蛋清蛋白酶解物的抗氧化、抗凝血酶活性及牛化特性的研究

研究了蛋清蛋白酶解物可能具有的抗氧化和抗凝血酶活性.水解用酶为Alcalase 2.4L碱性蛋白酶和Protease N蛋白酶;测定了4个水解度的酶解物(采用pH-stat法控制反应终点而得到)的抗氧化和抗凝血酶活性,分析了活性最高的酶解物的氨基酸组成和相对分子量分布.结果表明,Protease N蛋白酶的酶解物活性要高于Alcalase 酶解物,在水解度为15%时抗凝血酶活性最高;两种来源的、水解度为15%的酶解物的7种必需氨基酸质量分数分别达到了48.11%与45.80%,远高于天然蛋清的7种必需氨基酸质量分数35.65%,说明两种酶解物具有很高的营养价值.相对分子量分布显示两种酶解物(水解度为15%)的多肽组成相似,因此活性的差异可能是因水解酶种类不同而导致的产物多肽的氨基酸序列不同的缘故.     

乳清蛋白酶解物的抗氧化活性研究

研究在不同的酶种类、[E/S]、酶解时间下,乳清蛋白酶解物的抗氧化活性。结果表明,在胃蛋白酶37℃,[E/S]为0.15%,水解温度水解时间2 h;胰蛋白酶[E/S]为0.4%,水解温度50℃,水解时间2 h的条件下,乳清蛋白的酶解物有较强的抗氧化活性。     

蛋清肽及肽钙配合物的制备

为获得高生物效价的补钙制剂及提高蛋清蛋白的附加值,首先对鸡蛋清进行酶法改性,筛选实验用酶,采用正交试验,分别对酶解条件及肽钙反应条件进行优化,并采用红外光谱法比较反应前后图谱的变化。结果表明：选择先碱性蛋白酶后中性蛋白酶进行双酶酶解,酶解条件为底物质量分数6%、碱性酶酶底比1:100、pH8.0、酶解时间3h;中性酶酶底比1:25、pH7.0、酶解时间3h。制备肽钙配合物最优反应条件为肽钙(CaCl2)质量比2.5:1、pH9.5、底物质量分数4%、温度55℃,在此条件下,可溶性钙含量为21.15mg/L,水解度为8.66%。制备蛋清肽时,使用双酶的水解效果优于单酶,蛋清肽与钙形成了双单齿配合物,其钙质量分数为8.75%。     

超声波对蛋清蛋白酶解的研究

以蛋清蛋白和Alcalase为原料,研究了超声波功率对蛋清蛋白酶解的水解度的影响,进行了有、无超声波作用下蛋清蛋白酶解的优化实验。结果表明,40kHz、125W的超声波处理,能有效地促进蛋清蛋白的酶解,使其水解度提高13%～35.48%。超声波作用不影响蛋清蛋白的其他酶解条件,优化工艺参数为pH是9.15,加酶量(E/S,即酶相对于底物蛋白质质量)是4.85%,温度是70℃,且各因素对蛋清蛋白水解度影响的大小顺序一致,为pH>T>E/S。     

超滤对芸豆蛋白酶解物抗氧化活性的影响

采用超滤法从芸豆蛋白酶解物中初步分离纯化抗氧化活性肽。研究超滤系统主要参数对膜通量的影响,确定最优的超滤条件和膜清洗方法,并对超滤前后酶解物的相对分子质量分布、氨基酸组成及抗氧化活性进行比较。结果表明：采用改性聚醚砜平板超滤膜在室温,酶解液质量分数2.5%,pH6.5 和压力0.25MPa 条件下的分离纯化效果较好;超滤能有效去除酶解液中相对分子质量较大的组分,相对分子质量2000～1000D 及1000D 以下的组分分别从11.38% 和12.64% 提高到32.83% 和 45.91%,其抗氧化活性也得到明显提高。     

蛋清肽的工艺优化、抗氧化作用及特性

以对DPPH自由基清除率为考察指标,筛选适宜蛋清肽制备蛋白酶。研究酶活、温度、蛋清含量及pH值对蛋清肽清除DPPH自由基的影响,利用正交试验探讨制备蛋清抗氧化肽的最佳工艺;以抗坏血酸(VC)为对照,研究蛋清肽总还原力大小、对羟自由基、超氧阴离子自由基的清除作用及对脂质过氧化的抑制作用;研究蛋清肽的部分特性。结果表明:风味蛋白酶适宜蛋清肽的制备,酶解时间选择90 min。最佳工艺为:pH 5,45℃,蛋清体积分数8%,酶活1 125 U。此条件下对DPPH自由基清除率为53.273%。蛋清肽对羟自由基(0.308 4～1.542 mg/mL)、超氧阴离子自由基(0.089～0.443 mg/mL)具有一定的清除能力,清除率随其质量浓度的增大而增加,且具有一定的还原力。对羟自由基,VC的IC50=0.092 mg/mL,蛋清肽IC50=1.24 mg/mL,对超氧阴离子自由基,VC的IC50=0.021 6 mg/mL,蛋清肽的IC50=0.054 mg/mL。在0.667～10.667 mg/mL范围内,蛋清肽对脂质过氧化的抑制作用随其质量浓度增加而减小,在0.667～10.667μg/mL范围内反而具有促进脂质过氧化作用。蛋清肽等电点在pH 3左右,其对羟自由基清除率随温度增加逐渐下降;在pH 2～10范围内,其溶解度几乎成线性增加。     

银鲳酶解物抗氧化活性研究

选用胃蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶对银鲳蛋白进行酶解以制备蛋白酶解物,以羟基自由基清除活性为指标确定银鲳最佳水解酶。结果显示,碱性蛋白酶的水解物抗氧化活性最强。实验对碱性蛋白酶水解银鲳的酶解条件(时间、温度、pH、酶添加量和固液比)进行正交实验设计,并对最佳水解条件下所获得的酶解物进行抗氧化活性测试。结果表明,银鲳蛋白碱性蛋白酶水解物对DPPH自由基和羟基自由基具有清除作用,其自由基清除效果呈现剂量依赖性,而且银鲳蛋白水解物还具有明显还原能力。所有这些体外抗氧化数据说明,银鲳蛋白水解物有明显的抗氧化效力。     

银鲳酶解物抗氧化活性研究

选用胃蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶对银鲳蛋白进行酶解以制备蛋白酶解物,以羟基自由基清除活性为指标确定银鲳最佳水解酶。结果显示,碱性蛋白酶的水解物抗氧化活性最强。实验对碱性蛋白酶水解银鲳的酶解条件(时间、温度、pH、酶添加量和固液比)进行正交实验设计,并对最佳水解条件下所获得的酶解物进行抗氧化活性测试。结果表明,银鲳蛋白碱性蛋白酶水解物对DPPH自由基和羟基自由基具有清除作用,其自由基清除效果呈现剂量依赖性,而且银鲳蛋白水解物还具有明显还原能力。所有这些体外抗氧化数据说明,银鲳蛋白水解物有明显的抗氧化效力。      

罗非鱼鱼肉及组分蛋白酶解产物的抗氧化特性

采用胃蛋白酶、中性蛋白酶、Alcalase2.4L碱性蛋白酶分别酶解罗非鱼肉蛋白,研究比较不同蛋白酶在1、2、4、6、8h对罗非鱼肉蛋白的酶解效果及产物的抗氧化活性,结果表明:3种酶的酶解产物都具有一定的抗氧化活性,中性蛋白酶酶解产物的水解度和蛋白回收率最高,胃蛋白酶酶解产物对DPPH自由基和羟自由基的清除效果最好;综合各项指标选择中性蛋白酶对罗非鱼肉的组分蛋白(肌原纤维蛋白、肌浆蛋白、基质蛋白)进行4h酶解,研究比较不同组分蛋白的酶解效果及产物的抗氧化活性,结果表明:组分蛋白中基质蛋白酶解产物的蛋白回收率最高,为89.8%,肌原纤维蛋白酶解产物的水解度最高,为10.1%,肌浆蛋白酶解产物的抗氧化活性最好,羟自由基和DPPH自由基的IC50值分别为12.352mg/m L和3.554mg/m L。      

不同酶解的蛋清肽对小鼠血清生化指标和肝脏抗氧化功能的影响

研究了Protamex、Neutrase、Alcalase和Flavourzyme酶解蛋清肽对小鼠血清生化指标和肝脏抗氧化功能的影响。选取2月龄雄性小鼠80只,分成8组(P-3h、P-6h、N-3h、N-6h、A-3h、A-6h、P+N+F-3h和P+N+F-6h),每组10只,试验期每天灌胃酶解蛋清肽0.3ml,连续灌胃4周,试验结束后,检测血清生化指标和肝脏抗氧化性能。结果表明:与P-3h组相比,N-3h和A-3h组小鼠血清的GOT含量分别升高了15.34%和4.6%,肝脏的T-SOD活性分别升高了8.41%和16.03%(P0.05),而血清的TG含量和肝脏的GSH-PX活性则分别降低了29.92%和27.65%、6.93%和28.68%(P0.05)。与P-6h组相比,A-6h组和N-6h组小鼠血清TP、TC、TG、Ca和Mg的含量分别降低了8.10%和6.38%、25.20%和19.03%、16.06%和19.17%、4.42%和3.61%、12.83%和8.21%(P0.05);N-6h组小鼠肝脏的GSH-PX活性降低了21.28%(P0.05),而A-6h的MDA含量提高了4.64%。从本试验结果来看,蛋清Alcalase酶水解物改善小鼠血清生化指标和肝脏抗氧化能力效果较好,其中水解3h的效果优于6h。     

杏仁蛋白酶解工艺以及抗氧化活性研究

以提取精油后的杏仁渣为原料,烘干挥发尽有机溶剂后,制备匀浆液.使用722型分光光度计检测吸光度,对4种蛋白酶作用后的酶解液进行清除羟自由基(·OH)能力研究.结果表明:脱脂杏仁匀浆液经酶解后,清除羟自由基能力显著提高;不同蛋白酶的酶解液对羟自由基清除率不同,其中碱性蛋白酶酶解液清除能力最强.通过单因素试验与正交优化试验确定酶解液具有最佳抗氧化性的酶解条件.极差分析结果显示,影响杏仁水解液抗氧化性的酶解工艺条件的主次顺序依次为温度、底物浓度、酶添加量、初始pH值.方差分析结果表明在试验设计范围内,温度、pH值、酶添加量以及底物浓度4种因素对于羟自由基(·OH)清除率影响差异均极显著.杏仁蛋白水解液具有最高抗氧化活性的酶解工艺条件为,底物浓度2.5%,碱性蛋白酶用量20000 U/g以蛋白质计,酶解温度70℃,pH=9,作用时间0.5 h.验证试验显示在该条件下羟自由基清除率可达63%.     

牡蛎蛋白酶解物的制备及其抗氧化活性研究

选用中性蛋白酶,研究了前处理方法、E/S、pH、温度和时间对酶解牡蛎蛋白效果的影响,制备牡蛎蛋白酶解物,分析其游离氨基酸含量及分子量分布,体外实验测定其抗氧化活性。结果表明,酶解前100℃热处理10min能够提高酶解物中蛋白肽的含量,E/S为2.0%、pH7.0、温度50℃、时间3.0h为酶解的适宜条件,其DH达到14.95%;所制备的EHOP的主要成分为小分子肽类物质,分子量主要集中在500～3091u,EHOP的还原性较强,且对羟基自由基和超氧阴离子均有较好的清除能力,EHOP浓度为25mg/mL时,其还原力A700为0.44,超氧自由基清除率和·OH清除率分别为68.86%和21.20%。      

蛋清肽的抗氧化稳定性与功能特性

选用胃蛋白酶水解冻干蛋清制得蛋清肽,测定蛋清肽的抗氧化稳定性及功能特性。研究温度和pH值对蛋清肽抗氧化稳定性的影响以及蛋清肽的乳化性、吸水能力和吸油能力。结果表明：随着蛋清肽质量浓度的增加其清除羟自由基( ·OH)、超氧阴离子自由基(O2－ ·)及DPPH自由基的能力均随之增加;温度与pH值对蛋清肽的抗氧化活性影响较大,在pH12.0条件下存放4h后其抗氧化活性消失;蛋清肽具有较好的乳化能力、乳化稳定性、吸油和吸水能力,这些均有利于其在食品和化妆品行业中的应用。     

非洲鲫鱼蛋白酶解物的抗氧化研究

采用枯草杆菌碱性蛋白酶酶解非洲鲫鱼蛋白,以酶解液清除羟自由基的效果为分析指标,采用单因素和正交试验,分析酶解的pH值、温度、时间、肉水比等因素对酶解效果的影响,研究酶解的最佳工艺参数;同时,通过分析非洲鲫鱼蛋白酶解液对·OH自由基清除作用、O2·-自由基清除作用、时脂肪氧合酶的抑制作用、在亚油酸氧化体系中的抗氧化性、测定酶解物的还原能力等,对酶解液的抗氧化性进行研究.结果表明,罗非鱼蛋白的最佳酶解条件是,在pH8.0,温度60℃,肉水比(干鱼粉与水比)1:8(质量分数),酶解时间为4 h;非洲鲫鱼蛋白酶解物有明显的抗氧化作用.     

芝麻蛋白酶解物的抗氧化活性研究

对芝麻蛋白酶解物进行非油体系及油体系的体外抗氧化活性研究.结果表明,随酶解物添加量的增多,其总还原能力、对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除能力也随之变强;酶解物可以有效地抑制猪油、亚油酸和Fe2+诱发卵黄脂蛋白过氧化体系的氧化;在卵磷脂蛋白体系中,酶解物的抗氧化效果与维生素C的效果相近.     

小黄鱼蛋白酶解液抗氧化活性研究

本文以小黄花鱼为原料,利用蛋白酶解技术对小黄鱼蛋白进行酶解,分别选取4组水解度不同的蛋白酶解液,测定其对羟基自由基、超氧阴离子自由基和DPPH自由基的清除能力,以评定其抗氧化效果。结果表明:小黄鱼蛋白酶解液对羟自由基、DPPH自由基的清除效果比较明显,对超氧阴离子也有一定的清除效果。由此可知小黄鱼酶解液是一种比较好的抗氧化剂,在功能性食品中作为添加剂具有较好的应用前景。     

酪蛋白酶解物体外抗氧化作用的研究

采用正交试验设计,以羟自由基清除率为衡量指标,筛选三种蛋白酶水解酪蛋白的最佳条件。试验结果表明,木瓜蛋白酶最佳酶解条件为pH7.5,酶浓度8%,温度45℃,反应时间90min,羟自由基清除率为71.28%,与同浓度维生素C、维生素E的清除率差异均不显著(p>0.05);枯草杆菌蛋白酶(As1.398)最佳酶解条件为pH7.0,酶浓度2%,温度50℃,反应时间90min,羟自由基清除率为68.60%;胃蛋白酶最佳酶解条件为pH1.4,酶浓度6%,温度37℃,反应时间30min,羟自由基清除率为66.53%。试验发现,不同的酪蛋白酶解物都有抗脂质过氧化作用,最大抑制率为59.28%。     

椰肉蛋白酶解及其产物的抗氧化活性研究

将新鲜椰肉粉碎脱脂,利用碱溶酸沉法制备椰肉蛋白。用Alcalase碱性蛋白酶、Neutrase中性蛋白酶、菠萝蛋白酶、Papain木瓜蛋白酶酶解椰肉蛋白,以DPPH自由基清除能力和水解度为指标对酶解过程进行分析,筛选出最适合制备抗氧化酶解物的酶为Alcalase碱性蛋白酶。然后采用单因素及多指标正交实验设计优化Alcalase碱性蛋白酶酶解条件,其中酶解温度和底物浓度对DPPH自由基清除率影响最大。优化后的制备参数为:酶解温度50℃,pH值10.5,加酶量14000 U/g,酶解时间7 h,底物浓度2%,该条件下水解液中蛋白含量为15.8 mg/mL,水解度和DPPH.清除率分别为29.16%和89.07%,椰肉蛋白酶解物显示出较强的抗氧化活性,接近同一浓度下谷胱甘肽的抗氧能力,比同浓度Vc的DPPH自由基清除率高3.33倍。     

沙棘籽蛋白酶解物抗氧化作用初探

研究了沙棘籽蛋白酶解物的抗氧化能力。以沙棘果籽为原材料,制备沙棘籽蛋白酶解物,测定其还原能力、抗脂质过氧化活性以及羟基自由基引起DNA损伤的保护作用;测定其对超氧阴离子自由基、羟基自由基和DPPH自由基的清除率。结果表明:沙棘籽蛋白酶解物具有较强的还原能力,对光照核黄素产生的超氧阴离子自由基、羟自由基和DPPH自由基均有较强的清除作用;具有抗脂质过氧化的活性和羟基自由基引起DNA损伤的保护作用。研究表明,沙棘籽蛋白酶解物是一种优良的天然抗氧化剂。     

蚕蛹蛋白酶解制备抗氧化肽的初步研究

将蚕蛹通过粉碎和丙酮脱脂后,得到蚕蛹蛋白粉.用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶酶解蚕蛹蛋白粉,以DPPH清除能力为指标对酶解过程进行分析,结果表明胃蛋白酶对蚕蛹蛋白有较好的酶解效果.然后通过正交优化胃蛋白酶的酶解条件,并研究水解产物多肽的体外抗氧化活性.