青藏高原狭果茶藨子黄酮纯化工艺及抗氧化活性研究

以青藏高原产的狭果茶藨子为原料,研究其黄酮纯化工艺及抗氧化活性。通过静态吸附试验对D101、D218、D315、HPD-600、AB-8这5种大孔树脂进行筛选,考察上样浓度、上样量、上样流速以及洗脱剂浓度、洗脱流速对狭果茶藨子黄酮吸附和解吸性能的影响,确定最佳树脂类型和纯化工艺条件;以羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基、ABTS自由基清除率和金属螯合能力为考察指标,评价纯化前后狭果茶藨子黄酮的抗氧化能力。黄酮纯化工艺研究结果表明:AB-8大孔树脂对狭果茶藨子黄酮的纯化效果较好,其对黄酮吸附率达93.01%,解吸率达73.54%;在上样浓度12 mg/mL、上样量40 mL、上样流速2.0 mL/min以及洗脱液乙醇浓度60%、洗脱流速2.0 mL/min条件下,狭果茶藨子黄酮纯度从6.09%提高到46.43%。抗氧化试验结果表明:狭果茶藨子黄酮有较强的羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基、ABTS自由基清除能力及金属螯合能力,经过AB-8大孔树脂纯化后其抗氧化活性显著增强,其中对DPPH自由基、羟自由基清除能力及金属螯合能力尤为突出,作用效果甚至强于同浓度下传统抗氧化剂Vc,其对DPPH自由基的清除率最高可达94.08%,金属螯合率最高达81.27%,说明狭果茶藨子黄酮具备开发成新型天然抗氧化剂的潜力。     

野山杏果肉总有机酸的分离纯化及其清除自由基能力的研究

目的:研究新疆野山杏总有机酸的分离纯化工艺及其清除自由基的能力。方法:以总有机酸的含量作为考察指标,筛选分离纯化野山杏果实总有机酸最佳大孔吸附树脂;以Vc作为阳性对照,考察其清除羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_2~ˉ·)和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)的能力。结果:对野山杏有机酸的吸附率与解析性能较好的是AB-8型大孔树脂,其最佳纯化工艺为上样速度为0.034 BV/min,最大上样量为475 mL,以50%乙醇为洗脱剂,最佳洗脱条件为0.067 BV/min,洗脱剂用量为120 mL,提取纯化得到的总有机酸含量为53.23%;野山杏总有机酸对羟基自由基有一定的清除能力,但弱于Vc,质量浓度达到4 mg/mL时总有机酸清除超氧阴离子自由基的清除率为56%,与Vc组相当,有机酸质量浓度8 mg/mL时清除率达到97%,其清除DPPH·能力略强于Vc。结论:AB-8型大孔树脂适合于分离纯化野山杏果肉中总有机酸,野山杏总有机酸具有清除自由基能力。     

新疆红肉苹果多酚的纯化、组成分析与抗氧化活性

本文以新疆红肉苹果为原料,在超声辅助提取红肉苹果多酚的基础上筛选大孔吸附树脂纯化多酚提取物,用高效液相色谱分析纯化后多酚的组成,并以V_C为对照采用体外试验分析其抗氧化活性。结果表明,在5种大孔树脂中NKA-Ⅱ树脂对新疆红肉苹果多酚的吸附和解析效果最好,其静态吸附与解析平衡时间分别为6和10 h;动态吸附和解析试验的最佳纯化工艺为:上样浓度为0.8 mg/mL,上样流速为4.0 BV/h,上样体积为3.5 BV,洗脱液乙醇的浓度为75%;在此条件下,纯化后的新疆红肉苹果多酚的纯度由原来的35%提高至84%。高效液相色谱分析确定纯化后的新疆红肉苹果多酚主要含有10种单酚类物质,其中绿原酸的含量最高(123.15 μg/mL),其次是槲皮苷和原花青素B₂(25.28、21.96 μg/mL)。体外抗氧化试验结果表明,不同浓度多酚对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子均具有明显的清除作用,清除率分别达到93.99%(0.1 mg/mL)、99%(0.8 mg/mL)、98%(0.4 mg/mL),并且对脂质过氧化具有明显的保护作用。该试验结果为进一步研究红肉苹果多酚的抗癌活性奠定了基础。     

高良姜残渣黄酮的分离纯化及其抗氧化活性

本研究以提取挥发油后的高良姜残渣为原料提取黄酮,采用7种大孔树脂进行静态吸附和解吸试验,筛选出最佳分离纯化树脂,再通过柱层析的动态吸附和洗脱试验,优化出分离纯化条件,并测定纯化前后的黄酮纯度和抗氧化活性。结果表明,XDA-6树脂最适合分离纯化高良姜黄酮,最佳纯化条件为上样流速2 BV/h,上样液浓度2 mg/mL,上样液体积31.6 BV,洗脱液为70%(v/v)乙醇,洗脱液流速2.5 mL/min,洗脱液用量3.1 BV,在此条件下,黄酮的纯度由43.55%±0.15%提高到85.42%±0.64%;纯化后的高良姜黄酮对DPPH与超氧阴离子自由基的清除率和还原能力均有所提升,清除DPPH和超氧阴离子的IC₅₀值分别由纯化前的0.014、0.222 mg/mL降低到纯化后的0.012、0.186 mg/mL。     

大孔树脂分离红花籽粕酶解产物制备抗氧化肽的工艺研究

为制备红花籽粕抗氧化活性肽,比较不同酶解工艺下产物的抗氧化性,研究AB-8大孔树脂分离工艺,对比分离前后多肽抗氧化性,结果表明:碱性蛋白酶Alcalase酶解产物抗氧化性最佳,测得还原力为1.755,DPPH自由基清除率39.84%,羟自由基清除率26.76%、超氧阴离子自由基清除率25.90%,多肽含量达到10.71 mg/mL;选择AB-8树脂分离,采用上样流速3 BV/h、上样量24 mL、80%乙醇洗脱、洗脱流速1.00 mL/min工艺分离,且AB-8分离后样品的DPPH自由基清除率、羟自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率均有增强。     

金银花提取物的抗氧化作用与其绿原酸含量的相关性研究

研究了金银花提取物、绿原酸的抗氧化作用。用K3[Fe(CN)6]测定了它们的还原力;采用脱氧核糖-铁体系、超氧阴离子自由基体系、二苯代苦味酰基自由基(DPPH.)体系进行抗氧化活性的研究,并同Vc进行了比较。结果表明:金银花提取物的抗氧化活性与绿原酸含量密切相关,具有较强的还原力,其中清除羟基自由基能力比Vc好,浓度1mg/mL时可以达到53.18%;清除超氧阴离子自由基的能力很好,略低于Vc,浓度0.2mg/mL时清除率大于90%;清除DPPH.的能力高于Vc,浓度0.2mg/mL时清除率大于90%。     

铜藻多酚的分离纯化及抗氧化活性研究

为研究铜藻多酚的分离纯化工艺及抗氧化活性。在超声辅助提取铜藻多酚的基础上采用大孔吸附树脂柱层析法分离纯化铜藻多酚提取物,以V_C为对照采用体外实验分析其抗氧化活性。结果显示:大孔吸附树脂LX-158具有最佳的吸附和解析条件,静态吸附和解析平衡时间为5 h,动态吸附和解析的最佳条件为:粗提液和洗脱剂流速为3 mL/min,上样体积为10 mL,洗脱剂为40%乙醇溶液,洗脱剂体积为120 mL。此条件下铜藻多酚纯度从7.52%提高到40.31%。体外抗氧化活性结果显示:不同浓度的铜藻多酚对DPPH自由基、ABTS自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基有明显的清除作用和Fe³⁺还原力,随着多酚浓度增大其抗氧化能力增强,IC₅₀值分别为6.60μg/mL、75.70μg/mL、2.22 mg/mL、5.62 mg/mL。实验证明该纯化工艺可行且稳定,可以作为铜藻多酚纯化的工艺条件。     

利用细胞模型和化学法评价核桃叶黄酮的抗氧化活性

从八种大孔树脂中筛选出了适宜纯化核桃叶黄酮的大孔树脂,并对纯化后核桃叶黄酮的细胞内抗氧化活性、对羟自由基清除力、对DPPH自由基清除力和对超氧阴离子自由基清除力进行了研究。结果表明,AB-8型大孔树脂的纯化效果最佳,核桃叶黄酮具有明显的抗氧化活性。核桃叶黄酮对羟自由基清除率高于VC,对超氧阴离子自由基抑制率和DPPH自由基清除率低于Vc,其IC50为22.4μg/mL。核桃叶黄酮在结肠癌细胞(HT-29)中表现出明显的抗氧化活性,其抗氧化性随浓度递增。     

秋葵黄酮的纯化和体外抗氧化活性研究

研究通过静态吸附试验比较NKA-9、AB-8、HPD-400、D101等4种大孔树脂对秋葵中黄酮类物质的吸附与解吸性能,并以VC为对照,对其还原力及羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_2~-·)、DPPH自由基(DPPH·)、ABTS~+自由基(ABTS~+·)清除能力进行探讨。结果表明,最适合分离纯化秋葵黄酮的树脂类型为AB-8型,通过动态吸附-洗脱试验得出AB-8树脂分离纯化秋葵黄酮的最佳工艺为上样浓度0.60 mg/m L,上样流速0.70 m L/min,洗脱剂为70%乙醇,洗脱流速0.40 m L/min,纯化后秋葵黄酮纯度由39.2%提高到67.3%。抗氧化结果显示秋葵黄酮对秋葵黄酮总还原力高于VC,对·OH、O_2~-·、DPPH·、ABTS~+·的IC_(50)值分别为0.56、0.42、0.62、0.52 mg/m L,其最大清除率分别为90.4%、80.4%、77.6%、88.4%,具有良好的体外抗氧化活性。     

响应面试验优化黑脉羊肚菌多酚纯化工艺及其抗氧化活性

以吸附率和解吸率为评价指标,研究9 种大孔吸附树脂对黑脉羊肚菌多酚吸附及解吸性能,采用响应面法建立NKA-Ⅱ树脂纯化黑脉羊肚菌多酚的二次多项回归模型,对多酚的纯化工艺进行优化,并比较纯化前后多酚的抗氧化活性。结果表明：最佳纯化树脂为NKA-Ⅱ。吸附的最佳工艺条件为上样液质量浓度295.86 μg/mL、上样流速1.90 mL/min、上样液pH 2.84,解吸的最佳工艺条件为乙醇体积分数78.56%、洗脱速率0.80 mL/min、洗脱剂pH 3.08;在此条件下吸附率可达98.69%,解吸率可达92.75%,纯化前后羊肚菌多酚纯度提高了2.94 倍。黑脉羊肚菌多酚纯化前1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除率、2,2’-联氮基-双-（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二氨盐自由基清除率和还原力EC50值分别为1.48、0.015、2.35 mg/mL,纯化后分别为0.52、0.004、0.69 mg/mL,纯化后抗氧化活性明显增强。     

核桃饼粕多酚纯化工艺及其抗氧化活性的研究

研究大孔树脂纯化核桃饼粕多酚的工艺,比较AB-8、HPD-100、D101、X-5、NKA-9五种大孔树脂对核桃饼粕多酚的分离纯化效果。结果表明,HPD-100为分离纯化核桃饼粕多酚的最佳大孔树脂,其最佳纯化工艺为上样液pH值为4.0,质量浓度4.0 mg/mL,流速2 BV/h,体积1.8 BV,以体积分数为75%乙醇洗脱,洗脱流速4 BV/h,洗脱体积3 BV。用该工艺纯化后,核桃饼粕多酚的纯度从26.63%提高到81.10%,回收率为87.33%。纯化后的核桃饼粕多酚对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、羟基自由基（·OH）、过氧化氢（H2O2）和超氧阴离子自由基（O-2·）清除作用均呈现量效关系,半数抑制浓度IC50分别为481.18 μg/mL、151.43 μg/mL、8.19 μg/mL和202.83 μg/mL,对DPPH和·OH清除能力较VC强,具有深入研究的价值。     

腰果梨渣多酚提取及抗氧化性研究

为提高腰果梨加工的附加价值,采用响应面分析法优化腰果梨渣多酚提取的工艺条件,并以DPPH 法和ABTS+ 法对其多酚提取物的抗氧化性进行研究。结果表明：以体积分数40% 乙醇溶液为提取剂,以经过烘干的黄色腰果梨渣为样品,液料比为35:1,在95℃水浴中回流提取150min,得到多酚提取得率最高为1.54%;腰果梨渣的抗氧化能力较强,其中红色腰果梨渣对DPPH 自由基的清除能力强于黄色腰果梨渣,其EC50 为1.35mg/mL,而黄色腰果梨渣对ABTS+ 的清除作用又强于红色腰果梨渣,其EC50 为0.057mg/mL。     

大孔树脂纯化沉香叶黄酮工艺优化及纯化前后抗氧化性比较

研究沉香叶黄酮的大孔树脂纯化工艺及其抗氧化性。通过静态和动态实验,考察树脂种类、粗提液浓度、洗脱剂、上样流速、洗脱流速对沉香叶黄酮吸附解吸性能的影响,确定最佳纯化工艺条件;采用羟自由基法、DPPH自由基和ABTS自由基法,比较纯化前后沉香叶黄酮的抗氧化性。结果表明,NKA-9大孔树脂纯化沉香叶黄酮效果最好,最佳条件为:以1.5 mL/min速度将5.0 mg/mL粗提液上柱,用70%(v/v)乙醇以2.0 mg/mL速度洗脱,此条件下沉香叶黄酮纯度提高至76.58%±3.46%。沉香叶黄酮纯化后清除羟自由基、DPPH自由基和ABTS自由基IC₅₀值分别为(0.120±0.008)、(0.016±0.009)、(0.042±0.002)mg/mL,远低于纯化前的(0.300±0.015)、(0.170±0.008)、(0.160±0.009)mg/mL,说明沉香叶黄酮纯化前后均具有较强的抗氧化性,纯化后抗氧化性明显增强。NKA-9大孔树脂适合分离纯化沉香叶黄酮。     

梨幼果多酚的纯化及其抗氧化性

采用5种大孔吸附树脂分离纯化梨幼果多酚,并测定其抗氧化性。结果表明,综合分析吸附与解吸效果,NKA-9大孔树脂性能较好,最适合用来纯化梨幼果多酚;NKA-9大孔树脂对梨幼果多酚进行纯化时,最适宜的条件为:将2 mg/m L的多酚提取液调至p H值为5.0,设定进样流速为1 m L/min,充分吸附,然后用70%的乙醇为洗脱液进行动态洗脱,洗脱流速为1 m L/min,用此方法纯化后的梨幼果多酚的纯度从6.23%提高到30.68%;梨幼果多酚粗品对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radicals,DPPH)自由基、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(2,2’-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate)radicals,ABTS~+·)、亚硝酸基的IC50值分别为:151.07、152.48、490.35μg/m L;梨幼果多酚纯品对DPPH自由基、ABTS~+·、亚硝酸基的IC_(50)值分别为:122.12、130.78、392.09μg/m L;纯化后的多酚样品抗氧化能力比粗品有所增强。     

芒果皮渣多酚的提取分离及抗氧化活性分析

以芒果皮渣为原料,通过单因素实验优选粗多酚的提取方法和工艺参数;采用不同极性有机溶剂萃取粗多酚,筛选多酚含量最高的组分,并通过HPD100型大孔树脂分离纯化;进一步,采用LC-Q-TOF-MS法对纯化组分初步定性并比较了不同溶剂萃取相和纯化组分的体外抗氧化活性。结果表明,超声辅助法对芒果皮渣多酚的提取效果较好,最佳提取条件为:乙醇浓度80%、浸提时间1.5 h、浸提温度60℃、超声功率250 W、液料比30:1 mL/g,在此条件下,多酚得率为9.68%;乙酸乙酯相所得多酚含量最高,达到254.41 mg/g;从树脂纯化组分中共鉴定出17种化合物,主要包括黄酮、黄酮醇、酚酸和鞣质等,具有优异的抗氧化活性,其清除DPPH自由基、ABTS+自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基的IC50值分别为0.191×10-3 mg/m L、0.081 mg/mL、0.43 mg/mL和0.63mg/m L。表明乙酸乙酯相中的纯化组分是深入挖掘芒果皮渣抗氧化功效的物质基础。     

响应面优化人参花黄酮提取工艺及抗氧化活性

为了得到微波辅助提取人参花黄酮的最佳工艺,在单因素的基础上,以黄酮提取量为响应值,通过响应面法对其工艺进行优化。并对经大孔树脂D101纯化后的人参花黄酮进行了体外抗氧化活性研究。结果表明最佳工艺条件为:微波功率800 W,微波时间30 s,乙醇质量分数54%,料液比1 g:21 g,此时黄酮提取量为5.624 mg/g,与模型预测值接近,表明模型适用。当人参花黄酮浓度为0.24 mg/mL时,对DPPH、羟基自由基、超氧阴离子3种自由基清除能力最好,自由基清除率分别为71.47%、49.91%和72.32%,IC₅₀分别为0.17、0.24、1.73 mg/mL,表明人参花黄酮具有较强的体外抗氧化活性,有很好的开发价值。     

响应面试验优化超声波辅助提取蓝靛果多酚工艺及其抗氧化活性

选用长白山的蓝靛果忍冬冻果作为原料,以蓝靛果多酚提取量为指标,在单因素试验的基础上,通过三因素三水平的响应面优化试验,得出了蓝靛果多酚最佳的提取工艺条件为：料液比1∶25（g/mL）、提取温度40 ℃、乙醇体积分数50%、超声功率500 W、提取时间90 min。在此条件下,蓝靛果多酚提取量达7.52 mg/g。此外,通过体外抗氧化能力评价方法得出：蓝靛果多酚具有较强的清除超氧阴离子自由基、2,2’-联氨-双-（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二胺盐自由基（2,2’-azino-bis(3-ehtylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt radical,ABTS＋•）、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基的能力。由相关性分析结果可知,蓝靛果多酚含量与超氧阴离子自由基、DPPH自由基清除能力之间呈极显著正相关（P＜0.01）,与ABTS＋•清除能力间呈显著正相关（P＜0.05）。     

红枣多酚提取工艺优化、成分及抗氧化活性分析

采用超声辅助提取工艺提取红枣中的多酚化合物,选取甲醇浓度、超声时间、超声温度、料液比进行单因素实验,在此基础上,利用响应面法优化工艺参数,使用高分辨液-质联用仪对红枣多酚成分进行测定,以清除DPPH和超氧阴离子自由基能力评价红枣多酚的抗氧化活性。结果表明,红枣多酚超声辅助提取最佳工艺参数为:甲醇浓度70%,超声时间40 min,超声温度60 ℃,料液比1:40（g/mL）,此条件下多酚得率为1.397%±0.08%。利用高分辨液-质联用仪测定红枣多酚中含有19种成分,分为酚酸及其衍生物、黄酮类化合物和三萜类化合物。抗氧化实验结果表明,当红枣多酚浓度为0.3 mg/mL时,其对DPPH自由基清除率最大为77.63%;当浓度为1.0 mg/mL时,红枣多酚对超氧阴离子自由基的清除率最大达82.48%,且随着多酚浓度的增大清除能力接近于V_C。综上,从红枣中提取的多酚化合物具有较强的抗氧化活性,是一种极具开发潜力的天然抗氧化剂。