康氏木霉固体发酵木聚糖酶条件的研究

通过固体发酵培养,经单因素及正交试验分析,得出康氏木霉发酵产木聚糖酶最优条件组合为：麸皮与玉米芯质量比为2∶8,硫酸铵2.5%,MnSO4 0.50%,料水比1∶1.5（g∶mL）,培养基初始pH自然,培养温度30 ℃,发酵时间6 d。在此条件下,康氏木霉固体发酵木聚糖酶活力达11.98 IU/g。该木聚糖酶水解产物富含2～5个木糖分子的低聚木糖。     

酸性木聚糖酶固态发酵条件与粗酶性质研究

利用单因素和正交试验对实验室选育的黑曲霉XZ-3S(Aspergillus niger XZ-3S)菌株的发酵条件进行了研究.得到试验因素的产酶条件为天然原料麸皮与玉米芯的比例为5∶3,接种量1.0％(孢子悬液,孢子浓度5×107个/mL),料水比例1∶1.7,培养基初始pH值为7.5,培养温度28℃、培养时间65h,其间翻曲2～3次,在上述条件下木聚糖酶的活力可达23612.38IU/g干曲.酶学性质初步研究显示,酶的最适反应温度和pH值分别为50℃和5.0,低于50℃、pH3.0～8.0酶稳定.     

木聚糖酶产生菌的筛选、发酵及酶学性质

该研究对木论自然保护区土壤中高产木聚糖酶的菌株进行了分离,经菌落形态观察、ITS基因序列分析对菌株进行了鉴定,并通过单因素固态发酵实验确定最佳产酶条件。结果表明,筛选到1株高产木聚糖酶菌株,并鉴定为黑曲霉（Aspergillus niger）。其最佳产酶培养基配方：玉米芯与麸皮质量比为1∶7、氮源为硫酸铵（添加量1.4 g/L）、初始pH值为5.0、料水比为1∶3.5（g∶mL）,接种量为7.5%。在此优化条件下,木聚糖酶酶活最高可达10 801.3 IU/g。酶学性质研究表明,木聚糖酶的最适作用pH值为5.5、最适作用温度为37 ℃。     

响应面法优化小刺青霉16-7产纤维素酶液体发酵工艺

在单因素试验的基础上,采用Plackett-Burman试验设计及响应面分析,利用Minitab软件,对纤维素酶高产菌小刺青霉（Penicillium spinulosum）16-7进行发酵工艺条件的优化。通过Plackett-Burman试验筛选出影响产酶的3 个主要因素,即稻草-麸皮（碳源）添加量、培养温度和培养时间。在此基础上通过最陡爬坡试验和响应面分析法进行回归分析。结果表明：当稻草-麸皮添加量为3.45 g/100 mL、培养温度为27.11 ℃和培养时间为146.27 h时,酶活力最高,此条件下滤纸酶酶活力预测值为132.53 U/mL。经过修正,选择稻草-麸皮添加量3.45 g/100 mL、培养温度27 ℃、培养时间146 h,此条件下测得羧甲基纤维素酶酶活力为387.58 U/mL、滤纸酶酶活力为128.86 U/mL,滤纸酶酶活力比优化前提高49.07%。     

枯草芽孢杆菌Z-3产木聚糖酶固态发酵工艺优化

以木聚糖酶活力为响应值,通过单因素及响应面试验优化克氏原螯虾肠道来源枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）Z-3产木聚糖酶的固态发酵工艺。结果表明,最优固态发酵工艺为培养时间3 d、培养温度37 ℃、初始pH值5.0、装料量30 g/250 mL,接种量2.5%,碳源为麸皮与玉米芯混合物,麸皮占比60%,氮源为氯化铵。在此最优发酵工艺条件下,木聚糖酶活力为3 459.58 U/g湿基,较未优化前（2 079.1 U/g湿基）提高66.40%。     

大蒜皮降解芽孢杆菌属细菌J-5发酵条件优化

利用响应面法对芽孢杆菌属细菌J-5菌株产羧甲基纤维素酶（carboxymethyl cellulase,CMCase）的发酵条件进行优化。通过单因素试验,研究了氮源、碳氮比、初始pH值、料水比、发酵温度、发酵时间、辅助碳源等对产CMCase酶活性的影响,再此基础上选择料水比、碳氮比、初始pH值三因素进行响应面设计,考察各因素对CMCase酶活性的影响及相互作用。确定最佳产酶条件为碳氮比25∶1（m/m）、初始pH 3.2、料水比1∶3.25（m/V）、发酵温度38 ℃、发酵时间144 h、辅助碳源1 g/100 g,此条件下,CMCase酶活力预测值为58.15 U/g,实测值为57.996 U/g。该菌株可产生较高酶活力的CMCase,可有效地降解大蒜皮。     

果胶酶生产及其在苹果汁澄清中的应用

对黑曲霉(Aspergillus niger)LLW-1菌株固态发酵生产酸性果胶酶的发酵培养基组成和发酵条件以及利用果胶酶澄清苹果汁的工艺条件进行了研究。固态发酵产酶条件为:250 mL三角瓶装10 g基料(豆饼∶麸皮=2.0 g∶8.0 g),(NH4)2SO420 g/kg,Tween-80 1.5 g/kg,玉米浆50 mL/kg,KH2PO43.0 g/kg,CaCl21.0 g/kg,MgSO4.7H2O 1.0 g/kg(均相对于基料),料水比1∶1.2,自然pH;31℃静置培养72 h,期间在为24 h翻曲1次,果胶酶活力达2 418 IU/g(干曲)。酸性果胶酶澄清苹果汁的工艺条件为:果汁自然pH值,果胶酶用量500IU/L(果汁),明胶添加量0.05 g/L(果汁),酶解温度和时间分别为45℃和1 h。     

木霉RS30固体发酵产木聚糖酶条件研究

对实验室选育的木霉RS30(Trichoderma RS30)菌株,固态发酵产木聚糖酶条件进行了研究.得到试验因素的产酶条件为天然原料玉米秸与麸皮的比例为4∶1,种龄为96h、接种量1×107cfu/mL,培养温度为30℃,培养时间为120h,在上述条件下木聚糖酶酶活可达3247IU/g.     

绿色木霉HY-07产纤维素酶发酵工艺的优化

以玉米芯、麸皮为主要原料,通过单因子及正交试验对绿色木霉HY-07固态发酵生产纤维素酶的产酶条件进行优化。结果表明,最佳产酶条件为:250 mL三角瓶装料量6 g,玉米芯∶麸皮111∶4,固液比10∶.8,吐温80添加量0.2%,K2HPO4含量0.05%,MgSO4.7H2O含量0.025%,(NH4)2SO4含量1%,pH自然,30℃恒温培养7 d,酶活力可达674.44 u/g,比对照增加了50.8%。     

嗜酸乳杆菌GIM1.208产β-葡萄糖苷酶培养基及发酵条件优化

以嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）GIM1.208为研究对象,通过单因素、正交试验和响应面法优化其产β-葡萄糖苷酶的培养基及发酵条件。结果表明,嗜酸乳杆菌GIM1.208发酵产β-葡萄糖苷酶的最佳产酶条件为葡萄糖添加量3.0%,羧甲基纤维素钠添加量0.4%,初始pH值5.5,料液比1∶4（g∶mL）、发酵温度31 ℃,发酵时间24 h,接种量2.6%。在此优化条件下,β-葡萄糖苷酶活力为16.80 U/mL,是优化前的3.90倍。     

利用玉米芯渣产纤维素酶条件的优化

以玉米芯渣为培养基料,通过单因素及正交试验,对绿色木霉T9806菌株固态发酵产纤维素酶的培养条件进行摸索。结果表明,最佳培养基组成为:麸皮15.27%,玉米芯渣22.91%,(NH4)2SO40.4%,MgSO40.12%,CaCl20.12%,ZnSO4 0.08%,加水量61.1%。利用最佳培养基配方,在250mL三角瓶中于35℃下恒温培养96h,纤维素酶酶活可达到8132μ/g干曲。     

利用玉米芯渣产纤维素酶条件的优化

以玉米芯渣为培养基料,通过单因素及正交试验,对绿色木霉T9806菌株固态发酵产纤维素酶的培养条件进行摸索。结果表明,最佳培养基组成为,麸皮15.27%,玉米芯渣22.91%,(NH4)2SO40.4%,MgSO40.12%,CaCl20.12%,ZnSO40.08%,加水量61.1%。利用最佳培养基配方,在250 mL三角瓶中于35℃下恒温培养96 h,纤维素酶酶活可达到1.36×10-4kat/g(以干曲汁)。     

玉米芯多糖的微生物发酵工艺及其单糖组成和体外益生活性研究

以玉米芯多糖含量为指标,对玉米芯发酵工艺进行优化,测定玉米芯多糖的单糖组成,并对其体外益生活性进行评价。确定最终发酵条件为:接种8%枯草芽孢杆菌,添加10%麸皮,纤维素酶添加量为500 U/g,料水比1:1.25(g/mL),发酵时间96 h,发酵温度35℃,该发酵条件下使用苯酚硫酸法测得玉米芯多糖含量为162.61 mg/g,较未发酵玉米芯多糖含量提高了20.16%。HPLC法分析单糖组成结果显示,发酵后玉米芯粗多糖中木糖、阿拉伯糖、半乳糖和甘露糖含量分别增加了152.17%、118.12%、64.73%、36.30%,葡萄糖含量降低57.29%;体外益生活性研究显示,在等量碳源的基础上,添加玉米芯粗多糖后对植物乳杆菌和嗜热链球菌的促生长作用显著优于仅葡萄糖作为碳源组(P<0.05),且添加发酵玉米芯粗多糖组对两种菌的益生作用比添加未发酵玉米芯粗多糖组显著升高(P<0.05)。综上所述,通过微生物发酵技术可增加玉米芯中多糖的含量并改变其单糖组成,同时提高其体外益生活性。     

蛹虫草固态发酵联产多糖和纤溶酶的工艺优化

以玉米粉作为主要原料,利用蛹虫草固态发酵同时生产多糖和纤溶酶。以多糖含量和纤溶酶活力为指标,通过单因素和正交试验优化了蛹虫草固态发酵培养基和培养条件。结果表明:培养基由玉米粉和麸皮构成,比例为18:2（g/g）,料水比例1:1（m/V）,接入6%（V/m）蛹虫草液体菌种,23℃发酵时间3 d。在优化条件下获得浸提液中的胞外多糖含量为3.23 mg/mL,纤溶酶在血纤维蛋白平板上形成的溶圈面积为169.34 mm2。研究结果为生产蛹虫草功能食品基料提供了基础。     

绿色木霉在稻壳和麸皮混合基质上固态发酵生产纤维素酶的研究

以稻壳和麸皮的混合物为主要原料 ,采用绿色木霉 (Trichodermasp 3 2 942 )固态发酵生产纤维素酶。浅盘发酵实验表明 ,稻壳经 4%的NaOH溶液 40℃浸泡 2 4h后 ,以 30 %的质量比添加到麸皮中发酵 ,滤纸酶活和CMC酶活比未经处理时提高了 2 7 5 %和 2 5 1 %;最优发酵条件为 :培养温度 30℃ ,接种量 2 0 %,培养基初始含水量 45 %～ 60 %,此时滤纸酶活和CMC酶活可达 5 1 5IU/g(干物质 )和 38 46IU/g(干物质 )。     

碳源对绿色木霉ZC产中性纤维素酶的影响

筛选得到一株高产中性纤维素酶的绿色木霉ZC,对其培养基中的碳源进行了优化,探讨了碳源的种类、混合碳源以及碳源与麸皮的比例对其产酶的影响,确定了以4 g/dL玉米秸秆粉、1g/dL麸皮为主的发酵培养基,此培养基中纤维素酶滤纸酶活可达321.12 U/mL.