超声辅助酶法提取黄刺浆果总黄酮的工艺优化及其生物活性研究

采用超声辅助酶法提取黄刺浆果总黄酮。在单因素试验的基础上，通过响应面法优化黄刺浆果总黄酮的提取工艺，并评价总黄酮对DPPH自由基的清除能力、对α-淀粉酶活性和α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用。结果表明：最佳提取工艺为纤维素酶添加量6%(以黄刺浆果质量计)、酶解温度41℃、超声时间25 min、甲醇体积分数70%、料液比1∶25(g/mL)。在此条件下，黄刺浆果总黄酮得率为(22.53±0.18)mg/g。黄刺浆果总黄酮对DPPH自由基的IC₅₀为1.90 mg/mL、对α-淀粉酶活性和α-葡萄糖苷酶活性的IC₅₀分别为11.00、10.09 mg/mL,表明黄刺浆果总黄酮具有较强的生物活性。     

膜分离蚕豆蛋白酶解产物的理化性质及生物活性北大核心CSCD

以新鲜蚕豆为原料,采用碱溶酸沉法提取蚕豆蛋白,采用4种不同蛋白酶对蚕豆蛋白进行单酶或双酶酶解,通过比较蚕豆蛋白水解度和多肽得率筛选出最优的两种酶复合酶解蚕豆蛋白,将复合酶解液通过膜分离技术分离得到BBPHs-Ⅰ(<1 kDa)、BBPHs-Ⅱ(1~3 kDa)、BBPHs-Ⅲ(3~5 kDa)、BBPHs-Ⅳ(5~10 kDa)、BBPHs-Ⅴ(>10 kDa)5个不同分子质量的组分,对5个组分的氨基酸组成、紫外光谱、红外光谱进行分析,同时通过测定体外抗氧化活性及α-葡萄糖苷酶抑制率表征其活性。结果表明:选用菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶对蚕豆蛋白进行复合酶解;与膜分离前比较,膜分离后10 kDa以下的蚕豆蛋白酶解产物总氨基酸含量增加,BBPHs-Ⅱ、BBPHs-Ⅲ、BBPHs-Ⅳ的疏水氨基酸含量较高,此外BBPHs-Ⅲ的总氨基酸、必需氨基酸、疏水氨基酸、芳香氨基酸含量均为最高,分别为65.304%、19.222%、20.762%、8.769%。不同分子质量的蚕豆蛋白酶解产物表现出一定体外抗氧化能力,当质量浓度为10 mg/mL时,BBPHs-Ⅳ的ABTS自由基清除率可达(27.89±0.01)%,BBPHs-Ⅱ的DPPH自由基清除率可高达(57.70±0.00)%;当质量浓度在2~32 mg/mL范围内,不同分子质量蚕豆蛋白酶解产物的α-葡萄糖苷酶抑制活性呈剂量依赖关系,BBPHs-Ⅱ、BBPHs-Ⅲ、BBPHs-Ⅳ表现出良好的α-葡萄糖苷酶抑制活性,质量浓度为32 mg/mL时BBPHs-Ⅲ的α-葡萄糖苷酶活性抑制率最佳,达到(86.56±1.23)%。因此,通过膜分离技术得到的小分子质量的蚕豆蛋白酶解产物具有更好的抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性,具有良好的开发及应用前景。     

黄刺多糖工艺优化及其对过氧化氢损伤的胰岛β细胞的保护作用

为研究黄刺粗多糖(Berberi dasystachya polysaccharides, BDPs)对H₂O₂诱导的RIN-m5F细胞氧化损伤的保护作用，以黄刺浆果为原料，通过单因素试验和响应面Box-Behnken设计实验优化超声波辅助酶解提取黄刺果实多糖的工艺。采用高效体积排阻色谱、离子色谱、扫描电镜及刚果红实验对BDPs理化性质进行分析，以H₂O₂诱导RIN-m5F细胞建立氧化应激损伤模型，通过CCK-8法测定细胞存活率，DCFH-DA探针法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平、比色法测定细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、过氧化氢酶(catalase, CAT)活性和丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量探讨BDPs对氧化损伤细胞的保护作用。结果表明，当加酶量为1.25%(质量分数),酶解时间57 min,酶解温度45℃,超声波功率164 W时，黄刺多糖提取得率为(3.478±0.075)%...