HPLC法同时测定山药中的植物甾醇

建立了一种高效液相色谱法(HPLC)同时测定山药中的3种植物甾醇(菜油甾醇、豆甾醇和β-谷甾醇)含量的方法。样品使用甲醇提取,经皂化、萃取后用HPLC进行分析。色谱条件:SunFire C8色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水(92.5:7.5),检测波长205 nm。结果表明:山药中3种植物甾醇在一定浓度范围内呈现良好的线性关系,相关系数均不小于0.9997,样品检出限为0.50～0.52μg/mL,样品平均加标回收率在93.5%～97.2%,相对标准偏差均小于3.6%。经测定,山药中的植物甾醇含量为菜油甾醇67.1～79.8μg/g,豆甾醇28.8～36.7μg/g,β-谷甾醇129.6～154.5μg/g。该方法操作简便、结果准确度高且重复性好,可作为山药中植物甾醇含量同时测定的方法。     

反相高效液相色谱法测定紫山药中薯蓣皂苷的含量

建立薯蓣属中紫山药中薯蓣皂苷含量测定方法,考察不同产地紫山药中薯蓣皂苷的含量,并与该属中其他山药进行对比。样品经冷冻干燥后研磨成粉末,然后经70%甲醇回流提取1h,采用HPLC法进行测定。色谱柱:DiamonsilTM(钻石)C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:甲醇-水(84∶16),流速:1.0mL·min-1,检测波长:206nm,柱温:30℃。结果表明,薯蓣皂苷与其他成分分离良好,线性范围0.65～65μg·mL-1(r=0.9999),回收率100.6%,不同产地山药中薯蓣皂苷含量差异较大。该方法简便、准确、重现性好,可用于山药及其同属其他植物中薯蓣皂苷的质量控制。     

不同品种山药中多糖及小分子有效成分的含量比较

目的:分析并比较不同山药品种中多糖及小分子有效成分的含量差异。方法:山药样品经乙醇脱脂后水浸提取得到多糖,通过苯酚-硫酸显色后,用紫外分光光度计进行多糖的含量测定;另取山药样品,经石油醚萃取去杂质后甲醇超声提取得到待测液,采用高效液相色谱二极管阵列检测器联用仪(High performance liquid chromatography-diode array detector,HPLC-DAD)测定尿囊素、尿嘧啶和腺苷的含量。色谱柱:XBridge?BEH Amide(4.6 mm×250 mm,5μm)柱;流动相:乙腈(A):水(B)梯度洗脱,0～5 min,90%～90%A;5～6 min,90%～95%A;6～50 min,95%A;流速:0.5 mL/min;检测波长:212 nm和255 nm;柱温:35℃。结果:铁棍山药中多糖、尿嘧啶、腺苷和尿囊素的平均含量为44.03、0.005、0.060 mg/g和3.662 mg/g,汾阳长山药中多糖、尿嘧啶、腺苷和尿囊素的平均含量为50.07、0.041、0.056 mg/g和2.625 mg/g,麻山药中多糖、尿嘧啶、腺苷和尿囊素的平均含量为34.79、0.005、0.087 mg/g和3.116 mg/g,白山药中多糖、尿嘧啶、腺苷和尿囊素的平均含量为81.75、0.006、0.048 mg/g和2.468 mg/g,太谷山药中多糖、尿嘧啶、腺苷和尿囊素的平均含量为56.67、0.015、0.080 mg/g和2.529 mg/g。结论:不同产地、不同品种山药中各种成分的含量存在明显差异。研究所建立的方法简便、准确、可靠,可用于山药中多糖及部分小分子有效成分的含量测定和比较。     

紫山药低醇发酵饮料中乙醇含量的气相色谱法测定

建立了紫山药低醇发酵饮料中乙醇含量的气相色谱检测方法。HP-INNOWAX(30m×0.25mm×25μm)毛细管柱为样品分析柱时,甲醇为样品的稀释剂;正丙醇可作为乙醇定量分析的内标物。甲醇、乙醇、正丙醇的出峰时间分别为2.909、3.110、3.846min,乙醇与正丙醇的分离度大于30。乙醇浓度在0.2~6.0mg/mL范围时,内标法测定的乙醇浓度与乙醇的峰面积的相关系数为0.9996,紫山药样品中乙醇的最低检出限为0.05mg/mL。该测定方法的乙醇回收率在94.4%~107.4%之间,重复性实验的相对标准偏差(RSD)为4.23%,可满足紫山药低醇发酵饮料中乙醇含量的测定要求。     

超高效液相色谱-飞行时间质谱法快速分析测定山药中7种常见杀菌剂

目的 建立超高效液相色谱-飞行时间质谱检测山药中7种常见杀菌剂的分析方法。方法 样品经乙腈提取，水浴氮吹至近干，丙酮定容，经超高效液相色谱-飞行时间质谱检测。结果 在正离子模式下，7种杀菌剂在水-甲醇（均含有0.01%甲酸和5 mmol/L甲酸铵）流动相中都具有较好的响应；0.01~0.40 mg/L范围内线性良好，相关系数R均大于0.999。不同温度（50℃、70℃）水浴实验结果表明70℃水浴温度符合实验要求。三个浓度水平的加标回收实验的回收率为70.75％～108.07％，相对标准偏差为 0.02％～5.01％。结论 该方法操作简单、分析准确，满足山药中常见杀菌剂的检测要求。     

山药皮残渣多糖结构表征及抗氧化活性测定

目的:充分开发山药皮的经济价值。方法:采用水提醇沉法对山药皮和经乙醇提取多酚、黄酮的山药皮残渣进行多糖提取,得山药皮多糖(P1)和山药皮残渣多糖(P2),并分析其结构特征和抗氧化活性。结果:P1、P2得率相差不大,但P2(33.5%)的多糖含量约为P1(17.8%)的两倍;二者均为孔状结构,P2较P1表面有着更密集的孔洞;P1中主要的单糖为甘露糖、葡萄糖及半乳糖,而P2的为甘露糖;P1、P2不仅存在微晶结构,还存在晶体和非晶结构共存的多晶系统;两种多糖样品具有相同的官能团且均未发现蛋白质;P1、P2中均存在3个螺旋结构,其重均分子量分别为37 153.52和3 467.37,此外,P2的热稳定性不如P1;在0.2～1.0 mg/mL质量浓度范围内,P1、P2的抗氧化活性均随质量浓度的增加而增强,P2较P1有着更好的抗氧化活性;P1、P2对DPPH自由基清除率的IC₅₀值分别为0.964,0.586 mg/mL,对羟自由基清除能力的IC₅₀值分别为0.962,0.711 mg/mL。结论:经乙醇提取多酚、黄酮的山药皮残渣中仍含有丰富的多糖,且P...     

ICP-MS法测定山药、山药皮和零余子中19种无机元素含量

建立山药、山药皮和零余子中无机元素的电感耦合等离子体质谱(inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS)分析方法,并对其中无机元素进行分析比较。样品经微波消解后,采用ICP-MS法测定山药、山药皮和零余子中无机元素的含量,并用SPSS 20.0对数据进行方差分析。山药、山药皮和零余子中含量较高的无机元素为K、P、Mg、Fe、Al、Zn;其中重金属元素Pb、Cd、As、Hg、Cu均符合限量标准;方差分析表明山药皮中大多数无机元素与山药和零余子具有极显著性差异,而山药与零余子之间是显著性差异。山药皮和零余子与山药一样具有很高的营养价值,在生产过程中具有很好的开发价值和应用前景。     

杂色曲菌素HPLC 检测方法的建立及其在大米污染样品中的运用

采用自制杂色曲菌素(VA)标准品,建立大米中杂色曲菌素的高效液相色谱检测方法。大米污染样品经丙酮提取、柱色谱净化,HPLC- 紫外检测器进行测定,检测波长288nm。结果表明,VA 在100～1250ng/mL 质量浓度范围内线性关系良好,r ＞ 0.999,方法回收率在84.12%～105.12% 之间,平均变异系数小于7.5%,最低检测限为50ng/mL。该方法灵敏度较高、稳定性好、成本较低,可以用于粮食中杂色曲菌素的定量检测。     

高效液相色谱法测定蜂胶软胶囊中白杨素和高良姜素的含量

目的建立高效液相色谱法测定保健食品蜂胶软胶囊中白杨素和高良姜素含量的方法。方法样品经乙醇提取后,由C_(18)色谱柱分离,以甲醇-0.1%磷酸(60:40,V:V)为流动相进行等度洗脱,用紫外检测器在波长为270 nm检测,外标法定量。结果白杨素在5.685～284.25μg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数为0.999,加标回收率为97.1%～103.0%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0 8%～1.8%;高良姜素在5.32～266μg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数为0.999,加标回收率为96.2%～102.0%,RSD为0.5%～1.9%。结论此方法简便快速,准确可靠,可提高保健食品蜂胶软胶囊中白杨素和高良姜素含量测定的效率。     

衍生化法测定山药中还原型谷胱甘肽(GSH)和总巯基(-SH)含量

目的 用衍生化法测定山药中还原型谷胱甘肽(GSH)和总巯基(-SH)的含量。方法 利用4,4?-二硫代联吡啶(4-DPS)和邻苯二甲醛(OPA)为衍生化试剂,采用细胞破壁和衍生化为一体的样品前处理方法, 分别用UV-vis分光光度法和荧光光谱法测定了山药鲜品中总巯基(-SH)、GSH的含量。结果 山药中含较丰富的总巯基和GSH, 含量分别达0.4556 ?mol/g和0.1792 ?mol/g。UV-vis分光光度法和荧光光谱法测定方法的检测限分别为1.0458 ?mol/L和0.5666 ?mol/L, 回收率分别为98.73%和98.40%。结论 本研究对山药中巯基化合物的含量、测定方法学和样品前处理方法提供了重要的基础数据和参考依据。     

高效液相色谱法测定冬虫夏草中虫草素和虫草酸的含量

为建立检测冬虫夏草中虫草素和虫草酸的方法,用甲醇超声提取虫草素、水超声提取虫草酸,再用高效液相色谱、示差折光检测器与紫外检测器串联的方法测定虫草素和虫草酸含量。通过对样品进行预处理、色谱条件和方法学指标的验证,建立了定量检测虫草素、虫草酸的新方法,二者回收率在90%～101%之间,二者日内、日间精密度(RSD)≤7.2%。虫草素、虫草酸检出限分别为50ng/mL和1.5μg/mL。该方法具有快速、准确、简便的特点。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定猪肉中肾上腺素残留量

建立了猪肉中肾上腺素残留量的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)的检测方法。样品经乙腈+甲醇(95+5)提取,C_(18)色谱柱分离,超高效液相色谱-串联质谱仪检测。本方法定量限为10μg/kg,线性范围为5～500ng/mL。样品加标回收率为75%～98%,相对标准偏差为4.8%～7.9%,方法简便快速、灵敏度高,为猪肉中肾上腺素残留量测定提供了新的方法。     

高效液相色谱法测定保健食品中水飞蓟素的含量

目的建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定保健食品中水飞蓟素的含量。方法样品以甲醇为提取剂超声提取30 min,以甲醇-水(55:45,V:V)为流动相,流速为0.8 mL/min,采用色谱柱Agilent TC-C_(18)分离,在288 nm检测波长下经HPLC检测;同时对检测波长、流动相比例、提取剂和提取时间等条件进行优化。结果水飞蓟素浓度在8.152~203.8μg/mL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.9999,平均回收率为100.35%,RSD值为0.95%,方法检出限为11.6 ng/g。结论该方法快速准确,可适用于保健食品中水飞蓟素含量的测定。     

山药粘蛋白的快速分离及其抗肿瘤活性的研究

山药粘液蛋白具有抗氧化作用、抗衰老、抗突变作用、调节免疫功能等功效,常规的提取方法大多采用水提醇沉提取工艺。利用酶解絮凝法对山药粘液蛋白进行快速分离提取,将山药全粉经糊化处理,淀粉酶水解后得到含有山药粘蛋白的上清液,对上清液进行蛋白絮凝沉淀处理,其最适条件为pH 9.0,壳聚糖终浓度0.8 g/L。得到的沉淀经冻干后,对其抗肿瘤活性进行研究,发现在样品经200倍稀释抗肿瘤效果明显。     

采用HPLC-DAD-ESIMS技术鉴定紫山药中的花色苷成分

采用大孔树酯对浙江台州黄岩紫山药中的花色苷进行分离,并用高压液相色谱-二极管阵列检测-质谱检测技术对其中的主要花色苷进行结构鉴定。通过差异pH法分析紫山药中花色苷的含量为28.8mg/kg。紫山药中4种主要的花色苷可能是:矢车菊素-3-葡萄糖苷或半乳糖苷的双咖啡酸酰化物,矢车菊素-3-二糖苷的芥子酸酰化物,矢车菊素-3-二糖苷阿魏酸的酰化物,芍药色素-3-二糖苷的芥子酸酰化物。     

山药多糖提取优化及对家兔血小板数的影响

对山药中多糖的提取工艺进行研究,通过单因素实验和L9(34)正交实验对山药多糖提取条件进行了优化,单因素考察了料液比、提取时间、提取温度、乙醇浓度等对山药多糖提取率的影响。试验研究山药多糖对家兔血小板数的影响,山药多糖给药量分大、中、小剂量组(100、75、50 mg/kg),正常对照组给等体积生理盐水,每天1次,连续给药1个月,每周对家兔抽血观察血小板数量的变化。结果表明,山药多糖的最佳提取条件为:温度80℃、提取时间2 h、料液比1:40、乙醇浓度90%,多糖提取率为2.12%;山药多糖能够增加家兔血小板数,而且多糖量越大家兔血小板数增加越多。     

超高效液相色谱-串联质谱测定水产品中的己烯雌酚

建立了水产品中己烯雌酚(DES)的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MSMS)检测方法。样品经乙酸乙酯提取后,经正相固相萃取小柱净化,进行UPLC-MSMS分析。当添加水平在0.1～1.0μg/kg时回收率大于75%,相对标准偏差为7.2%～9.2%。     

高效液相色谱法同时检测食品中的碱性橙、碱性嫩黄O和碱性桃红T染料含量

建立了食品中碱性橙、碱性嫩黄O 和碱性桃红T 染料含量的高效液相色谱检测方法。样品经碱化甲醇提取,提取液在碱性条件下用二氯甲烷萃取,浓缩后用酸化甲醇溶解并用甲醇饱和正己烷萃取净化后经高效液相色谱分离、检测。本方法检测限分别为碱性橙0.02mg/kg、碱性嫩黄O 0.03mg/kg、碱性桃红T 0.004mg/kg。6 种食品样品加标回收率实验所得回收率为72.3%～96.5%,相对标准偏差(RSD)为0.3%～8.8%(n=6),三种染料在0.05～2.5μg/ml 浓度范围内均呈良好的线性关系,线性回归系数(r)均大于0.9998。     

山药啤酒的研制

以山药、麦芽为原料,酶法糖化制汁,接种啤酒酵母发酵研制了山药啤酒。将新鲜山药制备成山药粉,与麦芽在复合酶的作用下糖化制汁。采用正交试验设计研究复合酶的添加量、添加阶段、作用时间、山药粉添加量对山药、麦芽mix中还原糖量、α-氨基氮含量的影响。结果表明,酶法制备山药、麦芽混合汁的最佳工艺条件为酶的添加量0.36%,添加阶段45℃,作用时间17min,山药粉添加量35%。于此工艺下制备的山药、麦芽混合汁经酵母菌代谢后,高级醇含量为55.8mg/L,双乙酰0.06mg/L,酒精度3.91%(W/W),真正发酵度66.4%。酿制的啤酒不仅具有大麦芽啤酒的风味,并且还富含了山药中多种氨基酸和抗癌物质,不失为一种较好的功能性饮品。     

高效液相色谱法检测鳗鱼组织中阿维菌素的残留量

建立了快速测定鳗鱼组织中阿维菌素残留量的反高效液相色谱测定方法.鳗鱼样品经乙腈提取,二氯甲烷进行液相萃取净化、浓缩,经N-甲基咪唑和三氟乙酸酐进行衍生化,高效液相色谱(荧光检测器)进行检测.本方法在鳗鱼组织中的阿维菌素残留量的最低检测限为1μg/kg;鳗鱼组织中添加浓度为2～20μg/kg时,阿维菌素的添加回收率在78.3%～101.9%.