品B6和C3中比例最高.在陈化过程中,烤烟叶面细菌组成没有明显的变化规律.     

广盐性硅藻披针舟形藻在高盐和低盐胁迫下的抗氧化响应

有关藻类耐盐的抗氧化响应机制的研究报道很少,披针舟形藻(Navicula lanceolata)是从盐场分离到的广盐性硅藻,文章研究了其在长期高盐及低盐胁迫下的抗氧化响应.与对照组(1.6% NaCl)相比,在低盐(0%,0.5%,0.8%,1.0%NaCl)及高盐(3.2%,4.8%,6.4%,8.0%,9.6%NaCl)胁迫条件下,披针舟形藻的生长受到抑制,胞内膜氧化产物丙二醛的含量显著升高,表明藻细胞内出现了氧化损伤.在高盐及低盐胁迫下,胞内的抗氧化酶超氧化物歧化酶、抗坏血酸过氧化物酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽还原酶的活性均增强,非酶抗氧化剂抗坏血酸和还原型谷胱甘肽含量均增加.上述研究结果显示,披针舟形藻通过提高抗氧化酶的活性及非酶抗氧化剂的含量来应对长期盐胁迫下的氧化损伤,细胞抗氧化系统的响应是藻耐受长期盐胁迫的机制之一.     

盐度和营养限制对盐田底栖硅藻咖啡双眉藻生长及胞外多糖产率的影响

从台南盐场藻垫中分离到硅藻咖啡双眉藻(Amphora coffeaeformis),研究了盐度和氮磷营养限制对其生长及胞外多糖(EPS)产率的影响.结果表明:高盐度和氮磷营养限制条件下咖啡双眉藻生长受到严重抑制,氮营养限制比磷营养限制对藻生长的抑制作用更显著;高盐度和氮磷营养限制条件下,咖啡双眉藻EPS产率都明显增加,氮营养限制比磷营养限制对EPS产率的促进作用更显著.这表明高盐和氮磷营养限制促进盐田中咖啡双眉藻产生更多的EPS,有利于盐田藻垫的形成和稳定,进而促进盐田藻垫防渗和净化卤水的作用.     

烟叶醇化过程中烟碱降解菌的分离鉴定与特性分析

从醇化烟叶中分离到具有降解烟碱活性的菌群(Q6),16S rDNA片段的PCR-DGGE(变性梯度凝胶电泳)分析显示,菌群由8种细菌组成.从菌群Q6中分离出1株烟碱降解菌D1,经菌落形态、生理生化和16S rDNA序列分析鉴定为根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens).在低温(20℃)、偏酸或偏碱(pH=5或者pH≥9)及高烟碱浓度(＞1g/L)条件下,菌群Q6均表现出比单菌D1更强的降解活性.烟叶发酵和加入静息细胞试验表明,菌群和单菌均可降解醇化烟叶中的烟碱.在菌群和单菌的烟碱代谢产物中都检测到烟碱烯、2,3’-联吡啶和可替宁.结果显示:醇化过程中烟叶表面微生物可能对烟碱有降解作用,从而影响烟叶的醇化效果,可以利用分离到的菌群或单菌在烟叶醇化过程中降解烟碱,以改善烟叶品质;同时也可以利用烟碱降解菌处理烟草废弃物中的烟碱.     

盐生隐杆藻藻蓝蛋白的分离纯化及理化性质

文章确立了简便的一步法纯化盐生隐杆藻藻蓝蛋白.经过磷酸缓冲液提取、硫酸铵分步沉淀和DEAE-Sepharose Fast Flow柱层析,分离纯化得到盐生隐杆藻藻蓝蛋白,其纯度(A620/A280)达到4.58,最终得率为52.65%.纯化的藻蓝蛋白最大吸收峰为620nm,其室温荧光发射峰为646nm,SDS-PAGE电泳显示其α和β亚基的分子量分别为17218Da和20844Da,分子排阻HPLC 测得其分子量为76158Da,表明其在pH 7.2下是以(αβ)2二聚体状态存在于溶液中.稳定性实验表明,黑暗、pH 5～8以及0M～2M NaCl等条件下AH-PC是稳定的.这些实验结果将为开发利用盐生隐杆藻藻蓝蛋白提供参考.