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2.
产胞外葡萄糖氧化酶菌株的筛选、鉴定及酶学性质初步研究 总被引:1,自引:0,他引:1
乳酸脱氢酶(LDH)是乳酸生成途径中的关键酶,敲除乳酸脱氢酶基因,理论上可以减少甚至消除乳酸的产生,提高2,3-丁二醇的产量和得率。该研究采用体外拼接方式构建乳酸脱氢酶基因的同源线性片段ldhL-Cmr-ldhR,将其电转化至Klebisella oxytoca HD79中,通过Red同源重组技术筛选敲除成功的重组菌株,经聚合酶链式反应(PCR)、荧光定量-聚合酶链式反应(FQ-PCR)及2,3-丁二醇产量检测验证。结果表明,重组菌株2,3-丁二醇产量为40.20 g/L、转化率为0.38 g/g和生产强度为0.48 g/(L·h),相比供试菌株分别提高了26.8%、11.8%和45.5%;而乳酸产量则由4.83 g/L下降至2.45 g/L,相比供试菌株降低了49.3%。该实验为后续进一步提高2,3-丁二醇的产量和扩大菌株选择范围奠定基础。 相似文献
3.
采用热不对称交错聚合酶链式反应(Tail-PCR)克隆云南磷矿来源昆明假单胞菌(Pseudomonas kunmingensis)HL22-2的海藻糖合酶(TreS)基因HL22-2TreS,将该基因与表达载体pETM3C连接后在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)pLysS中进行异源表达,通过Ni-NTA柱纯化重组酶HL22-2TreS,并对其酶学特性进行分析。结果表明,HL22-2TreS基因全长3 336 bp,编码1 111个氨基酸,氨基酸序列与Genbank数据库中相关的海藻糖合酶具有极高的相似性。重组酶HL22-2TreS的分子质量约126 kDa,该酶的最适反应温度和pH值分别为40 ℃和7.0,在温度20~50 ℃及pH值6.0~9.0条件下比较稳定,Cu2+、Hg2+、Ba2+及Al3+对海藻糖合酶的活力有强烈的抑制效果。HL22-2TreS基因对麦芽糖和海藻糖的米氏常数(Km)分别为20.6 mmol/L和87.5 mmol/L,对麦芽糖具有更高的亲和性,更容易将麦芽糖转化成海藻糖。 相似文献
4.
6.
研究了用碳酸钠、十六烷基三甲基溴化铵改性膨润土制备有机膨润土,并将有机膨润土与活性炭联合用于吸附净化废硫酸,再用净化后的废硫酸浸出碳酸锰矿石。通过单因素试验及响应面试验确定最佳工艺条件,探讨吸附净化机制。结果表明:相关因素中,对废硫酸中COD去除率影响的次序为有机膨润土投加量吸附时间吸附温度搅拌速度;对于初始浓度11.12 mol/L的废硫酸,用粒径96μm有机膨润土5.8 g,在29℃、搅拌速度90 r/min条件下吸附时间49 min,然后再用活性炭4.0 g、在74℃下吸附34 min,废硫酸中COD去除率达91.07%;吸附机制可能是离子交换。 相似文献
7.
8.
针对掘进工作面受到褶皱、褶曲等地质构造的影响导致掘进的巷道在纵剖面上发生一定程度的弯曲,在带式输送机起动拉紧的瞬间引发输送带上跳,从而打坏安设在其上部的风筒的实际情况,研制出一种新型风筒保护装置,并阐述了新型风筒保护装置的工作原理和使用注意事项,在苏家沟煤矿031604运输顺槽北翼掘进工作面进行了试验应用,取得了良好的使用效果,提高了走架推溜效率,保障了工作面的安全、高效生产。 相似文献
9.
某煤矿工作面顺槽属软岩巷道,已发生严重变形,需要重新设计支护方式增强支护能力。分析了巷道变形破坏的主要原因是巷道围岩松软破碎、围岩强度低、开采深度大、应力水平高、原支护设计不合理。从改变锚杆、锚索支护与O型棚支护参数入手,提高巷道支护强度来实现耦合支护,控制巷道变形。同时,使用数值模拟方法分析新支护方案围岩的受力情况,模拟显示巷道没有出现应力集中。经过工业性试验和矿压监测,巷道支护效果良好。因此,锚杆+锚索+O型棚的复合支护形式经优化设计参数后,能够适用于该矿软岩巷道的支护,从而为矿井软岩巷道支护积累了经验。 相似文献
10.
本文针对矿井风量调节的实际要求,提出了分区解算获得局部最优调节方案的一种方法,从而将复杂的矿井风量优化调节非线性规划问题转化为线性规划问题,并应用节点迭代计算绝对静压的方法,结合考虑了自然风压和通风阻力的作用,使CPM能获得更精确的结果。 相似文献