响应面法优化猪血超氧化物歧化酶的提取工艺

为了开发利用猪血资源,采用猪血为原料,以超氧化物歧化酶的比活力为指标,对热变性提取过程中影响超氧化物歧化酶活力的水浴温度、水浴时间和硫酸铜加入量三个因素进行考察,并在此基础上,采用中心组合(Box-Behnken)试验设计及响应面分析对猪血超氧化物歧化酶(SOD)的热变性提取工艺进行优化,将最优热变性条件下提取的上清液通过氯仿-乙醇处理,丙酮沉淀提取粗酶液,并采用Sephadex G-100对粗酶液进行纯化。最后采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对纯化后的酶液进行纯度鉴定。结果表明:水浴温度、硫酸铜加入量对猪血SOD活力影响显著(P0.05),热处理最佳工艺为:水浴温度为66℃,水浴时间为25 min,硫酸铜加入量为3.10%,此时粗酶液的比活力为167.74±0.38 U/mg。经Sephadex G-100纯化后酶液的比活力为6594.55±16.20 U/mg,活力回收率为62.15±0.02%,纯化倍数为39.14±0.36。聚丙烯酰胺凝胶电泳分析酶纯度已到达电泳纯。     

铜盐-热变性法分离提取羊血超氧化物歧化酶工艺条件优化

目的:优化铜盐-热变性法分离提取羊血超氧化物歧化酶(SOD)工艺。方法:采用单因素和正交试验,对影响SOD比活力的主要因素进行研究。结果:铜盐-热变性法分离提取SOD的最优工艺条件为热变性温度65℃、热变性时间15min、添加体积分数2.5%的10mmol/L CuSO4溶液,丙酮用量为溶血液的1.25倍,在此条件下得到的SOD比活力为2338.9U/mg。结论:此方法操作简单,成本低,适合工厂化生产。     

黄棒菜超氧化物歧化酶(SOD)分离纯化的技术

以植物新品种黄棒菜为原料,研究料液比,浸提温度及pH,热变性温度及时间、丙酮加入量等因素对黄棒菜超氧化物歧化酶(SOD)提取效果的影响,利用正交试验与单因素试验优化提取工艺。结果表明,提取SOD的最佳条件为:料液比1︰3(g/mL),浸提温度0℃,pH 7.0,50℃热变性20 min,1.5倍酶液体积的丙酮,此时SOD纯化倍数可达3.17。经层析纯化及真空冷冻干燥,获得SOD成品。最佳条件下处理新鲜黄棒菜叶茎、叶片组织,测得SOD最终比活力分别为7662.23 U/mg,4897.39 U/mg,纯化倍数达17.55、23.08,叶茎更适于提取SOD。经电泳检测,黄棒菜SOD相对分子质量约80 kDa,据文献鉴定为Mn-SOD。试验结果为黄棒菜SOD的分离纯化及资源开发提供技术参考。     

超声波辅助酶法分离提取葡萄酒泥酵母SOD工艺条件的优化

以葡萄酒泥酵母为试材,超氧化物歧化酶（SOD）比活力为指标,在超声功率、超声时间、蜗牛酶质量浓 度、酶解pH值和酶解温度等单因素试验基础上,采用正交试验优化超声波辅助蜗牛酶法提取SOD的工艺条件。结果 表明：提取工艺因素对SOD比活力影响大小顺序为超声时间＞蜗牛酶质量浓度＞超声功率＞酶解pH值＞酶解温度, 1 g湿酵母悬浮于5 mL 0.2 mol/L的磷酸盐缓冲液,其提取SOD最佳工艺条件为超声功率400W、超声时间12 min、 2.0 mg/100 mL蜗牛酶液1 mL、pH 6.6、温度37 ℃,在此条件下,分离提取得到的SOD比活力达192.27 U/mg。结果表 明超声波辅助酶法在葡萄酒泥酵母SOD的提取中具有较高的应用价值。     

酶法辅助提取牦牛血中超氧化物歧化酶的工艺条件优化

以牦牛血血细胞为原料,通过单因素试验和响应面试验优化酶法提取超氧化物歧化酶(SOD)。用超声波和胰酶共同作用血细胞进行溶血处理,以SOD的比活力为指标进行试验,结果表明在超声功率固定300W条件下,得到最优工艺条件为:酶解温度40℃、酶解时间110min、酶解pH7.5、酶添加量0.6%。所得SOD比活力为1410.62U/mg。在此工艺条件下,提取SOD可显著提高SOD比活力。     

响应曲面试验优化猕猴桃中SOD的提取工艺

优化猕猴桃中超氧化物岐化酶(SOD)提取工艺,旨在进一步开发植物SOD酶源。选取猕猴桃为原料,在单因素试验基础上,应用Box-Behnken响应曲面设计,以热变性温度、热变性时间、丙酮沉淀处理为试验因素,以SOD酶活性为响应变量,分析并优化SOD的提取工艺。试验确立了最佳的SOD提取工艺参数为热变性温度57.5℃、热变性时间27 min、V_(丙酮)∶V_(SOD酶液)=0.93,此条件下,SOD酶活性为(835±25)U/mL。     

水力空化作用强化月桂酰氯酰化大豆蛋白工艺的研究

在水力空化作用下,以大豆蛋白为原料,利用月桂酰氯酰化修饰大豆蛋白。设计了产生水力空化作用的强化反应装置,利用单因素实验对水力空化压力、水力空化时间、水力空化温度、料液比对月桂酰氯酰化大豆蛋白产物产率的影响进行了研究。采用响应面实验优化了工艺条件,测定了月桂酰氯酰化大豆蛋白产物的表面活性性能。结果表明:水力空化强化月桂酰氯酰化大豆蛋白最优工艺条件为水力空化压力0.32 MPa、水力空化时间56 min、水力空化温度57℃、料液比1.75∶1,在此条件下,产率为96.5%,酰化产物表面活性性能优越。     

响应面法优化小刺青霉16-7产纤维素酶液体发酵工艺

在单因素试验的基础上,采用Plackett-Burman试验设计及响应面分析,利用Minitab软件,对纤维素酶高产菌小刺青霉（Penicillium spinulosum）16-7进行发酵工艺条件的优化。通过Plackett-Burman试验筛选出影响产酶的3 个主要因素,即稻草-麸皮（碳源）添加量、培养温度和培养时间。在此基础上通过最陡爬坡试验和响应面分析法进行回归分析。结果表明：当稻草-麸皮添加量为3.45 g/100 mL、培养温度为27.11 ℃和培养时间为146.27 h时,酶活力最高,此条件下滤纸酶酶活力预测值为132.53 U/mL。经过修正,选择稻草-麸皮添加量3.45 g/100 mL、培养温度27 ℃、培养时间146 h,此条件下测得羧甲基纤维素酶酶活力为387.58 U/mL、滤纸酶酶活力为128.86 U/mL,滤纸酶酶活力比优化前提高49.07%。     

蜡状芽孢杆菌产中性蛋白酶发酵条件的优化

为提高蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)发酵产蛋白酶的能力,对发酵培养基组成及培养条件进行优化。通过单因素试验研究最适C源及其添加量、最适N源及其添加量、温度、种龄、摇床转速、装液量、pH、时间、接种量等条件对菌株产蛋白酶的影响。在此基础上,利用正交试验设计从9个影响因素中筛选3个主要影响因素,即蛋白胨添加量、温度和装液量;再利用Box-Behnken试验设计进行响应面分析,最终确定蜡状芽孢杆菌发酵产酶条件的最优条件为:蛋白胨添加量7.9g/L,温度26.7℃,装液量56.4mL。优化后,蛋白酶活力达到753.67U/mL,比初始蛋白酶活力(249.50U/mL)提高了2.02倍。     

活性干酵母超氧化物歧化酶提取研究

目的:研究并优化活性干酵母超氧化物歧化酶(SOD)的提取工艺;方法:采用L_9(3~4)正交实验设计,应用邻苯三酚自氧化法测定酶活;结果:提取优化工艺参数为异丙醇浓度90%、搅拌时间18h、第一次丙酮沉淀体积比(丙酮:粗提液)为0.8、第二次丙酮沉淀体积比(丙酮∶粗提液)为0.9,所得酶所得酶活性为840.25U/g,比活力为3361.00U/mg;结论:从活性干酵母提取超氧化物歧化酶(SOD)的最佳提取工艺为异丙醇-丙酮二次沉淀法,大大缩短了生产时间,提高了生产效益,具有极大的应用价值。     

脂溶性胭脂虫红色素的制备及表征

为拓宽胭脂虫红色素在食品及日化品等领域中的应用,以月桂酰氯为改性试剂对胭脂虫红色素的主要成分--胭脂虫红酸进行分子结构修饰,制得脂溶性胭脂虫红色素。通过单因素试验及优化验证,确定了最佳制备条件为：以1.0 g胭脂虫红色素为原料,N,N-二甲基甲酰胺、月桂酰氯的用量分别为15.3 mL、4.5 g,反应温度42.0 ℃,反应时长1 h。在此条件下,胭脂虫红色素的回收率为59.35%。通过紫外-可见分光光度计、傅里叶变换红外光谱仪对脂溶性胭脂虫红色素的结构进行表征,表明胭脂虫红色素和月桂酰氯发生了酯化反应,生成了胭脂虫红酸月桂酸酯,并可溶于食用玉米油中,且稳定性较好,20 ℃条件下溶解度为15.06 g/100 g。     

酸果蔓中SOD酶的提取及活性测定

利用正交法探讨了磷酸缓冲液用量、pH值、提取时间、丙酮用量对酸果蔓SOD酶提取率的影响，并用改良Marklund法测定了酸果蔓中SOD的活性，当在酸果蔓中加入1．5倍的磷酸缓冲液，pH7.8，提取2h，再用1倍体积的丙酮沉淀，酸果蔓中SOD酶粗品的提取率达0．95％；酸果蔓中SOD酶单位体积的活力为433.7U／mL。酸果蔓中SOD酶含量高且活性强。     

钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶分离纯化技术研究

为研究从螺旋藻中分离纯化SOD的最优化方法,采用细胞破碎方法、最佳丙酮用量、最佳硫酸铵饱和度和DEAE-52离子交换层析技术分离纯化螺旋藻中的SOD并作比较分析。结果表明:从螺旋藻中分离纯化的SOD的比活高达2179U/mL,提纯倍数24.2;纯化的SOD经SDS-PAGE分析,呈现的谱带均一且对H2O2非常敏感,推断为Fe-SOD。因此采用优化技术可以从螺旋藻中分离纯化获得高纯度和高比活的SOD。     

甘露糖酯的分离纯化及分析方法研究

本文对脂肪酶酶催化合成月桂酸甘露糖酯的分离纯化作了研究。确定了甘露糖酯的薄层层析(TLC)条件:反应液3μl点样,在正己烷/乙酸乙酯(1:1,V/V)中展开,用5%硫酸乙醇溶液喷雾,在120℃烘箱显色20min。将TLC条件应用到硅胶柱层析分离甘露糖酯,条件为:反应液5ml上硅胶层析柱(硅胶60～100目,柱12×600mm),流动相为正己烷/乙酸乙酯(1:1,V/V),流速为18ml/h,按1管/10min收集洗出液,并用TLC检测、收集产物。采用质谱(MS)方法鉴定了分离纯化的甘露糖酯产物,发现丙酮溶剂中脂肪酶催化合成产物为月桂酸甘露糖的单酯和两种二酯异构体。而用HPLC-MS分析方法证实乙腈溶剂中合成产物为月桂酸甘露糖的单酯、二酯和三酯。     

鹅血中SOD的分离工艺及其抗氧化活性研究

对鹅血中SOD的纯化及抗氧化活性进行了研究.采用丙酮沉淀法对鹅血SOD进行初步纯化、Sephadex G-100进一步精制,并利用SDS-PAGE对酶的纯度检测和分子量测定.结果表明Sephadex G-100凝胶过滤层析对鹅血SOD具有较好的纯化作用,纯化后的鹩血SOD比活力从1 144.896U/mg提高到4 226.513U/mg,SDS-PAGE凝胶电泳显示单一条带,表明已达到电泳纯,且其亚基分子量约为16KD.纯化后的SOD对邻苯三酚自氧化抗氧化活性明显.     

Enhanced E/Z Isomerization of (All‐E)‐lycopene by Employing Iron(III) Chloride as a Catalyst

Catalytic isomerization of (all‐E)‐lycopene to Z‐isomers using iron(III) chloride was investigated and optimized under various conditions of solvents, concentrations of iron(III) chloride, and reaction temperatures. The total contents of Z‐isomers converted were higher in the order of CH₂Cl₂ (78.4%) > benzene (61.4%) > acetone (51.5%) > ethyl acetate (50.8%) at 20 °C for 3 h using 1.0 × 10^?3 mg/mL iron(III) chloride for 0.1 mg/mL (all‐E)‐lycopene. However, the decomposition of lycopene was markedly accelerated in CH₂Cl₂: the remaining lycopene after the reaction for 3 h and 12 h was only 79.4% and 47.5%, respectively. As the concentration of catalyst increased in acetone, the Z‐isomerization ratio of lycopene increased to more than 80%, followed by rapid degradation of lycopene to undetectable levels using >4.0 × 10^?3 mg/mL iron(III) chloride with the above concentration of (all‐E)‐lycopene. Finally, greater isomerization (79.9%) was attained at 60 °C in acetone for 3 h in the presence of 1.0 × 10^?3 mg/mL iron(III) chloride, largely without decomposition of lycopene (remaining ratio of total amount of lycopene isomers after the reaction, 96.5%). As iron(III) chloride has found general use as a food additive for iron fortification and acetone is also widely used in the food field, this method can be applied to the food and beverage processing industry.     

发芽和提取条件对玉米胚芽中超氧化物歧化酶的诱导作用

为提高玉米超氧化物歧化酶(SOD)的活力和提取率,在不同条件下对玉米进行发芽处理,从发芽玉米中剥离胚芽,并在磷酸缓冲液中浸泡,再提取SOD,并测定SOD总活力。结果表明：玉米在30℃、有光照条件下发芽4d,剥离的40g胚芽在0.05mol/L 200mL磷酸缓冲液中浸泡36h,通过胶体磨研磨浸提1h,60℃热沉淀15min,用1.5倍－20℃的丙酮沉淀SOD,经Cellulose-DE-52层析,再经SephadexG-75层析,得到的玉米SOD比活力最高,为4487.28U/mg pro,比未发芽的玉米胚芽提取的SOD的比活力(924.18U/mg pro)提高了3.86倍。     

糖类对羊血超氧化物歧化酶活性的影响

目的：研究糖类对羊血超氧化物歧化酶(SOD)活性影响关系。方法：以离子交换层析法制备的羊血SOD为原料,加入不同浓度的麦芽糖、蔗糖、乳糖、海藻糖、D-葡萄糖、D-果糖、D-木糖和D-甘露糖,25℃分别保温4、24、48、72h和96h后,利用邻苯三酚自氧化法测定SOD酶活力,并计算相对酶活力。结果：海藻糖对羊血SOD有明显的激活和保护作用,高浓度的麦芽糖和低浓度的乳糖有一定稳定作用,其余糖类对SOD活性影响不大。结论：不同糖类在不同浓度下对羊血SOD活性影响不同。     

羊血中超氧化物歧化酶提取工艺研究——热变温度、热变时间和热变方式对SOD提取的影响及最佳工艺条件选择

目的:重点研究热变温度、热变时间、热变方式对SOD分离提取的影响,确定最优工艺参数。方法:采用正交试验设计。由正交试验得出最优组合为A2B2C2,即热变温度55℃,热变时间15min,0.01mol/lCuCl2的添加量2%。结论:热变性是羊血SOD提取的关键,按此工艺热变性后的SOD活性在1000U/mg蛋白以上。