纳豆激酶纤溶活性研究

通过制备纳豆提取液、纳豆激酶粗酶,对纳豆激酶纤溶活性进行研究。结果表明:纳豆激酶纤溶活性最适pH为8.0,pH6~10溶液中40℃以下基本稳定,pH<5失去纤溶活性;模拟胃环境的酸性条件下,粗酶失去纤溶活性,而纳豆浸提液纤溶活性保持25%;SDS-PAGE电泳显示,胰蛋白酶对纳豆激酶成分没有降解作用;体外溶栓作用表明,纳豆激酶溶解纤维蛋白的方式是直接溶解,而不是通过激活纤溶酶原。     

紫外分光光度法测定纳豆激酶体外纤溶活力

建立短时间、定量测定纳豆激酶体外纤溶活力的方法。在体外反应体系中制备血纤维蛋白底物,向体系中加入待测样品(纳豆激酶),进行纤溶反应。用紫外分光光度计测定纳豆激酶水解纤维蛋白后生成的可溶性产物的吸光值。由此对纳豆激酶体外纤溶活性进行定量测定并进行方法可行性分析。该方法具有较好的灵敏度、精密度和准确度,用时短,该方法适用于纳豆激酶体外纤溶活性的定量分析。     

基于分光光度法构建纳豆激酶纤溶活性快速测定方法

为建立一种快捷、有效的纳豆激酶纤溶活性测定方法,在研究纤维蛋白平板法的基础上,构建了以透明圈面积为中间参数的纳豆激酶纤溶活力与吸光度值之间关系模型,通过测定纳豆激酶显色反应中的吸光度值,直接获得纳豆激酶的纤溶活性。结果显示改进后的酪蛋白方法可行,其模型方程为y=1877.77x-481.08(R2=0.9924)。验证结果显示模型相关性强,准确度较高,操作简便、快速、检测成本低,是一种高效的纳豆激酶纤溶活性快速检测方法。     

纳豆激酶的纯化及性质研究

从固态发酵培养的纳豆中提取纳豆激酶 ,采用盐析、疏水层析、离子交换层析等方法 ,对提取液进行纳豆激酶的分离纯化。经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定 ,活性酶蛋白为单一组分 ,并测得其分子质量为 2 8ku。纳豆激酶在pH5 0～ 1 0 0 ,4～ 3 7℃范围内具有较好的稳定性 ,其纤溶活性可被 0 1mmol/L的PMSF完全抑制。体外溶栓实验表明 ,纳豆激酶为纤溶酶而不是纤溶酶原激活剂。     

纳豆激酶液体发酵技术研究进展

纳豆激酶是一种由纳豆菌产生的具有强烈纤溶作用的丝氨酸蛋白酶,与传统的一些溶栓剂相比,其具有安全性好、成本低、经口服后可迅速入血,纤溶活性强,作用时间长等优点。有望被开发为新一代的口服抗血栓药物。现就纳豆激酶的结构、性质、功能以及开发现状和应用前景等方面进行了综述。     

纳豆激酶分离纯化及纤溶活性研究

经过生理盐水浸提、(NH4)2SO4分级沉淀、Sephadex G-100凝胶层析等纯化步骤,从纳豆中获得层析纯的纳豆激酶,纯化倍数15.6,回收率10.2%,SDS-PAGE电泳显示为二个组分,分子量在29000左右。对其纤溶性质研究表明:纳豆激酶活性的最适pH为8.0,pH6～10溶液中40℃以下基本稳定,pH<5失去纤溶活性;模拟胃环境的酸性条件下,粗酶失去纤溶活性,而纳豆生理盐水浸提液纤溶活性保持25%;SDS-PAGE电泳显示,胰蛋白酶对纳豆激酶成分没有降解作用;体外溶栓作用表明,纳豆激酶溶解纤维蛋白的方式是直接溶解,而不是通过激活纤溶酶原。     

纳豆激酶基因在酿酒酵母中的表达

目的:从纳豆芽孢杆菌基因组DNA中扩增纳豆激酶基因,以实现该基因在酿酒酵母中的表达.方法:通过PCR方法扩增纳豆激酶基因,利用DNA重组技术构建重组质粒pYES2-NK,转化酿酒酵母H158感受态细胞;经β-半乳糖诱导表达后,用纤维蛋白平板法检测纤溶酶活性.结果:克隆到大小为1192bp的纳豆激酶基因,编码397个氨基酸;活性检测表明酿酒酵母发酵液的上清液具有纤溶酶活性.结论:纳豆激酶基因在重组酿酒酵母中实现了分泌表达.     

纳豆芽孢杆菌产纳豆激酶发酵工艺控制及纤溶酶分析

基于摇瓶发酵优化结果,在10 L发酵罐中研究了纳豆芽孢杆菌TN-02产纳豆激酶的发酵控制工艺,分析了发酵产物中纤溶酶的组分纯度。在放大发酵过程中,考察了培养温度和主要碳、氮源的流加补充对产酶的影响,并利用卡那霉素抗性基因kan对纳豆芽孢杆菌TN-02中的纳豆激酶基因aprN进行了部分替换和插入失活,获得了aprN突变的重组菌TN-021。结果表明,通过温度的阶段性控制和甘油、胰蛋白胨补料发酵,获得纳豆激酶的最高表达量为13 978.3 U/mL,是摇瓶发酵最高表达量的1.8倍;在菌株TN-021的摇瓶发酵产物中未检测到纤溶酶活力,证明了纳豆激酶是纳豆芽孢杆菌TN-02发酵产物中唯一纤溶酶。研究结果为纳豆激酶高水平发酵放大工艺控制奠定了基础,同时为纳豆激酶的品质分析方法提供参考。     

纤溶活性重组纳豆激酶在大肠杆菌中的表达

通过PCR方法扩增纳豆激酶成熟肽和纳豆激酶酶原(proNK)基因片段,并分别克隆到表达载体pET28a上,构建与His标签融合表达的重组表达质粒pET28a-NK和pET28a-proNK,转化大肠杆菌宿主菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳和纤维蛋白平板检测目的蛋白的表达及表达产物的纤溶活性.结果表明,纳豆激酶成熟肽基因在大肠杆菌中的表达产物以包涵体形式存在,表达产物没有纤溶活性;纳豆激酶酶原基因在大肠杆菌中的表达产物能自我剪切,形成有纤溶活性的纳豆激酶,但同时对宿主细胞有降解毒性.     

纳豆激酶研究进展及其应用

本文概括了纳豆激酶的基本性质,论述了溶血栓的作用机制包括直接溶栓作用;刺激血管内皮细胞产生t-PA;激活体内尿激酶原转变为尿激酶;通过降解和失活纤溶酶原激活剂的抑制剂来调控纤溶作用.此外还介绍了该酶的降血压作用,使用的安全性和有效性以及国内外纳豆激酶相关产品的开发状况和市场情况.     

首饰结构设计

结合首饰设计和科学技术的发展现状,分析了首饰结构在首饰设计中的重要意义,提出了首饰结构设计的定义:主要指首饰设计中各个部件、造型元素之间的组织方式.同时,分别从首饰结构的作用和加工工艺的角度对连接结构、功能结构、钻孔结构、镶嵌结构和螺旋结构等设计方式进行了分类探讨.结合首饰结构创新设计的具体实例简要归纳了首饰结构设计的原则和方法.     

负泊松比结构纺织材料的研究进展

从负泊松比泡沫与负泊松比聚合物的结构着手,揭示了负泊松比材料微观结构内凹的凹角结构和内旋的折叠结构为材料具有负泊松比效应的本质,是负泊松比纺织材料的结构设计理念。通过对高聚物合成纤维、纱线与织物等负泊松比纺织材料的结构分析,其结果也表明：负泊松比纤维的结构基础为内凹的凹角结构和内旋的折叠结构,负泊松比纱线的结构基础为内旋的折叠结构,负泊松比织物的结构基础为内凹的凹角结构和内旋的折叠结构,与负泊松比高分子材料的微观结构相似。通过对负泊松比材料的结构研究和发展现状分析,可提升纺织材料技术、增加新功能纺织品。     

特殊复合结构钢丝绳

介绍复合结构钢丝绳常见形式,分析4种特殊复合结构钢丝绳结构组成:在线接触结构外不等捻距捻制1层线接触结构,形成线-点-线复合结构;在线接触结构外不等捻距捻制2层钢丝,形成线-点-点复合结构;在线接触结构外不等捻距捻制3层钢丝,形成线-点-点-点复合结构;在两线接触结构间增加与两线接触结构捻距不等的1层钢丝,形成线-点-点-线复合结构。从分析大规格钢丝绳生产技术难度角度出发,指出4种复合结构钢丝绳生产和使用的优劣势。     

男内裤的分体结构及其形态探析

本文依据男性下肢带的体表与截面形态,深入研究了男子内裤不同的分体结构及其形态特征,提出了不分体的平面结构、二分体组合的半立体结构、三分体组合的立体结构以及单体独立结构,揭示了这四种分体结构的特点,探讨了分体结构在矫形男内裤中的应用方法和规律。研究表明男内裤的分体结构决定着构成形态,分体程度越高,立体效果越好;分体程度越低,造型越趋于平面化;而且分档点越往前移,男性体征就越明显,分档点越往后移,男性体征就越模糊;分体结构在矫形男内裤中的应用可分为突显体形的局部分体结构和掩饰体形的局部平面结构。     

机织物结构相模型剖析和修正

针对机织物结构相传统模型未能敏感反映不同组织结构状态差异的问题,剖析了模型的约束条件和不足,建立了能够有效反映组织信息的结构相模型。提出了相对屈曲波高概念用于表征不同织纹组织中纱线的弯曲程度,为结构相模型的修正提供了理论参考。研究结果表明：结构相改进模型随屈曲波高的增加而增加,但呈非线性关系;对于不同织纹组织,形成等支持面的结构相是不固定的（0 结构相除外）,相同屈曲波高对应着不同的结构相,三原组织的结构相值之间存在平纹＜ 斜纹＜ 缎纹;在低结构相区域,结构相与屈曲波高可看成非线性关系,在高结构相区域改进模型与传统模型有统一性。     

纸家具的结构和应用形式分析

本文探讨了纸家具的基本特性、结构及纸质材料在家具中的应用形式。通过对纸家具环保性、经济性和舒适性等基本特征的分析,总结了纸家具的层叠结构、插接结构、折叠结构等典型结构和纸浆模塑一体结构、糊纸结构、五金件连接结构等新型结构的基本形式和特点,探讨了纸质材料在纸家具中的应用方向和途径,探索了纸家具的研究前景和方向,即应从纸家具基本性能提升、对其他家具结构进行借鉴和结构的复合使用等方面对纸家具进行进一步研究。将纸质材料应用于家具中,既可以充分发挥纸质材料的特性,又可以依据其合理的结构设计,制成不同造型和审美风格的纸家具,促进纸质材料在家具中的应用,赋予家具个性化、功能性、创新性和环保性等特点,满足消费者的审美和实用需求。     

蛋类礼盒包装结构的缓冲性能研究

目的研究蛋类礼盒包装结构的缓冲性能。方法以蛋类尺寸为基础,建立可发性聚乙烯(expandable polyethylene. EPE)缓冲单元结构和组合结构,进行静态仿真分析和实验验证,比较结构在形状、叠合层数、组合形式等参数变化时的载荷与位移。结果结构层数变化相同时,单元结构的极限载荷从143N增加到236 N,组合结构的极限载荷从224 N增加到476 N,均呈近线性增长。结论蛋类礼盒包装中,组合结构的承载能力优于单元结构,通过单元结构的组合,可满足不同蛋类的包装要求。     

基于水果包装的可发性聚乙烯结构缓冲性能研究

目的研究可发性聚乙烯水果缓冲包装结构性能。方法以中小尺寸水果包装的圆型结构和方型结构为基础,进行静载实验和跌落冲击实验,分析可发性聚乙烯结构在相关尺寸变化时的缓冲性能。结果随着厚度和宽度的增加,单元结构的载荷逐渐增大,加速度峰值逐渐降低,当宽高比在0.15～0.2变化时,结构的载荷净增值趋于平稳,载荷增长稳定,且圆型结构的承载能力和抗冲击能力均优于方型结构。结论在水果的缓冲包装中,合理设计结构的几何尺寸,更好的发挥材料的缓冲性能,提高结构的缓冲能力和材料利用率,实现缓冲结构的保护功能。     

基于画法几何学的立领结构设计研究

根据画法几何学研究的理论价值及服装结构设计的特点,指出了画法几何学理论与服装结构设计相结合的必要性.通过研究立领结构设计中平面与曲面之间的几何关系,采用画法几何理论分析了立领结构,得出了立领领口线和立领的结构设计方法,为服装结构设计向信息化迈进作出了有意义的探索.     

甲型H1N1流感病毒三维空间结构预测

采用从头计算思想,用改良的遗传算法对甲型H1N1流感病毒的蛋白质空间结构进行预测研究。基于蛋白质空间结构的HP模型,构建甲型H1N1流感病毒蛋白质空间结构的3DHP模型,并利用改良的遗传算法找到最小自由能结构,从而预测得到甲型H1N1流感病毒蛋白质三维空间结构。利用蛋白质空间结构数据建立距离矩阵,通过相关性分析和显著性检验,表明预测结构与已知结构存在高度的一致性。该模型提供了一种快速预测甲型H1N1流感病毒结构的方法。