高浓度烟碱降解菌的筛选、鉴定及降解特性

以烟碱为唯一碳氮源分别从武汉卷烟厂废弃物和山东淄博地区多年植烟的土壤中分离出152株降解烟碱的细菌分离株,进一步筛选得到高浓度烟碱降解茵ZB-16A.经常规形态学、生理生化特征、16S rDNA序列分析和系统发育树研究表明,ZB-16A分离株属于恶臭假单胞菌;ZB-16A在温度30 ℃,培养基初始pH7.0,摇床转速为150 rpm时,可耐受6 000 mg/L的烟碱,在48 h内可完全降解烟碱;当烟碱初始浓度为7 000 mg/L时,该降解菌生长受到抑制.     

云南不同仓储地复烤烟叶表面醇化期间可培养真菌的动态变化

为了解云南复烤烟叶(K326)异地醇化过程可培养真菌的多样性,通过形态特征观察、18S rDNA序列分析研究了异地醇化过程中真菌菌群的结构。结果表明,从220份复烤烟叶样品中共分离、纯化到2 963株可培养真菌。4个醇化地烟叶表面真菌数量随醇化时间的延长呈"下降-上升-下降-趋于平缓"的趋势。结合形态特征和18S rDNA序列的分析结果,共鉴定出39个属(种)的真菌。不同醇化地、不同醇化时间复烤烟叶表面真菌的种群结构及其变化规律均有差异,但根霉属真菌始终为优势菌群。     

烟碱降解细菌528菌株的分离鉴定和降解特性

为解决我国一些烟区烤烟烟碱含量偏高问题,筛选了具有降解烟叶烟碱含量应用潜力的细菌。以烟碱为唯一的碳氮源,从云南省弥勒县的烟草栽培土壤中分离得到1株烟碱降解细菌5-28。经形态学观察和生理生化性质分析,结合16S rRNA测序和系统进化分析将该细菌鉴定为根瘤菌(Sinorhizobiumsp.)5-28。该菌能耐受2.5 g/L的烟碱,对烟碱的最适降解条件为:烟碱浓度1.5 g/L,pH 4.0,温度25℃。经过24 h培养,菌株5-28对初始浓度为1 g/L的烟碱降解率接近80%,同时,该菌的休止细胞也能有效降解烟叶中的烟碱。     

陈化烟叶中纤维素降解菌群的分离及其特性研究

从陈化烟叶中分离到具有降解纤维素活性的菌群,分析了温度、pH和纤维素材料对菌群酶活性的影响,采用16SrDNA片段的PCR-DGGE（变形梯度凝胶电泳）技术分析菌群组成。结果显示,菌群主要由5种细菌组成。20℃时菌群纤维素酶活性很低,随着温度升高酶活性升高,在60℃时纤维素酶活性达到最高值,继续升温则酶活性下降。pH从3升高到8时,菌群纤维素酶活性不断增大,pH为8时酶活性达到最大,pH继续升高到9时则酶活性下降。菌群对烟叶、滤纸和烟梗中的纤维素都有降解作用,在以烟叶作为纤维素材料培养菌群时,纤维素酶活性明显高于滤纸和烟梗。陈化过程中微生物可能对烟叶纤维素有降解作用,从而影响烟叶的陈化效果;可以利用分离到的菌群在烟叶或烟梗发酵中降解纤维素,改善烟叶或烟梗的品质。     

中式熟食咸鸡主要细菌的分离与初步鉴定

采用嗜冷菌选择性培养基和含盐选择性培养基对咸鸡微生物菌群进行分离筛选。根据细菌的菌落形态、革兰氏染色反应等常见特征,由嗜冷菌选择性培养基分离出6 株菌C1～C6,含盐选择性培养基分离出4 株NaCl 胁迫条件下细菌S1～S4。提取单菌落DNA,对其16S rDNA 序列进行PCR 扩增后测序,结合形态、常规生理生化特性初步鉴定为：松鼠葡萄球菌(Staphylococcus sciuri)C3,土生克雷伯氏菌(Klebsiella terrigena)C6,不动杆菌属(Acinetobacter sp.)C1、C2、C4、C5;日勾维肠杆菌(Enterobacter gergoviae)S1,表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)S2、S3,假蕈状芽孢杆菌(Bacillus pseudomycoides)S4。     

三聚甲醛强降解菌的筛选鉴定及其对聚甲醛废水的生物强化

从某煤化工企业聚甲醛污水厂调节池底泥中分离出一株对三聚甲醛(s-Trioxane,TOX)有代谢作用的细菌,经16S rDNA基因序列分析为甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)。该菌最适生长和降解条件为培养基起始pH为7,最佳温度为30℃,耐受NaCl和TOX质量浓度分别为3 g/L和1 200 mg/L。将该菌与麦芽糖假丝酵母(Candida maltosa)和恶臭假单胞菌(Pseudomonsa putida)等甲醛降解菌共同组成复合菌剂,对聚甲醛污水进行协同处理,最终出水的效果优劣顺序为:D组(TOX降解菌+甲醛降解菌)C组(甲醛降解菌) B组(TOX降解菌)A组(对照组)。其中D组出水COD、甲醛和TOX的降解率分别为92.80%、96.52%和95.88%,均远优于其他组合。证明降解菌组合对甲醛和TOX降解的有效性,可作为聚甲醛污水处理的复合菌剂。     

Illumina MiSeq高通量测序降解黑龙江绥化地区玉米秸秆细菌菌群的研究

以研究黑龙江绥化地区农产废弃物玉米秸秆细菌降解菌群为目的,采用Illumina MiSeq微生物多样性测序的方法,对2015~2017年玉米秸秆的菌群多样性进行测序。采用生物信息学的方法对低温自然降解秸秆细菌群落中主要降解菌进行分析,并筛选了2015~2017年玉米秸秆中两株丰度最高的纤维素降解细菌,经多次分离纯化并结合刚果红染色法验证其低温降解纤维素的功能。结果表明,测序获得61564385 bp,质控后共141219条16S rDNA序列,Silva数据库比对到14门、29纲、70目、136科、282属。其中假单胞菌属(Pseudomonas)、根瘤菌属(Rhizobium)、德沃西亚菌属(Devosia)、黄杆菌属(Flavobacterium)、微杆菌属(Microbacterium)和链霉菌属(Streptomyces)等是降解秸秆的主要细菌菌株,即该地区玉米秸秆细菌菌群多样性丰富,且研究筛选出的两株细菌具有纤维素降解能力。     

四川宜宾芽菜中乳酸菌分离筛选及菌相分析

采用6种选择性培养基对宜宾芽菜中的乳酸菌进行分离纯化,通过pH值测定和乳酸定性,筛选出72h时pH值在4.0以下和产生乳酸与标样Rf值相近的菌株进行后续实验。采用16S rDNA PCR-RFLP、ERIC-PCR对筛选出的菌株进行遗传多样性分析,通过分析16S rDNA序列研究宜宾芽菜中乳酸菌菌相及其系统发育。16S rDNA PCR-RFLP和ERIC-PCR指纹图谱分析结果表明宜宾芽菜中乳酸菌遗传多样性丰富。根据16S rDNA PCR-RFLP和ERIC-PCR聚类图分析,选取中心菌株进行序列分析,并构建系统发育树,结果显示:宜宾芽菜中主要的乳酸菌为戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、坚强肠球菌(Eenterococcus durans)。     

一株牛蒡根际纤维素降解芽孢菌的分离鉴定和发酵分析

从牛蒡根际分离到一株纤维素降解菌株NP10。该菌是芽孢杆菌,其16S rDNA 的Genbank 序列号是FJ908093。分批发酵法对NP10 进行的分析显示,该菌是一株碱性纤维素降解菌。其滤纸酶(FPA)酶活力在32℃、pH8 发酵48h 达到最大为18.2U/mL,其羧甲基纤维素酶(CMCase)活力在32℃、pH7 发酵36h 达到最大,为8.1U/mL。     

土壤中降解烟碱细菌多样性研究

为了解烟草根围土壤中可降解烟碱细菌的多样性,采用0.1％的烟碱为唯一碳源和氮源的无机盐培养基,从云南省普洱、玉溪、曲靖、楚雄、大理五个地区59个土样中分离得到302株降解烟碱细菌;16S rDNA序列分析结果表明,302株菌分属厚壁菌门(Firmicutes)、放线菌门(Actinobacteria)、变形菌 门(Proteobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidetes)四大类群,分别与数据库中已知的节杆菌属(Arthrobacter)、芽孢杆菌属(Bacillus)、类芽孢杆菌属(Paenibacillus)、微球菌属(Micrococcus)、纤维单胞菌属(Cellulomonas)、假单胞菌属(Pseudomonas)、短状杆菌属(Brachybacterium)、根瘤菌属(Rhizobium)、中华根瘤菌属(Sinorhizobium)、土壤杆菌属(Agrobacterium)、不动杆菌属(Acinetobacter)、剑菌属(Ensifer)、两面神菌属(Janibacter)、鞘脂杆菌属(Sphingobacterium)、Balneimonas具有较高的相似性.其中节杆菌属、芽孢杆菌属和类芽孢杆菌属为土壤中降解烟碱细菌的优势菌属.