5种灵芝孢子粉多糖含量的分析对比研究

采用超声波辅助热水法提取灵芝孢子粉多糖,结粜表明该方法精密度良好,超声处理时间为25min,处理温度为70℃.多糖含量采用传统的苯酚-硫酸法榆测.实验结果表明,3号灵芝孢子粉样品中多糖含量高,并且所含灵芝多糖稳定性好.     

灵芝孢子粉多糖的提取及其生物活性研究

目的:研究灵芝孢子粉多糖清除亚硝酸钠(NaNO2)和二苯代苦味酰自由基(DPPH·)的能力.方法:以提取孢子油后的孢子粉为原料.采用水提醇沉法提取多糖;以葡聚糖为标准,测定多糖含量.结果:脂肪对多糖的提取有影响,脱脂灵芝孢子粉和未脱脂灵芝孢子粉的多糖含量分别为25.53%和17.74%.在一定浓度范围内,随着多糖浓度的增加.对NaNO2和DPPH·的清除率提高.当多糖质量浓度从1.2 mg/mL增加到2.5 mg/mL时,对NaNO2的清除率从82.4%增加到88.3%;当多糖质量浓度从0.078 mg/mL增加到5 mg/mL时,对DPPH·的清除率从3.2%增加到19.9%.结论:孢子粉多糖具有清除NaNO2和DPPH·的能力.     

6个破壁灵芝孢子粉的理化性质

为更好地了解山东省破壁灵芝孢子粉的品质,收集6个灵芝孢子粉样品,对其理化性质进行分析。结果表明, 6个样品的灵芝破壁孢子粉含水率在2.013%～8.922%之间,粗脂肪含量在27.12%～34.05%之间;总糖含量在4.359%～5.769%之间,多糖含量在0.879%～1.182%之间,还原糖含量在0.196%～0.247%之间,段木栽培的破壁灵芝孢子粉多糖含量并不比代栽多糖含量高;破壁灵芝孢子粉的D[4, 3]在6.042～7.91μm之间, D50在5.723～6.284μm之间;经扫描电镜观察,发现代栽灵芝孢子粉粒径为(8.6～8.8)μm×5.6μm,而段木栽培的孢子粉粒径为8.8μm×6.6μm,碾压式孢子粉破壁率达100%。山东省破壁灵芝孢子粉多糖、重金属等含量符合中华供销总社灵芝孢子粉理化性质的行业标准。扫描电镜发现段木栽培比代栽孢子粉更饱满,但个别样品破壁率未达标。     

灵芝孢子粉多糖的PMP-HPLC指纹分析

采用部分酸水解耦合PMP柱前衍生反相高效液相色谱法对15个不同灵芝(赤芝)孢子粉样品中多糖进行检测和指纹表征,研究建立灵芝孢子粉多糖的HPLC指纹图谱。标定了19个共有特征指纹峰,同一产地不同批次产品间的相似度均大于0.97,不同产地产品间的相似度大于0.8;赤芝孢子粉与其他不同部位及不同品种的灵芝类产品的多糖指纹图谱显示出较大的差异。这些相似性和差异可作为灵芝孢子粉产品质量监控、与其他不同部位和不同品种的灵芝类产品的区别鉴定以及灵芝孢子粉的真伪与掺假检测的主要依据之一。     

灵芝不同部位多糖含量测定

采用苯酚-硫酸法对灵芝菌盖表皮层、木栓层、菌柄、孢子粉、发酵菌丝体等部位中的灵芝多糖进行了测定,结果发现,灵芝发酵菌丝体中的多糖含量明显高于灵芝的其它部位,其含量顺序分别为：发酵菌丝体〉菌盖表皮层〉孢子粉〉菌柄〉木栓层。     

破壁对灵芝孢子粉品质的影响

以灵芝孢子粉为原料,利用微波、超声对其进行破壁,以微波和超声的时间、功率、料液比为因素,灵芝孢子粉的多糖和三萜的含量为指标,得到最佳破壁工艺为料液比20∶1 (mL/g),微波功率280 W,微波时间90 s。以微波破壁所得到的灵芝孢子粉为原料,对比破壁前后的孢子粉粒度、松紧密度、比表面积、色度、休止角并用电镜观测形态;测定破壁前后孢子粉的总脂肪、总多糖、总三萜、灰分、蛋白质、多酚等营养成分含量,比较破壁前后孢子粉的品质。结果表明,破壁后灵芝孢子粉的感官状态与未破壁孢子粉差异明显:孢子粉的比表面积、松紧密度、色度均明显增加;粒度、流动性有所减小。经过破壁后的孢子粉中脂肪、多糖、三萜、灰分、蛋白质等营养物质的含量均不同程度地提高。实验证明,微波破壁处理有助于灵芝孢子粉中三萜、粗多糖、粗脂肪等功能性成分的溶出,大大增加了灵芝孢子粉有效成分的溶出。     

两种辐照方式对灵芝孢子粉灭菌效果及品质影响的比较

作者以破壁灵芝孢子粉为材料,研究了电子束和γ射线两种射线的不同辐照剂量对灵芝孢子粉微生物和品质的影响。结果表明:两种射线辐照对产品微生物和多糖质量分数变化基本一致。电子束和γ射线辐照灵芝孢子粉菌落总数的D_(10)值分别为2.167 k Gy和2.172 k Gy,霉菌与酵母菌的D_(10)值分别为2.646 k Gy和2.452 k Gy;当辐照低于8 k Gy时,电子束和γ射线辐照对灵芝孢子粉的多糖质量分数均无明显影响,而高于8 k Gy时,其多糖质量分数有显著变化。因此,低于8 k Gy的辐照剂量可视为破壁灵芝孢子粉安全辐照剂量。     

破壁与去壁灵芝孢子粉的化学成分与抗氧化活性比较

本研究以去壁灵芝孢子粉与破壁灵芝孢子粉为原料,探究不同孢子壁加工工艺对灵芝孢子粉化学成分及抗氧化活性的影响。实验对比了两种灵芝孢子粉的水分、灰分、膳食纤维、蛋白质、总三萜、总多糖、微量元素、氨基酸等主要指标及其体外抗氧化活性。结果表明,去壁灵芝孢子粉在灰分、水溶性膳食纤维、蛋白质、总多糖、总三萜和水解氨基酸的含量分别是2.227%、8.810%、15.922%、12.129%、2.556%、6.744%,均高于破壁灵芝孢子粉,其中总多糖含量较破壁提高了近12倍。三萜的色谱图显示,去壁孢子粉中含有更丰富的萜类物质。对比两种孢子粉醇提相与水提相的抗氧化活性,去壁灵芝孢子粉醇提相显示出最强的抗氧化活性,在2 mg/mL的浓度下,总还原力和DPPH自由基清除率分别为1.114和89.860%;在0.5 mg/mL的浓度下,其ABTS+自由基清除率为99.714%,与同浓度下V_C阳性对照组结果相当;在10 mg/mL浓度时,羟基自由基清除率达到84.301%。因此,去壁技术提高了灵芝孢子粉中关键物质含量,增强了其抗氧化能力。     

对破壁处理灵芝孢子粉功能特性的测定与分析

采用球磨法对灵芝孢子粉进行破壁处理,测定对比灵芝孢子粉破壁前后的水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分的溶出量,粗多糖和总三萜的生物活性物质溶出量,测定分析了水、醇提取物DPPH·、ABTS·清除能力和还原能力。结果表明:灵芝孢子粉破壁前后水分和灰分变化不显著,粗蛋白溶出量增加了33.96%,粗脂肪溶出量提高了2.94倍;灵芝孢子粉粗多糖和总三萜活性物质溶出量分别增加了40.90%和55.21%;破壁后灵芝孢子粉抗氧化能力显著提高。     

灵芝子实体和孢子粉纯化多糖体外抗氧化活性研究

为研究同源灵芝子实体和灵芝孢子粉纯化多糖的体外抗氧化活性,利用DEAE-650离子交换树脂,对提取获得灵芝子实体粗多糖(GLP)和灵芝孢子粉粗多糖(GLSP)进行分离纯化,GLP水洗脱得到GLP-1,0.2 mol/L NaCl洗脱得到GLP-2,GLSP水洗脱得到GLSP-1,0.2 mol/L NaCl洗脱得到GLSP-2。分别考察了4种纯化多糖的ABTS+自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力和还原能力,结果表明,不同灵芝纯化多糖的抗氧化能力不同,GLP-2的4种抗氧化活性均最高,四种抗氧化能力最高,分别为98.09%、75.88%、81.55%和0.728。     

破壁灵芝孢子的体外模拟消化特性研究

为探究破壁灵芝孢子在口腔和胃肠道中的消化吸收情况以及对肠道环境的影响。以机械碾压法、微波法和超声法破壁的灵芝孢子（Ganoderma lucidum spore,GLS）为研究对象,经体外模拟人体口腔、胃、小肠消化系统及透析模型,随后将消化后的底物进行体外发酵。测定消化各个阶段的灵芝孢子失质量率、多糖和三萜化合物释放量、生物可接受率和透析率以及小肠消化底物在0、6、12、24、48 h体外发酵过程中pH变化。结果显示,胃和小肠是灵芝孢子的主要消化场所,破壁组平均失质量率达到23.84%,其中机械碾压组更易被消化,其失质量率为29.46%。97%的多糖在胃肠液中溶出,机械碾压组多糖的生物可接受率具有最高水平,为87.33%。三萜只在破壁组小肠模拟消化中有微量溶出,平均约1.50±0.04 mg/g,95.2%的三萜随沉淀进入结肠。体外发酵结果显示,发酵液pH在0~12 h持续下降,并在12 h基本到达发酵终点。对比三种破壁灵芝孢子的消化特性,机械碾压法破壁的品质可观,不失为企业规模化破壁生产的优选。综上所述,破壁有利于提高灵芝孢子的有效成分在人体消化环境内释放量和生物可接受率,促进结肠发酵产酸,有助于调节人体肠道环境。     

灵芝多糖树脂法脱色工艺优化

利用大孔树脂对灵芝多糖进行脱色。比较10种大孔树脂在脱色方面的性能,以灵芝多糖的脱色率和多糖保留率为考察指标,结果发现D303树脂的脱色效果最佳,通过单因素试验和正交试验对D303树脂的灵芝多糖脱色各种工艺参数进行优化,得到D303树脂静态脱色的最佳参数为在样品上样质量浓度15mg/mL、pH6、脱色温度50℃、脱色时间7h条件下,灵芝多糖溶液的脱色率可达91.89%,多糖保留率75.28%;D303树脂动态脱色的最佳参数为上样流速3BV/h、每毫升树脂上样量150mg,此条件下灵芝多糖溶液的脱色率可达92.01%,多糖保留率71.85%。研究表明D303树脂适合应用于灵芝多糖的脱色工艺。     

灵芝多糖的研究进展

灵芝多糖是灵芝的主要活性成分,近年来以其独特的保健功能成为研究的热点。灵芝多糖结构如分子量、单糖组成和糖苷键类型等,对其活性影响很大,本文列举了灵芝多糖结构通用的检测方法。已有实验证实,灵芝多糖的生物保健功能主要体现在降血糖、降血脂、抗肿瘤、提高免疫力和抗氧化方面,由于固态栽培灵芝有诸多因素的制约,液体发酵培养成为获取灵芝多糖的主要手段,而液态发酵条件的优化研究主要集中于种子的培养、碳源氮源的选择及微量微量元素的添加。传统提取灵芝多糖的方法如热水浸提法、碱提取法,有提取时间长、提取效率不高的缺点,而利用超声波辅助提取多糖受到人们的关注,并和传统提取方法做了比较,显示了这种方法的广阔应用前景。     

灵芝生物转化蛋白核小球藻发酵粗多糖的抑瘤实验

在灵芝基础培养基中添加小球藻粉,灵芝能对小球藻细胞进行生物破壁,同时进行牛物转化：藻粉添加量以10g／L为最佳,产生的多糖最高达0．29mg／L。提取转化的多糖,并与灵芝多糖、小球藻提取多糖的混合物进行抗肿瘤实验：结果表明,产生的转化多糖抗肿瘤效果最好,仡最适剂量（0．2g／kg·d）时,抑瘤率为76．2％。     

不同破壁技术对灵芝孢子油提取的影响

通过比较酸热法、超声波冻融法和高能纳米冲击磨法对灵芝孢子粉破壁效果,找到适合工业化生产的孢子油提取的最佳破壁技术。结果显示:采用高能纳米冲击磨法可显著提高灵芝孢子的破壁率和孢子油得率,在球料比3∶1(质量比),球磨时间6 h的条件下,破壁率为90.36%,灵芝孢子油得率为30.79%。     

不同品种灵芝子实体及孢子粉元素成分分析及重金属安全性评价

针对我国鲁西地区主栽灵芝品种,利用电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）测定不同品种灵芝子实体、孢子粉及破壁孢子粉中元素及重金属含量,开展元素成分分析及重金属安全性评价。元素成分分析结果表明,藏芝和香血芝子实体中大部分元素含量明显高于赤芝、美芝和新大片子实体中元素含量,特别是Fe、Cu、Zn、Mn、Se、B、V、Co、Sr 9种人体必需微量元素,其中藏芝子实体中Fe元素含量达到234 mg/kg、Zn元素含量达到57.9 mg/kg、Se含量达到0.309 mg/kg,香血芝子实体样品Sr元素含量最高,达到3.60 mg/kg。赤芝粉和赤芝椴木粉元素营养质量高于美芝粉和新大片孢子粉元素营养质量,赤芝粉和赤芝椴木粉中硒含量分别是美芝粉中硒含量的3倍和2倍。重金属安全性分析结果表明5种灵芝子实体与4种孢子粉样品Pb、Hg 2种重金属含量远低于相关标准,安全性较高,藏芝及香血芝子实体、新大片孢子粉样品As元素含量较高,具有一定的安全性风险。破壁技术会造成孢子粉中As、Pb、Cd、Cr、Cu、Ni金属元素含量不同程度的提高,孢子粉破壁过程中重金属存在一定的安全风险。