拟除虫菊酯及其代谢物免疫检测的研究进展

作者主要介绍了检测拟除虫菊酯类农药及其代谢物的酶联免疫法和荧光免疫法。通过应用新型纳米材料(如磁纳米粒子,镧系发光纳米材料)以及噬菌体展示技术提高免疫检测的灵敏度,并对拟除虫菊酯类农药及其代谢物免疫检测的发展方向进行了展望。     

沙门氏菌MALDI-TOF-MS蛋白质指纹图谱分析方法的研究

以沙门氏菌标准菌株(Salmonella enterica DSM 17058 T)为研究对象,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对其进行蛋白质指纹图谱分析,进而得到正确的鉴定结果。为了获得重现性良好的质谱图,对沙门氏菌的最佳培养基、最适培养时间以及样品前处理方法进行了优化,从而确立沙门氏菌MALDI-TOF-MS蛋白质指纹图谱标准分析方法。结果表明:乙醇/甲酸处理法所得图谱中的特征峰多,包含更多的蛋白标志物,所得图谱基线平滑,噪音少,信噪比高,是最佳的样品处理方法。以营养丰富的哥伦比亚琼脂为培养基,在24 h时即可达到强峰值信号,质谱图重现性良好,鉴定结果准确,并且相比于其它3种培养基所需培养时间短。     

大豆Kunitz胰蛋白酶抑制因子单克隆抗体的制备与鉴定

为制备免疫学特性良好的大豆Kunitz胰蛋白酶抑制因子(Kunitz trypsin inhibitor,KTI)单克隆抗体,以50μg/只的免疫剂量将KTI免疫BALB/c小鼠,利用间接ELISA和间接竞争ELISA鉴定多抗血清效价和敏感性,选择血清效价和敏感性较优的小鼠进行细胞融合,多次筛选得到稳定分泌KTI单克隆抗体(Monoclonal antibody,mAb)的杂交瘤细胞株,采用体内诱生腹水法制备mAb并对其免疫学特性进行鉴定。结果表明,1号小鼠经免疫后效价最高且敏感性最好,半数抑制浓度(IC50)为157.33ng/mL,经细胞融合筛选得到4E6-E9阳性杂交瘤细胞株,所制备的抗体效价达到11 638 400,亚型为IgG1型,亲和常数为1.45×108 L/mol,IC50为28.39ng/mL,且特异性强。说明试验所制备的mAb免疫学特性良好,能够为建立灵敏、特异的KTI免疫学检测方法提供良好的抗体保障。     

碱性蛋白酶水解脱铬革屑制备胶原水解物的研究

研究了用碱性蛋白酶水解脱铬革屑制备胶原水解产物时 ,影响胶原水解产物收获率的各种因素。最佳水解条件为 :酶用量 0 1 6% (v/w) ,反应 pH值 9 5 ,反应温度 65℃ ,反应时间 40min ,水—渣比为 5∶1。在此条件下 ,胶原水解产物的收获率为 66 2 % ,铬含量仅为 4 2 0mg/kg,并对胶原水解产物的理化性质进行了测定。     

乳铁蛋白及其多肽对淋巴细胞增殖活性的影响

乳铁蛋白及其多肽具有很多生物活性,但不同来源的乳铁蛋白及其多肽在很多活性方面表现很大的差异。实验比较研究了4种乳铁蛋白及其胃蛋白酶水解产物对小鼠脾淋巴细胞增殖作用的影响,为乳铁蛋白及其多肽的开发应用提供科学依据。实验结果表明:4种乳铁蛋白对Con A诱导的脾淋巴细胞增殖均有抑制作用,其中驼乳铁蛋白抑制作用最强;而4种乳铁蛋白多肽对Con A诱导的脾淋巴细胞增殖在一定浓度范围内具有促进作用,而超出这个浓度范围,就起到抑制作用,但4种乳铁蛋白多肽对Con A诱导的脾淋巴细胞增殖的影响组间比较没有显著差异。     

酵母RNA超声辅助提取工艺研究

为提高酵母RNA提取效果,采用超声辅助提取工艺,在单因素实验的基础上,采用超声处理时间、超声功率和提取时间进行三因素三水平响应面分析实验以优化此工艺条件.结果表明,酵母RNA超声辅助提取的最佳工艺条件为超声处理时间10min,超声功率300W,提取时间20min,在此工艺条件下,酵母RNA实际得率为9.56%,与模型预测值之间具有较好的拟合性.在3个因素中,超声处理时间、超声功率对酵母RNA得率的影响极显著,提取时间影响不显著,且相互之间无交互效应.     

豆芽中生长调节剂类违禁添加物的检测方法研究进展

文章针对近年来频发的"问题豆芽"事件,介绍了豆芽生产过程中禁止添加的6-苄基氨基嘌呤等植物生长调节剂的作用及危害,综述了用于此类生长调节剂检测的高效液相色谱、表面增强拉曼光谱、电化学、免疫分析、生物传感器等方法的应用现状,并对检测方法的发展方向进行展望。     

免疫分析技术在“新型瘦肉精”残留检测中的应用

近年来,一些"新型瘦肉精"药物被非法用于畜禽养殖,如苯乙醇胺A、赛庚啶、可乐定等,该类药物添加在饲料和动物饮水中能有效促进禽畜生长,提高瘦肉率,降低养殖成本,但其在肉制品中的残留会对人体产生蓄积毒性。免疫分析技术利用高亲和力抗体对抗原进行特异识别,灵敏度高,是目前快速检测方法研究的热点之一,已在"传统瘦肉精"的快速检测中成熟应用,但其在"新型瘦肉精"快速检测中的应用仍处于起步阶段。该文对免疫分析技术在"新型瘦肉精"残留检测中的应用进行综述,并对其未来发展方向进行展望。     

碱法水解脱铬革屑制备胶原蛋白水解物的研究

采用碱法水解脱铬革屑制备胶原水解产物 ,研究了影响胶原水解产物收获率的各种因素 ,得出的结论为 :碱法水解的最佳条件为CaO用量 4% (w/w)、反应时间lh、反应温度 60℃、水 -渣比 7,在此条件下 ,胶原水解产物的收获率为 5 5 .0 3 % ,分子量分布在 1 6.1 0kDal左右。本文还测定了胶原水解产物的理化性质     

一株嗜酸乳杆菌突变株转化亚油酸为共轭亚油酸条件的研究

以嗜酸乳杆菌为出发菌株，用紫外诱变方法，得到一株共轭亚油酸转化量较高的突变株，其转化亚油酸为共轭亚油酸的最佳条件为：反应温度35℃，pH值4．0，保温时间48h，亚油酸与培养液的比例为1000mg：100ml，在此条件下共轭亚油酸的产率达38．1％。在1mmol／L浓度下，Na^ 、Fe^2 、Mg^2 有助于提高共轭亚油酸的产量，而Hg^2 、Co^2 、Cu^2 、Mn^2 、Fe^3 不利于共轭亚油酸的合成。用超声波处理细胞后，共轭亚油酸的产率显著提高。