黑龙江省栽培大豆品种(系)异黄酮含量测定与主要性状相关性分析及灰色关联度分析

应用相关性和灰色关联度方法分析了黑龙江省54份栽培大豆品种的异黄酮含量与主要性状的关系。经方法学验证建立的大豆异黄酮高效液相色谱法准确、可靠;初步明确了黑龙江省栽培大豆品种异黄酮及其主要成分含量的特点,大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷及总异黄酮含量的平均值分别为:1.231,0.268,1.397,2.895μg/mg;筛选得到异黄酮总量超过4.000μg/mg的大豆品种5份。本研究可为大豆的选育种及异黄酮含量的评价提供依据。     

大豆异黄酮检测方法研究概述

大豆异黄酮检测方法主要有紫外分光光度法、三波长法、高效液相色谱法、高效液相色谱-质谱法、气相色谱法、气相色谱一质谱法、毛细管电泳法、四标样快速测定法、薄层扫描色谱法、双向纸层析色谱法,及医学上荧光免疫法中时间分辨荧光免疫分析法和酶联免疫吸附法等.该文对上述检测方法进行系统总结和分析比较,以期为大豆异黄酮进一步研发提供技...     

大豆品种吉林35胚尖再生体系的建立及对农杆菌的敏感性

为建立一个简便、高效、稳定的大豆胚尖再生体系,以吉林35为材料,胚尖为外植体,研究氯气、升汞、酒精3种消毒方法对不定芽出芽率的影响和6-BA对不定芽再生率的影响。同时,为检测吉林35的农杆菌易感性,对平安8、东农42、吉林47和吉林35四个大豆品种进行gus基因组织化学染色。研究表明,酒精消毒法对种子伤害较小,可以保证较高的出芽率。6-BA对不定芽再生作用显著,单独使用或配合IBA使用均可获得较高的再生率。gus基因组织化学染色结果表明吉林35的农杆菌易感性强,明显优于其它品种。吉林35胚尖外植体再生率较高且对农杆菌较敏感,是遗传转化良好的受体材料。     

LTB-MOMP融合基因表达载体的构建及其在原核细胞中的表达

目的构建含大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位(LTB)和鹦鹉热衣原体主要外膜蛋白(MOMP)融合基因(LTB-MOMP)的表达载体,并在原核细胞中表达融合蛋白。方法应用PCR从质粒EWD299和鹦鹉热衣原体中扩增LTB和MOMP基因,经与柔性肽连接后,插入pET-28a载体中,酶切鉴定正确后,转化大肠杆菌Rosetta,IPTG诱导表达,并纯化目的蛋白。SDS-PAGE和Westernblot分析外源蛋白的表达及表达产物的抗原特异性。结果重组工程菌可以表达相对分子质量约为54000的LTB-MOMP融合蛋白,表达量占菌体总蛋白的42%,LTB-MOMP融合蛋白具有良好的抗原特异性。结论已成功构建了LTB-MOMP融合基因表达载体,并在原核细胞中获得表达。