高效液相色谱快速分析亚麻籽环肽条件研究

采用高效液相色谱法分析亚麻籽环肽组成及相对含量。以14种亚麻籽环肽色谱峰平均分离度和分析效率作为指标,对不同色谱柱、进样量、梯度洗脱初始体积分数、流速、乙腈体积分数上升速率进行优化,并利用HPLC-ESI-MS进行定性分析。结果表明,高效液相色谱最优条件为:采用Kinetex■色谱柱,水、乙腈为流动相,进样量5μL,梯度洗脱程序为乙腈体积分数从40%以5%/min升至90%,流速1 m L/min。最优条件下亚麻籽环肽14个色谱峰分离度较好,平均分离度为1. 65,分析时间为9. 09 min,分离效率为10. 86。优化后的色谱条件可对市售亚麻籽、亚麻籽油以及亚麻籽粕中环肽组成进行有效分析。     

反相高效液相色谱法测定雪莲果叶中的绿原酸

采用反相高效液相色谱法对雪莲果叶中的有效成分绿原酸进行分离,并对其含量进行测定,建立反相高效液相色谱法测定雪莲果叶中绿原酸含量的方法。色谱柱为Hypersil ODS-2 C18 柱(4.6mm × 300mm,5μm),流动相为乙腈- 体积分数0.5% 磷酸溶液(8:92,V/V),流速为1.0mL/min,检测波长为325nm,柱温为25℃。绿原酸在10～100μg/mL 范围内呈良好线性关系,相关系数为0.9999,加标回收率为97.0%,RSD 为1.10%。本法快速、简单、准确、分离度好,可用于实际样品的检测。     

RP-HPLC法分离和定量测定未变性的乳清蛋白成分

建立了一种基于反相高效液相色谱(RP-HPLC)来分离并定量测定脱脂乳、加热脱脂乳及脱脂乳粉中未变性的乳清蛋白的分析方法。采用Venusil ASB-C8色谱柱;流速0.8 mL/min;检测波长215 nm;柱温30℃;流动相A为体积分数0.1%的三氟乙酸水溶液;流动相B为体积分数0.1%的三氟乙酸乙腈溶液;洗脱方式:流动相B开始在38%下等度洗脱2 min,然后在5 min内上升到43%,最后在43%下等度洗脱13 min。此方法在20 min内将4种乳清蛋白组分分离且各蛋白线性关系良好,适合定性和定量检测未变性的乳清蛋白组分。     

反相高效液相色谱法检测酵母胞内V_B_1含量

采用反相高效液相色谱法测定了酵母胞内VB1的含量。采用ODS2HYPERSIL色谱柱(5μm,250×4.6mm),优化后的色谱条件为:流动相V(甲醇)∶V(水)=3∶7,流速1.2mL/min,波长238nm,柱温35℃。在此条件下回收率为88%～92%。此方法步骤简单,重现性好。     

反相高效液相色谱法测定发酵液中的风味强化肽

采用反相高效液相色谱法对发酵液中的风味强化肽进行定量分析。色谱条件 :色谱柱为日本shimadzu公司的ShimadzuVP ODSC18(5 μm ,1 5 0mm× 4 6mmi d )不锈钢柱 ,流动相为乙腈 水 (含体积分数为 0 1 %的三氟乙酸 )溶液 ,采用线性梯度洗脱方式 ,流动相B(含 0 1 %三氟乙酸的乙腈溶液 )体积分数在 3 0min内由 5 %线性升至 5 0 % ,流速为 1 0mL/min ,检测波长为 2 3 0nm ,室温测定。结果 :RP HPLC法测定浓度在 0 1 2 5～ 2 0 0 0mg/mL时线性关系良好 ,r =0 9998。回收率为 86 2 %～ 1 0 3 4% ,最低检测限量为 1 2 5ng ,该方法精密度高 ,相对标准偏差 (RSD)为1 4%。此方法准确、灵敏、重现性好 ,适合于发酵液这种复杂体系中风味强化肽的定量分析     

高效液相色谱法测定青稞红曲中内酯式和酸式洛伐他汀的含量

采用高效液相色谱法测定青稞红曲中内酯和酸式洛伐他汀的含量,以体积分数75%的乙醇作为提取剂,在室温条件下超声提取青稞红曲中的洛伐他汀1 h。使用Eclipse Plus C18柱（5 μm,250 mm×4.6 mm）,调整柱温30 ℃,流动相为甲醇∶0.1%磷酸=73∶27;流速1.0 mL/min;进样量20 μL;紫外检测器波长238 nm。内酯式洛伐他汀标准品溶液在20～100 μg/mL时呈良好的线性（r2=0.999 7）,内酯式洛伐他汀的平均回收率为99.30%,相对标准偏差为1.67%;酸式洛伐他汀标准品溶液在20～100 μg/mL时呈良好的线性（r2=0.999 9）,酸式洛伐他汀的平均回收率为98.50%,相对标准偏差为1.65%。因此高效液相色谱法能够简便、快捷、准确测定青稞红曲中内酯式和酸式洛伐他汀的含量。     

测定植物油中甲萘威和克百威农药残留的高效液相色谱法

采用高效液相色谱法测定植物油中甲萘威和克百威农药残留。样品通过乙腈提取,固相萃取(SPE)净化,采用Waters carbmate analysis(3.9mm×150mm,4μm)柱,水∶乙腈(体积比68∶32)为流动相,柱温30℃,流速1.0mL/min进行分离,2487紫外检测器进行检测,波长280nm,进样20μL。回收率为89.7%～98.9%;RSD为3.9%～4.8%;检测限为0.01μg/mL。     

基质固相分散——高效液相色谱法测定番茄酱中氨基甲酸酯类农药

采用反相高效液相色谱法同时测定番茄酱中速灭威、西维因、抗蚜威、1-萘酚的农药残留.Diamonsil C18柱,乙腈:甲醇:水(体积比为45:15:40)为流动相,检测波长222 nm.在0.02～20 mg/L范围内4组分线性关系良好.方法检出限在0.02～0.03 mg/kg之间.回收率范围为:97.6%～105.3%.相对标准偏差小于2.8%.     

固相萃取-反相高效液相色谱测定食品中大豆异黄酮含量的方法研究

该研究建立了一种固相萃取-反相高效液相色谱同时测定大豆和大豆制品中黄豆黄素、黄豆黄苷、大豆苷、大豆苷元、染料木 素、染料木苷、鸢尾黄酮苷和鹰嘴豆芽素A共8种异黄酮含量的方法。 采用体积分数为90%甲醇水溶液提取异黄酮,提取液用C18固相 萃取柱净化,采用C18色谱柱分离,柱温40 ℃,以乙腈和磷酸水溶液为流动相,流速1.0 mL/min,紫外检测器254 nm进行检测,其重复测 定结果的相对标准偏差（RSD）均＜5%,加标回收率为79.3%～102.5%。所建立的反相高效液相色谱法是一种高灵敏度、高准确度的 测定方法,适用范围广,对食品中大豆异黄酮的质量控制和合理有效利用提供了参考依据,具有一定的理论意义和应用价值。     

化橘红HPLC指纹图谱的建立

为建立广东化州市特有药材化橘红的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,采用色谱条件为：Nucleosil C18 反相柱(150mm × 4.6mm,3μm),DAD 检测器,流动相为水- 体积分数50% 甲醇溶液+ 体积分数15%～50%乙腈溶液,三元梯度洗脱,流速为0.3～1mL/min,柱温35℃,分离波长315nm。结果表明：11 批次的化橘红提取物色谱图共有峰9 个;经“中药指纹图谱鉴别分析系统”统计分析,共有峰相对保留时间的相对标准偏差在0.3% 以下,相似度均在0.965 以上。本法符合指纹图谱的要求,可建立共有模式,作为科学评价化橘红产品质量的检测方法。     

高效液相色谱法测定黑茶中咖啡因含量

目的：采用高效液相色谱法测定黑茶中咖啡因的含量。方法：色谱柱：Kromasil C18;流动相：水-甲醇-乙酸-二甲基酰胺(70:30:0.05:0.25,V/V);色谱柱温：25℃;进样量：5μl;检测器：紫外检测器;扫描波长：210～400nm;检测波长：274nm。回归方程为Y=6×10-8X＋0.0044,r=0.9997。结果：方法变异系数小于3.96%,回收率为90.62%～103.8%。本方法简便、准确,适合黑茶中咖啡因含量的分析。     

大孔树脂HPD400分离茶皂素的研究

研究了大孔树脂HPD400分离茶皂素的方法。以硅胶柱色谱方法制备得到了茶皂素对照样品,在此基础上建立了比色法测定茶皂素含量的方法。以静态吸附与洗脱方法初步筛选HPD系列大孔树脂,进一步以动态吸附与乙醇梯度洗脱的方法研究了HPD400树脂分离纯化茶皂素的条件。实验结果表明:HPD400大孔树脂的动态饱和吸附容量为109.3 mg/g树脂,30%乙醇洗脱物茶皂素的含量为93.1%,50%乙醇洗脱物茶皂素的含量为87.1%;乙醇的总洗脱率达到80.3%。茶皂素主要由30%的乙醇洗脱,所得样品中茶皂素含量高,HPD400大孔树脂适合茶皂素的分离纯化。     

茶叶中茶多酚和生物碱的测定及聚类和线性判别分析

目的：建立一种反相高效液相色谱方法,测定绿茶、乌龙茶、红茶、白茶和普洱茶中儿茶素[(+)-catechin,C]、表儿茶素[(-)-epicatechin,EC]、表儿茶素没食子酸脂[(-)-epicatechin gallate,ECG]、表没食子儿茶素[(-)-epigallocatechin,EGC]、表没食子儿茶素没食子酸脂[(-)-epigallocatechin gallate,EGCG]、没食子酸(gallic acid,GA)、咖啡因(caffeine,CAF)、可可碱(theobromine,THEO)的水平。以这8 种组分为指标对茶叶进行聚类分析和线性判别分析,建立区分绿茶、红茶和乌龙茶的方法。方法：茶叶提取后采用HPLC 法测定儿茶素和生物碱含量,色谱柱为C18 柱,流动相由甲醇(A)、2% 的乙酸(B)等度洗脱,A、B 相的体积比为25:75,流速为1mL/min,柱温30℃。采用PDA 检测器在278nm 检测,参考波长为210nm。采用SPSS 14.0 对实验数据进行了聚类分析和线性判别分析。结果：在选择的分析条件下,样品中的8 种组分获得了理想分离, 加标回收率在8 7%～ 112.8%之间,并采用外标法对8 种组分进行定量。以这8 种组分的含量为指标,聚类分析和线性判别分析能对39 种茶叶样品进较好的区分。     

膜分离与大孔树脂联用技术纯化茶皂素

采用膜分离与大孔树脂联用技术纯化茶皂素。粗茶皂素经陶瓷膜和360Da纳滤膜初步分离浓缩,得率为62.1%,纯度为79%;根据静态和动态吸附筛选试验,选择大孔树脂AmberliteXAD7HP对茶皂素进一步纯化,通过单因素试验,确定最佳工艺参数为:上样流速0.5 mL/min、上样液浓度30mg/mL;以10%,40%,70%的乙醇溶液进行梯度洗脱,洗脱剂流速1mL/min,洗脱液体积为3BV,该条件下纯化,茶皂素最终得率为55.3%,纯度可达95%。该试验表明膜分离与大孔树脂联用技术可得到高纯度的茶皂素,是一种可工业化推广的方法。     

超高效液相串联质谱检测茶叶及茶饮料中咖啡因含量

建立超高效液相串联质谱检测茶叶及茶饮料中咖啡因含量的方法。茶叶及茶饮料经前处理后进样,以0.1%甲酸水溶液-乙腈(80:20,v/v)为流动相等度洗脱,流速为0.3 mL/min,经C₁₈色谱柱分离,柱温25 ℃;质谱采用电喷雾离子源正离子模式、多反应检测模式检测,脱溶剂气(N₂)温度500 ℃、流速700 L/Hr,毛细管电压3.5 kV,锥孔电压55 V,碰撞气为高纯氩气。在上述分析条件下,本法咖啡因的检出限为2.0 μg/L;在2.0~1000 μg/L浓度范围内的线性关系良好,相关系数r为0.9969;加标回收率达90.2%~103.9%;相对标准偏差在1.00%~3.00%(n=6)。本方法简便、快速,选择性、重现性好、灵敏度高,适用于茶叶及茶饮料中咖啡因的定量分析,结果准确可靠,对于复杂样品中咖啡因的检测有明显优势。     

儿茶素单体分离制备方法

茶叶中含有丰富的儿茶素类物质,占茶叶干重12%～24%,是茶叶中最具生理活性和保健功效的物质。文中对目前国内外纯化制备儿茶素的常见方法进行了综述。常见的儿茶素制备方法包括纤维素柱层析、葡聚糖凝胶(Sephadex LH—20)、硅胶柱层析、吸附树脂柱层析和高速逆流色谱等方法。通过这些方法制备的儿茶素单体纯度不高,仍需结合结晶、制备型液相色谱技术或膜分离技术进行进一步纯化,从而才能获得高纯度的儿茶素单体。在儿茶素单体的制备方法中,每种方法都有相应的优缺点。Sephadex LH—20柱层析分离的量较大,但是分离时间较长,而且Sephadex LH—20柱填料昂贵;高速逆流色谱分离效果较好,得到的儿茶素单体的纯度较高,分离时间相对要短,但是目前市场上只有分析型,分离的量相对少;硅胶材料廉价,但是分离的效果不佳,且分离过程相对繁琐,单体制备量较小;吸附树脂柱层析分离已实现EGCG单体的工业化生产,但在其他儿茶素单体的分离制备上尚不成熟。     

大孔吸附树脂分离纯化茶叶籽饼粕中的茶皂素研究

目的对采用大孔吸附树脂法分离纯化茶叶籽饼粕中茶皂素的工艺进行优化,为进一步开发利用茶叶籽资源提供依据。方法以茶皂素吸附率与解吸率为指标,通过静态吸附与解吸实验筛选最优树脂。通过单因素实验、正交实验及验证性实验,优化最优树脂动态吸附与解吸茶皂素的工艺参数。结果D101树脂的静态吸附量与解吸率分别为142.974 mg/g和98.02%,为分离纯化料液中茶皂素的最优树脂;当主要考虑茶皂素得率时,其最优动态吸附与解吸工艺参数为上样质量浓度10 mg/m L、上样流速3 BV/h、上样体积6 BV、乙醇洗脱体积浓度80%、洗脱流速3 BV/h、洗脱剂体积5 BV,在该工艺参数条件下,茶皂素得率为74.25%,纯度为84.30%;当主要考虑茶皂素纯度时,最优动态吸附与解吸工艺参数为上样质量浓度10 mg/m L、上样流速4 BV/h、上样体积7 BV、乙醇洗脱体积浓度70%、洗脱流速3 BV/h、洗脱体积5 BV,在该工艺参数条件下,茶皂素纯度为97.7%,得率为72.04%。结论 D101大孔吸附树脂是一种可应用于茶叶籽饼粕中茶皂素分离纯化的较好树脂。     

杜仲雄花茶加工过程中总黄酮含量变化分析

采用高效液相色谱法测定杜仲雄花茶在加工过程中总黄酮的含量变化。样品用硫酸水解,以槲皮素为对照品外标法定量。色谱条件Kromasil-C18 色谱柱(4.6mm × 250mm,5.0μm);流动相甲醇-0.4% 磷酸(60:40);检测波长360nm;流速1.0ml/min;柱温25℃。槲皮素对照品在0.05～0.55g/L 范围内有良好线性关系。平均回收率为98.82%,RSD 为0.96%。该方法准确、简捷,可用于杜仲雄花茶加工过程中总黄酮的含量测定。杜仲雄花杀青后总黄酮含量明显降低,经过初炒、精炒后总黄酮含量又逐渐升高,精炒后总黄酮含量比鲜花提高了25.88%。     

高效液相色谱法同时测定工夫红茶中10种内含物成分

建立高效液相色谱法同时测定工夫红茶中咖啡碱、儿茶素、表儿茶素、表没食子儿茶素、表儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素没食子酸酯、茶黄素、茶黄素-3-没食子酸酯、茶黄素-3’-没食子酸酯、茶黄素双没食子酸酯10 种内含物成分含量的方法。通过色谱条件优化,确定出工夫红茶中10 种内含物成分含量测定的最佳色谱条件为：色谱柱为Whatman Partisphere C18液相色谱柱（4.6 mm×125 mm,5 μm）、柱温32 ℃、流动相为0.035%三氟乙酸-5%乙腈溶液和0.025%三氟乙酸-50%乙腈溶液、流速1 mL/min、进样量10 μL、检测波长205 nm。在此条件下,上述10 种内含物成分得到很好的分离和测定。各种内含物的线性范围为0.05～500 μg/mL,标准曲线相关系数均在0.999 8以上,精密度检测相对标准偏差为0.72%～3.32%（n=5）,重复性检测相对标准偏差为1.87%～4.43%（n=5）,回收率在94.73%～102.38%之间。该方法简单、快捷、准确、重复性好,可应用于工夫红茶中10 种内含物质的同时快速测定。     

高效液相色谱检测银杏茶中总黄酮含量

采用正交试验法优选银杏茶中黄酮类化合物的最佳提取条件为25%HCl添加量4 mL,提取温度100℃,提取时间90 min。分析方法采用Eclipse XDB C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液(体积比60∶40),流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长为360 nm。槲皮素、山柰酚、异鼠李素在浓度20μg/mL～100μg/mL范围内线性良好,检出限分别为5.0、8.6、6.7 mg/kg。相对标准偏差(RSD)小于5%(n=6)。本法准确、快速、重现性好,可用于银杏茶的质量控制。