磷酸西格列汀的酶法合成工艺改进

磷酸西格列汀的酶法合成工艺是美国Merck公司与Codexis公司合作开发的一条绿色高效合成途径。主要在酶法合成工艺基础上进行改进,具体通过可表达转氨酶的重组大肠杆菌BL21(ED3)培养获得菌泥,经破碎后投入催化反应,底物转化率达95.83%。调酸性分离使有机杂质含量低于1.0%,调碱性分离西格列汀,与磷酸成盐后精制得到磷酸西格列汀一水合物,收率84.6%,ee99.99%,综合回收并使用二甲基亚砜与异丙醇。改进后相比文献方法提高约3%的转化率,明显降低了生产成本,适用于大量生产,为同类型酶催化工艺设计提供了一个新的思路。     

HPLC法检测酶法合成中还原型/氧化型谷胱甘肽

建立酶法反应中还原型/氧化型谷胱甘肽含量的液相分析方法。采用ZOABAX SB-C18进行分离,流动相为磷酸二氢钾辛烷磺酸钠溶液∶乙腈(920∶80,V/V),流速1.0 mL/min,检测波长210 nm,进样量20μL;采用外标法定量。还原型/氧化型谷胱甘肽在10~200μg/mL范围内线性关系良好,相关系数分别为0.9994(n=4)、0.9999(n=4),在S/N=3时最低检测限分别为0.037μg/mL、0.019μg/mL;在S/N=10时最低定量限分别为1.90μg/mL、1.12μg/mL;样品加标回收率分别为98.7%~100.6%、98.5%~101.4%;色谱系统稳定性RSD,GSH、GSSH分别为0.44%、1.16%。样品分析显示出本方法操作简便,快速,准确,灵敏度高,稳定性好,适合酶催化反应中还原型/氧化型谷胱甘肽的测定。     

酶法提取藤茶茎中二氢杨梅素工艺研究

采用酶法提取藤茶废弃物茎中的二氢杨梅素,考察温度、pH、酶添加量和料液质量体积比对二氢杨梅素提取率和纯度的影响。结果表明,最佳提取工艺条件为:温度45℃,pH为4.46,酶添加量2.0%,料液质量体积比1∶20(g/mL)。在此条件下,二氢杨梅素提取率30.65%,纯度23.4%。优于常规热提法,与醇提相比,提取率提高10%左右,纯度没有提高。     

甘青乌头抗炎镇痛活性部位的半仿生-酶法提取工艺优化

用半仿生-酶法提取甘青乌头抗炎镇痛的活性部位,考察加酶量、酶解时间、半仿生提取(SBE)温度和总时间4个因素的影响。结果表明,优选工艺为:加酶量36 U/g,酶解时间90 min,SBE温度80℃,SBE总时间180 min。     

双酶法制备葡萄糖酸钠工艺优化研究

以双酶法产葡萄糖酸钠实验中残糖及反应周期为评价指标,对双酶法产葡萄糖酸钠工艺进行优化,提高酶制剂的使用率,降低生产成本,为促使葡萄糖酸钠由发酵法生产向酶法生产转变提供参考依据。双酶法产葡萄糖酸钠采用葡萄糖为主要原料,葡萄糖氧化酶在过氧化氢酶的协同作用下将葡萄糖直接转化为葡萄糖酸,然后用碱中和而制得葡萄糖酸钠。通过实验确定双酶法产葡萄糖酸钠的最佳工艺条件为42℃、pH5.9±0.2、葡萄糖氧化酶与过氧化氢酶比例为3.3∶2.7,添加量为每100g葡萄糖添加葡萄糖氧化酶0.264g,过氧化氢酶0.226g,且分批加酶优于一次性添加酶制剂。     

酶法辅助适温压榨制取红花籽油工艺技术

为提高红花籽油品质,通过酶法辅助适温压榨制取红花籽油,并利用响应面设计优化其工艺参数。结果表明:红花籽油最佳制取条件为水分8.56%、压榨温度72.9℃、压力3.86 MPa、喂料速度2 050 kg/h、酶用量2.4%、酶解温度50.7℃、酶解时间4.5 h;在此条件下红花籽油中亚油酸含量达到80%,V_E含量达到460 mg/kg,甾醇总含量达到4 275 mg/kg,出油率为23.96%。     

化学-海因酶法制备光学纯D-茶氨酸

建立了化学-海因酶法制备光学纯D-茶氨酸的新方法.采用氰酸盐和L-谷氨酸关环制备D,L-羧乙基海因,与乙胺进行侧链衍生后得到酶转化底物N-乙基海因丙酰胺;进而采用D-海因酶催化水解得到N-氨甲酰-D-茶氨酸,经亚硝酸水解最终得到标题化合物.总收率达55％.对海因酶催化和亚硝酸水解过程条件进行了优化.     

不同酶处理对小麦胚芽油提取率的影响

研究不同酶处理对小麦胚芽油提取率的影响,确定最佳水酶法提取小麦胚芽油工艺。选用纤维素酶、半纤维酶、酸性蛋白酶、淀粉酶、果胶酶作为提取酶,对小麦胚芽进行酶解,研究了不同酶处理对提油率的影响。单一酶处理试验中,分别用纤维素酶和酸性蛋白酶处理的提油率较高;复合酶处理试验中,酸性蛋白酶和纤维素酶组合处理的提油率最高;且复合酶处理比单一酶处理的提油率高。经过正交试验得出小麦胚芽油水酶法最优提取工艺为:复合酶(酸性蛋白酶∶纤维素酶=5∶1),酶解pH=5,酶解温度45℃。经验证试验小麦胚芽提油率可达到65.53%。试验提取的小麦胚芽油不饱和脂肪酸含量高达82%以上,营养品质较好。     

酶法嫩化牦牛肉脯生产技术研究

以天然无污染的高原耗牛肉为原料，采用酶解技术嫩化肉质，冷冻成型后切片，两段式干燥的工艺加工牦牛肉脯，腌渍剂配比为：食盐1.8%，亚硝酸钠0.01%，异Vc钠0.05%，复合香辛料0.1%，味精0.3%，白砂糖3.0%，葡萄糖2.5%，嫩化剂为木瓜蛋白酶0.05%。