一种耐高温α-淀粉酶高产菌株的选育方法

以一株产耐高温α-淀粉酶菌株（地衣芽孢杆菌）为出发菌株,经过原生质体制备后由NTG（亚硝基胍）药物诱变,从大量突变株中筛选获得一株高产、稳定的耐高温α-淀粉酶产生菌.摇瓶发酵酶活由选育前的2800u/ml提高到了4100u/m左右,提高了近45%.     

γ-亚麻酸生产菌株的诱变选育

采用紫外线和硫酸二乙酯对深黄被孢霉As3,3410和雅致小克银汉霉As3,2717进行诱变,筛选出一株高产γ-亚麻酸的突变株H3,3410-5.突变株H3,3410-5每升发酵液中干菌体得率为24.3 g,油脂含量为10.1 g,而出发菌株仅为21.2 g和8.4 g.气相色谱分析突变株H3,3410-5所产γ-亚麻酸的量占总脂的9.43%,出发菌株仅为8.64%.     

多形汉逊酵母的诱变及突变株的筛选

为获得多形汉逊酵母(Hansenulapolymorpha)营养缺陷型突变株,以亚硝基胍(NTG)、硫酸二乙酯(DES)为诱变剂诱变多形汉逊酵母HP 1,使用制霉菌素对诱变后的菌悬液进行富集筛选,并对诱变筛选条件进行了优化,筛选出16株ade、11株ura、8株leu营养缺陷型突变株及1株ura、Mut-(不能利用甲醇)双突变株。     

几种金属离子对高效产氢细菌产氢能力的促进作用

金属离子Fe2 + 、Ni2 + 、Mg2 + 在生物产氢机制中有着重要作用 .在适当浓度下 ,研究金属离子对高效产氢细菌产氢能力的促进作用 ,是解决细菌产氢效率不高这一关键问题的有效手段之一 ,也加快了发酵法生物制氢技术产业化进程 .间歇实验结果表明 ,铁、镍和镁等金属离子对高效产氢细菌———B4 9产氢能力有明显的促进作用 ,使B4 9的最大产氢速率和平均产氢速率分别由 8 6 5和 0 36mmol·(g·h) -1提高到 2 8 0 1和1 95mmol·(g·h) -1.3种离子对B4 9产氢能力促进作用的顺序为Fe2 + >Ni2 + >Mg2 + ,Fe2 + 和Ni2 + 是促进发酵产氢的直接因素     

响应面法优化黄杆菌突变株产脂肪酶摇瓶发酵条件

应用响应面法对经超临界CO2诱变获得的黄杆菌突变株(Flavobacterium sp. YY25-H0.5)产脂肪酶的摇瓶发酵条件进行优化.首先应用Plackett-Burman设计对影响产酶的因素进行效应评价,筛选出3个主要影响因素:起始pH,橄榄油含量和Triton X-100含量.然后用响应面法对主要因素进行优化,得出最适条件:起始pH6.90,橄榄油含量1.17 %和Triton X-100含量0.33%.YY25-H0.5在优化条件下摇瓶发酵24 h所产脂肪酶为38.9 U/mL,是优化前的1.34倍.该突变株的产酶活力在产脂肪酶的细菌中居较高水平.     

γ-亚麻酸生产菌株的诱变选育

采用紫外线和硫酸二乙酯对深黄被孢霉As3,3410和雅致小克银汉霉As3,2717进行诱变,筛选出一株高产γ-亚麻酸的突变株H3,3410-5。突变株H3,3410-5每升发酵液中干菌体得率为24.3 g,油脂含量为10.1 g,而出发菌株仅为21.2 g和8.4 g。气相色谱分析突变株H3,3410-5所产γ-亚麻酸的量占总脂的9.43%,出发菌株仅为8.64%。     

产壳聚糖酶菌株的单因素及复合条件诱变育种

以产壳聚糖酶菌株M2为出发菌株,分别采用紫外线诱变、亚硝酸钠诱变及两者的复合诱变方式对其孢子悬液进行诱变处理,以获得高产壳聚糖酶的突变菌株为目的。结果表明,突变株的酶活力高达8.135 U/mL,比原始出发菌株提高了1.381倍。经比较分析验证,复合诱变的方法是寻找高活力突变菌株的较好方法,而单因素的紫外诱变方法也具有简单快捷的优势,复合诱变比紫外线诱变后的产壳聚糖酶菌株酶活力提高了25.15%,比亚硝酸钠诱变后的菌株酶活力提高了32.82%。     

D—异抗坏血酸产生菌的筛选及诱变育种

本文从85株霉菌中,筛选得到了六株青霉属D-异抗坏血酸(EA)产生菌,其中点青霉2553产酸能力较高.通过UV、DES或~(60)Coγ-射线对其单孢子进行诱变处理,并进行随机筛选和理性化筛选,获得一最高正变株,其产酸水平达14.47mg/ml,较出发菌株提高50%.     

中性纤维素酶高产菌株的诱变选育及产酶条件

通过紫外线和γ射线交替诱变，筛选得到一株高产纤维素酶的突变茵株BE40-39．与出发株相比，其产酶能力提高1．3倍，发酵性状与出发菌株也有明显的差异．突变菌株发酵试验发现，Avicel是突变菌株产酶最合适的纤维素质碳源．通过对发酵培养条件的试验，得出最佳培养条件是：Avicel质量浓度为0．1g／dL，胰蛋白胨质量浓度为0．3g／dL，最适发酵温度为30℃，最佳培养基初始pH4．2，发酵5d达到产酶高峰．     

复合菌群降解玉米秸秆协同产氢特性

为加快生物制氢工业化进程,利用玉米秸秆这类来源广泛、储量巨大和价格低廉的可再生生物质纤维素资源作为发酵产氢的原料,从连续流发酵产氢反应器(ZL92114474.1)中新分离筛选出一株高效纤维素降解产氢细菌Clostridium sp.X9(NCBI注册号:EU434651)和一株高效产乙醇发酵产氢细菌Ethanoigenens harbinenseB2(NCBI注册号:EU639425),通过构建高效降解纤维素发酵产氢复合菌群进行同步降解玉米秸秆发酵产氢.结果表明,对玉米秸秆进行酸化汽爆预处理后可以显著提高复合菌群的产氢能力.复合菌群X9和B2比单一菌种具有更理想的降解玉米秸秆发酵产氢的能力,两菌种间存在协同产氢效应.复合菌群X9和B2降解玉米秸秆发酵产氢获得的最大产氢率和玉米秸秆降解率分别为8.7mmol/g和74%.液相代谢末端产物主要为乙醇、乙酸和丁酸.这说明复合菌群X9和B2在以木质纤维素为发酵底物的工业化生物制氢领域中具有很好的应用发展前景.     

Mutagenesis and selection of high efficiency hydrogenproducing mutants by ultraviolet radiation

Energy sources are extremely important for theworld to survive, develop and prosper. At present, fos-sil fuels are the major global energy resource but theycause environmental problems during combustion, suchas global warming and acid rain, which have started toaffect the earth’s climate, weather condition, vegeta-tion and aquatic ecosystems, as well as creating serioushealth issues[1 -3]. Considering the energy security andthe global environment, there is a pressing need to ex-ploit new non-…     

Increase Hydrogen Production by Hydrogen-producing Mutant UV-d48 in Comparison with Wild Parent Strain Etanoligenens sp ZGX4

Hydrogen production by hydrogen-producing mutant strain UV-d48 was one typical ethanol-type fermentative H2-producing mutant, which the main metabolic end production was ethanol and acetic acid. Compare to the wild type strain, the activity of hydrogenase of mutant UV-d48 was stronger in course of growth and fermentation. It can evolve hydrogen at stronger ability and a greater rate than that of its parent wild type, namely ZGX4. Resting cells of UVd48 and Ethanoligenens sp ZGX4 were set up in a batch mode in phosphate buffered saline (PBS) to decouple growth from hydrogen production at the expense of glucose of varying composition. Mutant UV-d48 evolved more hydrogen than ZGX4at glucose concentrations ranging from 2 mmol/L to 200 mmol/L. The difference in the amount of H2 evolved by both strains decreased as the concentration of glucose increased. The maximal H2 yield and H2-producing rate by strain UV-d48 was 3091.1 mL/L and 54 mL/(hODunitL) respectively, at a glucose concentration of 60 mmol/L. With strain ZGX4, the maximal H2 yield and H2-producing rate was 2 180.2 mL/L and 33 mL/(hODunitL) under these conditions, respectively.Experiments using wastewater with certain content molasses yielded similar results. In each case, strain UV-d48 evolved hydrogen at a faster rate than the wild type, showing a possible potential for commercial hydrogen production.     

紫外诱变获得耐高浓度丙烯腈菌株的研究

为获得耐高浓度丙烯腈的菌株,利用紫外线对珊瑚诺卡氏菌进行诱变,并将诱变后生长情况较好的突变株在含一定浓度丙烯腈的培养基中进行筛选．结果表明：在紫外灯功率为20w,照射距离为10cm的条件下,诱变时间为3min和4min,致死率均大于90％;而诱变时间为5min,致死率为100％．诱变之后。从含低浓度丙烯腈的的培养基中,筛选出了9株有利突变的菌株．通过在含高浓度丙烯腈的培养基中复筛得到2株耐5．82％丙烯腈的突变株,其诱变时间为4min．     

利用5-氨基乙酰丙酸脱水酶缺失的重组大肠杆菌合成5-氨基乙酰丙酸

生物法合成5-氨基乙酰丙酸（5-ALA）大多通过添加5-ALA脱水酶（ALAD）的抑制剂乙酰丙酸（LA）减少5-ALA的降解,造成生产成本增高,发酵工艺复杂．本文利用ALAD缺失的大肠杆菌ZSEc2作为出发菌株,通过紫外诱变的方法,获得可利用外源血红素恢复正常生长的大肠杆菌突变株ZGEcl,并过表达来自沼泽红假单胞菌的5-ALA合成酶（ALAS）基因,最终建立一条不需要添加ALAD抑制剂的5-ALA的生物合成新路线．经过培养基初步优化,重组菌可在胞外积累约1g／L的5-ALA．     

复合诱变选育高效生物破乳剂产生菌及其特性

为提高破乳性能,以一株生物破乳剂产生菌Bacillus mojavensis XH1为出发菌株,进行紫外和亚硝基胍复合诱变处理,经过筛选分离和连续传代得到一株遗传稳定性较好的高效生物破乳剂产生菌突变株XN5．在碳源为10 g／L葡萄糖和4％ (体积分数)液体石蜡的混合碳源、氮源为40 g／L NH₄Cl与10 g／L酵母膏的混合氮源、温度30 ℃、初始pH=65、摇床转数为140 r／min的培养条件下,培养24 h后,突变菌株的12 h和24 h破乳率分别为9417％和9867％,比原始菌株XH1提高了6481％和1512％．     

具有吸收紫外线功能的透明包装材料研究

阐述了紫外线对食品等损坏机制 ,分析了解决的办法 ,着重论述了可吸收紫外线的透明包装材料的特性、制备及应用。希望能促进这一新型包装材料和技术的发展。     

产氢产乙酸菌株AX2的生长条件及产乙酸特性

产氢产乙酸菌群在参与厌氧消化过程的各类微生物菌群中起着承上启下的作用,然而,目前产氢产乙酸菌的纯培养物很少,对其生理生态习性的了解也十分有限.为增加产氢产乙酸菌资源,了解其生理生化特性,通过丙酸和丁酸混合培养基,从厌氧活性污泥中筛选到一株具有产氢产乙酸特性的葡萄球菌(Staphylococcus)AX2,对其生长条件及转化丙酸和丁酸为乙酸的能力进行研究.结果表明,菌株AX2在丁酸培养基(2.4 g/L)和丙酸培养基(2.31 g/L)中的乙酸产量可分别达到278 mg/L和222 mg/L,并在以氯化铵为无机氮源、pH为7.0、35℃等条件下具有最佳的增殖能力.菌株AX2对丙酸、丁酸有较强的乙酸转化能力.     

大肠杆菌ATCase抗反馈抑制突变体的构建及其对胞苷积累的影响

为解决胞苷生物合成途径中天冬氨酸氨甲酰转移酶受胞苷三磷酸反馈抑制调节的问题,通过对其碱基序列和蛋白质结构分析,利用基因定点突变的方法构建了大肠杆菌的ATCase突变酶,得到三个突变体：M1（H20L）、M2（K60E）、M3（K94E）,并在E.coli DH5α中对融合蛋白进行了表达．酶活测定表明,M1、M2、M3的ATCase酶相对活性都比野生型M0的高,分别为野生型M0的1．10、1．22和1．37倍,且比活力都有不同程度提高．与含野生型pyrBl基因的M0相比,含突变型基因的M1、M2和M3均对15mmol／L的CTP具有强的抗反馈抑制作用,且M1、M2和M3的抗CTP反馈抑制作用分别是M0的5．4、6．0和8．5倍．最后将各突变质粒转入到E．coli Cytl0（Acdd）中进行发酵培养,结果表明,与未含突变基因菌株相比,各含突变基因菌株的胞苷积累量均有不同程度的提高,说明ATCase定点突变使胞苷的合成积累途径得到了不同程度的强化．