乌龙茶多糖分离提纯及其组分分析

目的分离提纯乌龙茶多糖,进行组分分析,同时评价多糖清除DPPH自由基能力。方法采用纤维素离子交换层析法从水提乌龙茶粗多糖中分离得到一种多糖组分(WTPS-1),采用苯酚硫酸法测定该乌龙茶多糖的中性糖含量;采用红外光谱测定该多糖的结构组成;采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析该多糖的单糖组成;采用清除DPPH自由基能力评价多糖的抗氧化活性。结果乌龙茶多糖WTPS-1含β-糖苷键型吡喃糖,其中性糖含量为71.9%,单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,比例为2.57:3.67:0.57:1:2.16:9.65。乌龙茶粗多糖、脱蛋白多糖和WTPS-1的DPPH自由基清除率分别为91.6%、60.7%和9.20%。结论乌龙茶粗多糖的抗氧化能力强于脱蛋白多糖和WTPS-1,为乌龙茶的进一步开发利用提供参考依据。     

牛大力多糖的分离纯化及抗氧化活性研究

建立了热水提取、乙醇沉淀、三氟乙酸除蛋白、Sephadex G-75凝胶过滤层析法,从牛大力分离纯化得到一种水溶性多糖,命名为MSP-1。通过红外光谱和离子色谱对其结构和单糖组成进行初步分析,结果表明MSP-1主要由鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖和果糖组成。同时对牛大力水提物、醇沉物和粗多糖进行体外抗氧化活性研究,结果表明,三者的抗脂质过氧化作用和对·OH自由基和DPPH·自由基清除能力:VC牛大力水提物牛大力醇沉物牛大力粗多糖,并呈量效关系。     

黄精多糖肽的单糖组成和抗氧化活性

利用水提醇沉法提取黄精多糖肽,三氯乙酸法、透析法和阴离子交换柱层析法分离纯化黄精多糖肽;GC-MS分析了黄精多糖肽的单糖组成;Fenton法、邻苯三酚自氧化法和磷钼络合物法分别研究了黄精多糖肽对羟基自由基、超氧阴离子清除和总抗氧化能力。结果表明:黄精中多糖肽的含量为0.34%,多糖肽中多糖和蛋白质的比率为5.4∶1;黄精多糖肽的单糖组成主要是鼠李糖、阿拉伯糖、D-木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖等,其相对百分含量分别为:2.12%、1.81%、2.51%、65.4%、14.3%、13.8%。黄精多糖肽在一定范围内随着浓度的增高对羟基自由基的清除率、对超氧阴离子的清除率逐渐增高,总抗氧化活性也随黄精多糖肽浓度的增高而增高;其对羟基自由基和超氧阴离子的清除率高于Vc,但总抗氧化活性远低于VC的总抗氧化活性。     

红曲霉菌胞外多糖的分离纯化、结构鉴定及抗氧化活性测定

目的:分离纯化红曲霉菌胞外多糖(Exopolysaccharide,EPS),测定各组分的抗氧化活性并对其结构进行初步表征。方法:红曲霉菌发酵液经乙醇沉淀获得胞外多糖,经精制除杂和DEAE-纤维素柱层析法分离纯化获得多糖组分,再分别用高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)、柱前衍生PMP-HPLC法测定相对分子质量(Mw)和单糖组成,测定多糖组分清除DPPH和羟自由基的能力,评价其体外抗氧化活性。结果:EPS经分离得到三个组分EPS-1、EPS-2和EPS-3,相对分子质量分别为8673、143537、238742 Da。EPS-1、EPS-2均由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖组成,摩尔比为1∶0.301∶2.052∶3.614和1∶2.475∶1.950∶1.532,EPS-3由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖组成,摩尔比为1∶0.401∶0.066∶0.307∶2.974。三个多糖组分对DPPH·和羟自由基均有清除能力,并与多糖浓度呈现正相关。当多糖浓度为1 mg/m L时,三个组分对DPPH清除率分别为16.4%、15.9%和14.8%;对清除羟自由基的清除率分别为40.4%、39.6%、63.8%。结论:红曲霉菌胞外多糖各组分的相对分子质量和单糖组成比例均有差异;对羟自由基、DPPH·的清除作用也存在差异,这种活性差异可能与各组分Mw及结构差异相关。     

山茱萸籽多糖分离纯化、结构表征及抗氧化活性

为了对山茱萸籽多糖进行分离纯化、结构表征及抗氧化活性研究，本实验通过亚临界水萃取、体积分数30% H2O2脱色、Sevag法脱蛋白得到山茱萸籽多糖，并用DEAE-52纤维素层析法对其进行分离纯化得到了5 个多糖组分，即COSP-1、COSP-2、COSP-3、COSP-4和COSP-5，并采用Sephadex G-100凝胶色谱法对主要多糖组分COSP-4进一步纯化。凝胶色谱和单糖组成表明，COSP-4是分子质量约为2.03×104 Da的酸性均相多糖组分，由鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和木糖组成，物质的量之比为0.96∶0.18∶5.48∶0.28∶1∶10.70。甲基化反应和核磁共振表明COSP-4包含14 种甲基化糖，残基同时包含了α构型糖基和β构型糖基，含量最高的单糖结构为1,4,5-三乙酰基-2,3-二甲基木糖。扫描电子显微镜观察表明COSP-4呈不规则碎片结构，松散多孔，类似海绵结构。抗氧化活性实验表明，COSP-4对DPPH自由基、羟自由基和ABTS阳离子自由基具有较强的清除能力。COSP-4对DPPH自由基、羟自由基和ABTS阳离子自由基的半抑制质量浓度分别为（1.72±0.14）、（1.48±0.17）mg/mL和（2.87±0.27）mg/mL。综上，本实验为进一步研究山茱萸籽多糖的构效关系及促进其应用提供参考。     

平贝母多糖对D-半乳糖诱导衰老模型小鼠的抗氧化作用

为了探讨平贝母多糖对D-半乳糖诱导衰老模型小鼠的体内抗氧化作用,采用颈背皮下注射D-半乳糖(500mg/(kg ·d))建立亚急性衰老小鼠模型,通过对各组小鼠一般体征、脏器指数、血清或肝组织抗氧化酶活性及脑组织单胺氧化酶(MAO)活力的比较分析,全面评价平贝母多糖FUP-1的抗氧化衰老作用。结果表明：与模型组相比平贝母多糖FUP-1能显著降低D-半乳糖诱导衰老小鼠肝脏组织中丙二醛(MDA)含量(P＜0.05),提高肝组织中总抗氧化能力(T-AOC)、显著提高肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和血清超氧化物歧化酶(SOD)活性(P＜0.05),同时降低脑组织中MAO活力。提示平贝母多糖FUP-1具有一定的延缓衰老作用,其作用可能与其提高抗氧化酶活性和抗脂质过氧化有关。     

紫苏叶多糖分离纯化及体外抗氧化活性

通过水提醇沉法得到紫苏叶粗多糖（Perilla frutescens leaf polysaccharides,PFP）,并用DEAE-52纤维素层析法对其进行分离纯化,获得4个多糖组分PFP-1、PFP-2、PFP-3和PFP-4。PFP-1为中性低聚糖,但总糖含量较低;PFP-2重均分子量为4.7 kDa,峰位分子量为2.2 kDa,主要组成单糖为半乳糖醛酸;PFP-3主要由两种分子量段的多糖组成,主要峰位分子量为5.2 kDa和40.0 kDa,为杂多糖,所含单糖种类较多,主要含半乳糖醛酸和半乳糖;PFP-4分子量较小,主要组成单糖为半乳糖和阿拉伯糖。体外抗氧化活性试验表明,PFP的DPPH自由基清除能力、ABTS+自由基清除活性和Fe3+还原能力较强,具有良好的抗氧化活性,其中组分PFP-3和PFP-4抗氧化活性与PFP接近,是其发挥抗氧化作用的关键组分。     

荞麦皮多糖组成及其抗氧化特性分析

筛选提取荞麦皮多糖的温度和乙醇体积分数,对多糖进行红外光谱分析、光学显微镜观察其形貌、紫外光谱分析、HPLC分析其单糖组成,并测定多糖对铁氰化钾的还原能力、羟基自由基和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除能力。结果表明:80℃水提取的粗多糖质量百分数显著高于其他温度(P <0. 05),且温度对多糖官能团无明显改变;乙醇体积分数为95%时,粗多糖沉淀量显著高于其他各组(P <0. 05);多糖分子是絮状、链状结构,在192 nm处有强烈紫外吸收;荞麦皮多糖主要由甘露糖、核糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成,其相对质量百分数分别为6. 47%、1. 18%、9. 66%、52. 63%、17. 26%、12. 8%;多糖对铁氰化钾还原能力、羟基自由基和DPPH自由基清除能力具有显著的浓度依赖性(P <0. 05)。荞麦皮多糖主要由6种单糖组成,其抗氧化效果良好,可用作天然的抗氧剂。     

祖师麻多糖提取工艺及体外抗氧化活性的研究

目的:优选祖师麻多糖的最佳提取工艺,对其单糖组成进行分析,并对其体外抗氧化活性进行研究。方法:采用正交实验法,以多糖得率为指标,对祖师麻多糖的提取工艺进行优选。采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生高效液相色谱法对其单糖组成进行分析。采用比色法,测定了祖师麻多糖对DPPH自由基和羟基自由基的清除能力,还原能力以及总体抗氧化能力。结果:祖师麻多糖的最佳提取工艺为15倍量水,100℃提取3次,每次2h;单糖组成分析表明祖师麻多糖主要含有甘露糖,氨基葡萄糖,葡萄糖,半乳糖和岩藻糖;祖师麻多糖显示出较强的DPPH自由基清除能力,还原能力和总体抗氧化能力,以及中等强度的羟基自由基清除能力。结论:优选的提取工艺稳定可靠,祖师麻多糖具有较强的抗氧化活性。     

黄瓜多糖的体外抗氧化活性

目的：测定黄瓜中总糖含量,分离制备黄瓜多糖并测定其糖醛酸含量、单糖组成以及评价其体外抗氧化活性。方法：采用苯酚-硫酸法测定黄瓜提取物中的总糖含量;用硫酸-咔唑法测定黄瓜多糖中的糖醛酸含量;采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化高效液相色谱(HPLC)分析单糖组成;并在体外抗氧化评价体系研究黄瓜多糖对DPPH自由基、超氧阴离子自由基(O2－ ·)和羟自由基( ·OH)的清除活性以及总还原力(TRP)。结果表明：黄瓜多糖的总糖含量为63.5%,糖醛酸含量为10.6%。HPLC分析表明：黄瓜多糖由D-甘露糖、L-鼠李糖、D-葡萄糖醛酸、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-木糖、D-半乳糖、L-阿拉伯糖等8种单糖组成,物质的量比为4.08:2.78:1.00:5.82:6.07:2.78:8.48:6.58。黄瓜多糖有明显的抗氧化活性,在质量浓度为20mg/mL时,对DPPH自由基、O2－ ·、 ·OH的清除率分别为92.31%、83.57% 和77.59%,并发现其有明显的还原能力。结论：黄瓜多糖是一种典型的杂多糖,具有较强的抗氧化活性。     

利用硅胶柱层析分离纯化平贝总碱的研究

目的：对东北特产平贝母的生物碱进行分离纯化研究。方法：用硅胶柱层析法对平贝总碱进行分离纯化,固定相为薄层层析硅胶G,流动相为乙酸乙酯- 甲醇- 氨水(17:2:1)。用HPLC-ELSD 法对分离出的贝母素甲和贝母素乙的纯度进行测定。结果：分离出贝母素甲和贝母素乙,贝母素甲纯度为93.19%、贝母素乙纯度为92.09%。结论：采用的硅胶柱层析分离纯化可得到纯度较高的分离组分。     

猕猴桃苹果梨复合果酒发酵特性的研究

以猕猴桃、苹果梨为主要原料,以感官评分为考察指标,在单因素试验的基础上通过正交试验优化猕猴桃苹果梨复合酒发酵工艺条件。结果表明,最佳发酵工艺条件为猕猴桃汁∶苹果梨汁1∶1,初始糖度22%,酵母接种量0.30 g/L,发酵温度24 ℃,发酵时间7 d。此优化条件下,猕猴桃苹果梨复合果酒酒精度为11.65%vol,残糖为1.06%。低温静置澄清后,最终得到的产品酒体醇厚,酸甜适中,果香浓郁。通过抗氧化试验,澄清后DPPH自由基清除率为76.40%,总还原能力（吸光度值）为0.49。     

新疆昆仑雪菊多糖的分离纯化及其结构的初步鉴定

以新疆昆仑雪菊为原料,采用超声波辅助法提取雪菊多糖（KSCP）,经脱蛋白、脱色、透析、DEAE-52层析柱和SephadexG-100凝胶层析柱纯化后,获得两个多糖组分（KSCP1和KSCP2）;将分离纯化后的多糖组分经紫外光谱分析法、冻融分析法、SephadexG-100凝胶柱层析法对其纯度进行鉴定;采用凝胶渗透色谱法和气质联用法（GC-MS）对KSCP分子质量范围和单糖组成进行分析。结果表明,KSCP1和KSCP2均为单一组分;KSCP1是由葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、木糖4种单糖组成,其摩尔比为10.53∶5.02∶4.96∶1,分子质量范围为8 200～8 700 u;KSCP2主要由葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖3种单糖组成,其摩尔比为1∶2.78∶5.07,分子质量范围为6 100～6 500 u。     

真菌发酵液中纤维素酶分离提取工艺研究

该研究建立了两种分离提取纤维素酶的方法。二级盐析-G-75凝胶色谱法分离提取工艺为：纤维素酶发酵液经0.22 μm微滤膜预处理后,依次采用饱和度为20%、80%的（NH4）2SO4对其进行二级盐析,经G-75凝胶色谱层析,冷冻干燥后测得纤维素酶活性为13 675.76 U/g,总酶活收率为91.96%,总纯化倍数为31.41;二级超滤-G-75凝胶色谱法分离提取工艺为：纤维素酶发酵液经0.22 μm微滤膜预处理后,以30.165 mL/（min·m2）的膜通量分别经6×104 Da和1×104 Da的超滤膜分离,操作压力分别为0.050 MPa和0.037 MPa,经G-75凝胶色谱层析,冷冻干燥后测得纤维素酶活性为12 769.87 U/g,总酶活收率为92.91%,总纯化倍数为21.23。二级盐析-G75凝胶色谱法适合小规模间歇操作;二级超滤-G-75凝胶色谱法适合大规模连续操作。     

麦芽糖月桂酸酯的分离纯化与结构鉴定

采用薄层层析(TLC)和硅胶柱层析分离纯化了脂肪酶催化合成的麦芽糖月桂酸酯,然后用高效液相色谱(HPLC)、质谱(MS)、红外光谱(IR)和核磁共振(NMR)法鉴定了纯化组分的分子结构。TLC分离麦芽糖月桂酸酯的合理条件:点样量5μl,以氯仿/甲醇(4:1,V/V)展开15min,然后用5%硫酸乙醇溶液喷雾、120℃显色20min。硅胶柱层析分离麦芽糖月桂酸酯的适宜条件:10ml反应液上12mm×1000mm硅胶(100～200目)层析柱,流动相为氯仿/甲醇(4:1,V/V),流速18ml/h,按1管/10min收集洗出液。两种分离组分分别为6’-O-麦芽糖月桂酸酯和6,6’-O-麦芽糖月桂酸二酯。     

麦冬多糖POJ-U1a的结构研究及原子力显微镜观测

用功率超声从麦冬中提取麦冬多糖POJ-U1,通过DEAE-52 cellulose色谱柱和Sephadex G-150凝胶色谱柱进行分离纯化得到POJ-U1a,采用高效凝胶渗透色谱法测定其分子量,采用红外光谱法、气相色谱法对其化学结构进行研究,原子力显微镜观察其微观形貌。结果表明,麦冬多糖POJ-U1a的平均分子量为4.02×103D,是一种由均一葡萄糖组成的葡聚糖,具有糖类物质的特征吸收峰,同时存在呋喃环,是具有高度分枝的化学结构的多糖。     

响应面法优化超临界CO2萃取平贝总碱工艺的研究

利用超临界二氧化碳萃取技术提取平贝总碱,运用响应面法优化萃取工艺条件.在单因素试验基础上,以萃取压力、萃取温度、夹带剂用量为响应因素,平贝总碱萃取率为响应值,根据中心组合设计试验设计原理采用3因素3水平的响应面分析法,确定各工艺条件对萃取率的影响.结果表明:超临界二氧化碳萃取平贝总碱的最佳工艺条件为萃取压力22MPa、萃取温度48℃、夹带剂用量323mL.该条件下,萃取率为94.55%.     

苦瓜果实中多糖的分离纯化及性质分析

以苦瓜果实为材料,经热水抽提、乙醇沉淀和Sevag 法去蛋白后获得了苦瓜果实粗多糖(MCP)。MCP 经DEAE- 纤维素柱离子交换柱层析分离得到4 个级分MCP-A、MCP-B、MCP-C 和MCP-D。MCP-A 经Superdex G-100 柱进一步纯化得到苦瓜果实多糖MCP-A1 组分。MCP-A1 经高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)鉴定为均一组分,测定其平均分子量为93577D。经过对其理化性质鉴定表明,MCP-A1 不含蛋白质、核酸,含有糖醛酸,为非淀粉类多糖。红外光谱扫描结果表明,其具有典型的多糖吸收峰。     

黄桃水溶性多糖的提取和分离纯化

采用水提醇沉法从黄桃果肉中提取出水溶性多糖,经去蛋白和色素,得到纯白色的黄桃水溶性多糖HTP,过DEAE-纤维素柱分别在水洗脱和盐洗脱部分得到HTP1和HTP2,HTP1和HTP2过Sephadex G-300凝胶柱,仍为单一对称峰,采用凝胶色谱法和纸层析鉴定纯度,表明为纯品。