酶水解对大豆异黄酮粗提物中苷元含量的影响

采用β-葡萄糖苷酶水解的方法将大豆异黄酮糖苷转化为苷元,以染料木素和大豆苷元含量为指标,通过单因素试验对水解过程中的不同影响因素进行了考察。以染料木素含量为指标,运用正交试验优化了β-葡萄糖苷酶水解大豆异黄酮的工艺条件为反应温度40℃、水解时间1.5h、水解介质pH4.5、水解底物浓度10mg/mL,在此条件下,水解得到的大豆异黄酮苷元中染料木素的含量可达到22.91%。     

"Amano"β-糖苷酶水解大豆异黄酮技术的研究

研究了"Amano"β-糖苷酶水解大豆异黄酮技术工艺.通过单因素试验对水解过程中的不同影响因素进行了考察.运用正交试验优化了"Amano"β-糖苷酶水解大豆异黄酮的反应条件.该酶水解黄豆苷的最佳条件为:水解时间140min,加酶液浓度33μg/ml,pH4.5,温度50℃;水解染料木苷的最佳条件为:水解时间140min,加酶液浓度33μg/ml,pH4.5,温度60℃.验证实验证实用最佳反应条件水解大豆异黄酮可使黄豆苷的水解率达到 98.2%,染料木苷的水解率达到94.2%.     

里氏木霉β-葡萄糖苷酶水解大豆异黄酮糖苷的工艺研究

研究了里氏木霉β-葡萄糖苷酶的酶学性质,及其水解大豆异黄酮糖苷能力.该酶反应的最适温度为50℃,最佳pH为5.0;此酶在pH 4.5～5.5之间和低于60℃下酶较稳定,在80℃基本无活力.采用里氏木霉β-葡萄糖苷酶水解的方法,将大豆异黄酮糖苷转化为苷元,以染料木苷水解率为检测指标.通过正交试验确定了该酶水解大豆异黄酮的工艺条件为反应温度50℃、水解时间90 min、水解介质pH4.5、加酶量20U,大豆异黄酮中染料木苷的水解率为99%.     

丹贝异黄酮生物活性增强的机理研究

以少孢根霉RT-3孢子接种在含高浓度的大豆异黄酮提取物制成的发酵基质中，发酵36h后大豆异黄酮被部分水解成相应的苷元．用从丹贝中分离的β-葡萄糖苷酶与标准品染料木素糖苷和大豆苷元的糖苷作用10min，染料木素糖苷和大豆苷元的糖苷被水解成相应的苷元．结果表明：丹贝异黄酮生物活性增强是发酵剂RT-3孢子分泌的β-葡萄糖苷酶将异黄酮由糖苷水解成苷元，而苷元比糖苷有更强的活性．     

豆粕中大豆异黄酮含量快速测定方法的研究

探究豆粕中大豆异黄酮测定的最优方法。使用高效液相色谱法测定豆粕中大豆苷、大豆苷元、染料木素3种大豆异黄酮的含量并优化其检测条件。结果表明,大豆苷、大豆苷元、染料木素含量分别为194.92、14.20、15.42μg/g;RSD都小于0.30%;大豆苷、大豆苷元、染料木素的平均回收率分别为99.55%、99.65%、99.11%,检测时,流动相为甲醇∶水∶醋酸(40∶60∶1,体积比);柱温为40℃;流速为1.0 m L/min。     

高效液相色谱法快速测定大豆异黄酮制品中有效成分的研究

采用高效液相色谱法测定大豆异黄酮制品中染料木苷、黄豆苷、染料木黄酮和黄豆苷元含量.固定相为Agilent-1100 C18柱(3.9 x 150mm);以甲醇:水=35%～45%为流动相,进行梯度洗脱,流速为1.0～2.0mL/min;柱温为室温;检测波长为260nm.实验结果表明,市售30%大豆异黄酮制品中,含大豆异黄酮糖苷近28%,其中染料木苷为4%、黄豆苷为8%,苷元形式异黄酮未检出;采用酶水解法制备的大豆异黄酮水解物中含染料木黄酮14.3%、黄豆苷元9.8%,其大豆异黄酮苷元占大豆异黄酮总含量的96%.     

纤维素酶水解大豆异黄酮糖苷混合物的抗氧化活性

大豆异黄酮主要以糖苷类型的分子形式存在于大豆中,但是其具有生物活性的部分主要是苷元.为了建立一种体外生物转化大豆异黄酮糖苷为大豆异黄酮苷元的新方法,采用纤维素酶水解70%乙醇提取脱脂大豆粕得到的异黄酮粗提物,对比了水解前后两样品的异黄酮组成差异,并测定了其清除DPPH自由基的能力.结果表明:纤维素酶能完全水解大豆苷和染料木苷为大豆素和染料木素;而不能水解丙二酰基染料木苷和丙二酰基大豆苷.纤维素酶处理以后的大豆异黄酮糖苷混合物达到DPPH自由基50%清除率所需要的异黄酮浓度是未处理的大豆异黄酮糖苷混合物的1/2.56.     

苦杏仁β-葡萄糖苷酶水解豆浆中大豆异黄酮的工艺研究

大豆异黄酮的生理活性主要靠异黄酮苷元来发挥,该试验研究在豆浆中添加苦杏仁β-葡萄糖苷酶对大豆异黄酮苷元的影响。采取高效液相色谱检测的方法,通过响应面优化试验,得到最佳组合为:加酶量为1.4 U/5mL,酶解时间40 min,酶解温度46.0℃。测得染料木素(Ge)、黄豆黄素(Gle)、大豆苷元(De)的含量分别为(38.643±2.03)、(5.119±0.275)、(36.954±1.67)μg/mL。     

乳酸菌β-葡萄糖苷酶水解大豆异黄酮的研究

利用乳酸菌液态发酵得到一种高活性的大豆异黄酮水解酶--乳酸菌β-葡萄糖苷酶,通过单因素试验及正交试验优化了乳酸菌β-葡萄糖苷酶水解大豆异黄酮的条件.正交试验结果显示,当加酶量为25 μg/mL,水解温度50℃,水解时间2.0 h,pH 6.0时,黄豆苷水解率可达96.51%;在加酶量为25 μg/mL,水解温度40℃,水解时间2.0 h,pH 5.5时,染料木苷水解率为92.36%.     

交联β-葡萄糖苷酶聚集体的制备及其性质

交联酶聚集体法是一种新型的无载体酶固定化方法。本实验用该法固定化黑曲霉β-葡萄糖苷酶,对其制备条件、结构特征、酶学性质进行了研究。结果表明,β-葡萄糖苷酶酶液在冰水浴中经90%的硫酸铵沉淀30min后,以5%戊二醛水溶液进行酶聚集体交联反应,可获得较高活性的交联酶聚集体,酶活回收率达75%,对对-硝基苯基-β-D-葡萄糖苷作用的最适温度、最适pH值和Km值分别为60℃、pH4.0和4.61×10-3mol/L,与游离酶相比,表现更高的底物亲和力。将其用于大豆异黄酮活性苷元染料木素的合成,40min内对染料木苷转化率达到66%。