UPLC-MS/MS法测定美容养颜类保健食品中9种雌激素

建立一种快速检测美容养颜类保健食品中非法添加9种雌激素类药物(雌三醇、己烯雌酚、己烷雌酚、己二烯雌酚、17α-炔雌醇、雌酮、17α-雌二醇、17β-雌二醇和己烯雌酚-D8)的UPLC-MS/MS方法。样品经水-甲醇(50:50,V/V)超声提取后,上清液用Oasis HLB固相萃取柱净化,以0.05%的氨水溶液-甲醇为流动相梯度洗脱,经Inertsil ODS-3(2.1 mm×75 mm,2μm)色谱柱分离,目标化合物在ESI源负离子模式下电离,采用多反应监测模式进行定性、定量分析。结果表明:9种雌激素的方法检出限(S/N=3)为0.4~1.3μg/kg,定量限(S/N=10)为1.9~5.4μg/kg。在低、中、高3个加标水平下的平均回收率为76.9%~109.9%,相对标准偏差(N=6)为1.3%~14.7%。对25批次市售美容养颜类保健食品进行检测,均未发现上述9种雌激素。该方法灵敏高、专属性强,适用于美容养颜类保健食品中雌激素类非法添加的定量及确证分析。     

气相色谱-三重四极杆质谱法测定液体乳及乳粉中的17种邻苯二甲酸酯类增塑剂

目的建立气相色谱-三重四极杆质谱法(gas chromatography-tandem mass spectrometry,GC-MS/MS)同时测定液体乳及乳粉中17种邻苯二甲酸酯类增塑剂的含量。方法样品经乙腈超声提取,凝胶渗透色谱(gel permeation chromatography,GPC)净化后用GC-MS/MS分析,外标法定量。结果该方法线性关系良好,相关系数为0.9956～0.9999;方法的检出限(S/N=3)为3～60μg/kg;定量限(S/N=10)为10～200μg/kg;在50、200、500μg/kg添加水平下的平均回收率为78.2%～115.4%,相对标准偏差为2.65%～9.95%。结论本研究建立的方法样品处理简单快速、净化效果好、灵敏度和选择性高,适用于日常检测工作。     

同位素稀释法-超高效液相色谱-串联质谱法测定豆芽中6种喹诺酮类药物残留

目的建立通过式固相萃取(solid phase extraction,SPE)柱净化、氘代同位素内标、超高效液相色谱-串联质谱法同时测定豆芽中6种喹诺酮类药物残留的方法。方法用0.1%甲酸-乙腈作为提取溶剂,经通过式固相萃取柱净化提取液,超高效液相色谱-串联质谱测定豆芽中6种喹诺酮药物残留。结果 6种喹诺酮在5.0～200μg/L范围内线性关系良好,r~2≥0.999;方法检出限(S/N=3)为0.7μg/kg,定量限(S/N=10)为2.0μg/kg;加标水平为2.0～80μg/kg时,平均回收率在85.5%～119.4%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)(n=6)为0.13%～9 93%。结论本方法前处理简单,定量结果准确,回收率高,可以应用于大批次豆芽中喹诺酮药物残留的监测。     

液相色谱-串联质谱法测定鸡肉和鸡蛋中3种硝基咪唑类药物

目的优化液相色谱-串联质谱法测定鸡肉及鸡蛋样品中地美硝唑(dimetridazole,DMZ)、甲硝唑(metronidazole, MNZ)、替硝唑(tinidazole, TDZ)3种硝基咪唑类药物。方法样品经过乙酸乙酯提取,氮吹浓缩,盐酸水溶液复溶,正己烷除脂,固相萃取柱净化,以乙腈-0.1%乙酸水溶液为流动相, SB-Aq色谱柱分离,液相色谱串联质谱法在多重反应监测(multiple reaction monitoring, MRM)正离子模式下检测,外标法定量。结果鸡肉、鸡蛋标准曲线在1～500μg/kg的浓度范围内线性关系良好,相关系数r0.999,方法的回收率在67.56%～97.91%之间,相对标准偏差为0.90%～16.27%,定量限(S/N=10)为5μg/kg,检出限(S/N=3)为1μg/kg。结论本方法样品前处理简单,精密度、重复性和回收率较好,适用于批量测定鸡肉及鸡蛋样品中3种硝基咪唑类药物。     

固相萃取-液相色谱-串联质谱法同时检测猪肉中18种苯二氮卓类药物残留量

建立了同时检测猪肉中18种苯二氮卓类药物残留的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析方法。样品中的苯二氮卓类药物残留在pH 5.2的乙酸铵缓冲溶液中酶解后,用氨水调节pH值大于9.5,经乙酸乙酯-异丙醇(体积比5∶1)提取,正己烷去脂,MCX离子交换柱净化,采用电喷雾正电子模式电离,多反应监测模式检测,同位素内标法定量。结果表明:在0.5～50.0μg/L范围内18种苯二氮卓类药物的线性相关系数均大于0.999 0,检出限(S/N≥3)范围为0.01～0.13μg/kg,定量限(S/N≥10)范围为0.04～0.45μg/kg。添加浓度水平为1.0,2.0和5.0μg/kg时,平均回收率范围为76.0%～107.2%,相对标准偏差(RSD)范围为2.3%～9.1%。     

超高效液相色谱-三重四极杆质谱法测定保健食品中28种降糖类非法添加化合物

目的建立超高效液相色谱-三重四极杆质谱法测定保健食品中28种降糖类非法添加化合物的分析方法。方法采用Merck SeQuant ZIC-HILIC色谱柱(100 mm×2.1 mm,3.5μm),以乙腈-含10 mmol/L甲酸铵的0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,分离二甲双胍等3种化合物;采用Waters CORTECS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.7μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,分离苯乙双胍等25种化合物,在电喷雾离子化正离子或负离子模式下,以多反应监测方式(multiple reaction monitoring,MRM)检测。结果二甲双胍等3种化合物在进样浓度为50~1000μg/L范围内线性关系良好,妥拉磺脲等5种化合物在25~500μg/L范围内线性关系良好,其余20种化合物在5~100μg/L范围内线性关系良好,相关系数(r)均大于0.99。各化合物在定量限(limit of quantity,LOQ)1倍、2倍、10倍添加水平下的平均加标回收率为48.6%~134.4%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0.1%~8.4%(n=6)。二甲双胍等3种化合物的定量限为500μg/kg,妥拉磺脲等5种化合物的定量限为250μg/kg,苯乙双胍等20种化合物的定量限为50μg/kg。结论本方法灵敏、高效,可用于测定保健食品中降糖类非法添加化合物含量。     

奶粉中VK1的超高效液相色谱定量和串联液质确证分析

建立婴幼儿奶粉中VK1的超高效液相色谱(UPLC)检测方法和液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测确证方法。经研究,对国标检测方法的前处理过程稍作改进,减少基质干扰,操作简便,提取率稳定。UPLC法检出限为40μg/kg(S/N=3),LC-MS/MS法检出限为3.5μg/kg(S/N=3);样本添加水平在500μg/kg～2 000μg/kg时,平均回收率为78.4%～88.1%,相对偏差(n=6)为3.7%～6.4%。该方法能够满足奶粉中VK1含量的准确测定。     

液相色谱－串联质谱法同时测定保健食品中 四种违禁药物含量

建立了超高效液相色谱-串联质谱法测定保健食品中西地那非、他达那非、伐地那非以及红地那非四种违禁药物含量的方法。采用ACQUITY UPLC BEH C18（100 mm×2.1 mm,1.7μm）色谱柱,以甲醇和添加0.1%甲酸5 mmol乙酸铵为流动相,梯度洗脱程序,进样分析20 min,在电喷雾正离子模式下以多反应监测(MRM)方式检测,外标法定量。四种那非类违禁药物的检出限(LOD,S/N=3)和定量限(LOD,S/N=10)分别0.1～0.5 μg/kg和0.3～2.0 μg/kg在0.1～100 μg/kg浓度范围内线性关系良好(r>0.99),加标回收率为73.6%～90.4%,相对标准偏差为1.0～7.9。     

多壁碳纳米管分散固相萃取-液相色谱串联质谱法测定大米中26种氨基甲酸酯类农药及其代谢产物残留量

目的：建立多壁碳纳米管分散固相萃取-液相色谱串联质谱法测定大米中26种氨基甲酸酯类农药及其代谢产物残留量的分析方法。方法：大米样品水化后经酸化乙腈提取，多壁碳纳米管净化，C₁₈色谱柱分离，流动相采用2 mmol/L甲酸铵水和2 mmol/L甲酸铵甲醇进行梯度洗脱，电喷雾正离子(ESI⁺)模式电离，多反应监测模式检测，基质标准曲线外标法定量。结果：结果表明，26种农药在0.2～100 ng/mL范围内线性关系良好，相关系数均大于0.999，方法的检出限(S/N=3)为0.01～0.18μg/kg，定量限(S/N=10)为0.03～0.58μg/kg。在1、2μg/kg和20μg/kg 3个添加水平下，26种农药的回收率为87.4%～112.8%，相对标准偏差(n=6)为1.46%～7.22%。结论：该方法操作简便、灵敏度和精密度高、结果准确可靠，适用于大米中氨基甲酸酯类农药及其代谢产物残留量的检测。     

HPLC-MS/MS法测定安神类代用茶中19种镇静安神类非法添加物质

建立一种快速测定安神类代用茶中19种镇静安神类非法添加物的高效液相色谱-串联质谱(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)的检测方法。样品经乙腈提取后,以ACE Excel 2 C_(18)(100×2.1 mm,1.7μm)为色谱柱,甲醇～0.1%甲酸为流动相进行梯度洗脱,采用多反应监测正离子模式对19种非法添加物质同时进行定性定量分析。结果表明,19种分析物在其相应的浓度范围内峰面积与质量浓度呈良好的线性关系,相关系数(R~2)均大于0.99,该方法的检出限为10μg/kg～200μg/kg,定量限为30μg/kg～600μg/kg,样品的回收率为80.5%～108.8%。该方法可应用到安神类代用茶中19种镇静安神类非法添加物的定量分析检测。     

配制酒中非法添加淫羊藿的鉴别及含量测定

目的 采用高效液相色谱仪建立配制酒中非法添加淫羊藿的鉴别及淫羊藿7种特征组分的测定方法。方法 样品经水浴蒸干后,用甲醇溶液溶解残渣,提取液离心,过滤,上机测定,Waters Symmetry Shield C18 (250mm×4.6mm,5μm)色谱柱进行分离,乙腈和20mmol/L乙酸铵水溶液(含0.1%乙酸)为流动相梯度洗脱,外标法定量。结果 7种化合物的线性检测范围最高浓度为100 μg/mL,相关系数R_²＞0.99,定量限为0.05～0.08 μg/g,于1倍定量限、2倍定量限、10倍定量限3个添加水平下进行加标回收试验,7种化合物平均回收率为92.64%-107.21%,相对标准偏差(RSD%)为0.75%-3.00%。结论 该方法操作方便、简单、灵敏度高、重复性好,满足配制酒中非法添加淫羊藿中药材的鉴别需求,为配制酒的科学监管提供有效的技术支撑。     

清咽类保健食品中非法添加盐酸二氧丙嗪的 检测方法研究

目的　建立保健食品中非法添加盐酸二氧丙嗪的筛查方法。方法　采用薄层色谱法(TLC)进行快速筛查,采用高效液相色谱法(HPLC)对盐酸二氧丙嗪进行定性分析以及定量测定,并采用超高效液相-质谱联用法(UPLC-MS)进行确证。结果　薄层色谱法盐酸二氧丙嗪斑点显色明显;高效液相色谱法在11.149-222.977 μg/mL范围内线性良好,质谱图中盐酸二氧丙嗪分子离子峰及二级碎片离子明显。 结论　本方法专属性强,灵敏度高,重现性好,可作为清咽类保健食品是否添加盐酸二氧丙嗪的检测方法。     

酚酞单克隆抗体的制备

目的 建立免疫学快速检测减肥类保健食品中非法添加的酚酞, 制备酚酞单克隆抗体并进行评价。方法 利用碳二亚胺(carbodiimide, EDC)法合成免疫原和包被原, 用免疫原免疫Balb/C小鼠, 取小鼠脾脏与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合。采用竞争结合双阳性两步筛选法, 筛选出能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞, 利用有限稀释亚克隆方法得到单株细胞; 采用体内诱生法制备腹水型单克隆抗体。利用辛酸-饱和硫酸铵法对腹水型抗体进行纯化, 利用酶联免疫吸附法鉴定纯化后的抗体。结果 成功合成了酚酞-BSA免疫原和酚酞-OVA包被原, 筛选获得酚酞杂交瘤细胞株FT/BSA/2019, 单克隆抗体的效价1×105。结论 本研究初步建立了特异性高的酚酞单克隆抗体的制备方法。     

腐竹中掺杂掺假及非法添加物质检测方法的比较

腐竹作为一种我国传统豆制品美食, 长期受到广大消费者的青睐。少数不法商家在腐竹生产、加工环节中进行掺入非法添加物质(硼砂、吊白块等)及掺杂掺假物质(淀粉等), 以达到提高腐竹生产率、节约成本、改善产品质量的目的。长期食用这类腐竹产品会对人体造成严重危害。本文从市场监管角度出发, 对常用腐竹中掺杂掺假及非法添加物质的检测方法进行对比, 分析各个检测方法的优点与缺点, 以期为食品检验工作中对腐竹检测方法的选择提供参考。     

气相色谱-串联质谱法测定大米中非法添加的石蜡

建立测定大米中石蜡的气相色谱-串联质谱（GC-MS/MS）法。 样品经石油醚提取,浓缩后用正己烷溶解,加浓硫酸净化,通过 对C24、C26、C28、C30、C335种烷烃的测定,进行石蜡的定性分析,用上述5种烷烃的峰面积之和进行定量分析。 该方法的检出限为0.25mg/kg, 定量限为0.75mg/kg,加标回收率及精密度实验的平均回收率为93.38%～110.22%,相对标准偏差（RSD）为5.42%～12.11%,相关系数为 0.9980。结果表明,该方法精密度良好,检测结果可靠,可作为大米中石蜡的测定方法。     

保健食品中非法添加药物的检测现状及筛查策略研究

目的为保健食品中非法添加药物的发现提供筛查策略和方法,以弥补现有检测方法的不足。方法首先针对可以实现或者辅助实现保健食品声称功能的药物建立了对应的信息库,对其主要临床功效和副作用进行了信息汇总。其次通过质谱单离子扫描和子离子扫描,建立上述物质的质谱筛查信息。同时按照不同能量水平,建立不同信号强度的质量信息库。进而作为主体信号,建立液相质谱多反应检测的方法,及其液质联用采集信息,并选择了不同剂型、不同基体的保健食品作为基质,建立了阴性、添加阳性的数据信息库。形成了治疗信息、分析检测信号及确证信息为线索的筛查体系和方式。结果以缓解体力疲劳类药物为例,通过对近百批相关保健食品进行筛查,可见阳性结果发现率较一般方法提高了100%,而对于未知物质的发现提高了300%,验证了以信息依赖型为筛查主线的方法策略。结论信息依赖型保健食品非法添加药物筛查为保健食品中非法添加药物的发现提供了新的途径。     

保健食品中非法添加药物的广谱筛查和确证

采用液相色谱仪—二极管阵列检测器-离子阱-飞行时间串联质谱仪(LCMS-DAD-IT-TOF)建立减肥类非法添加药物高分辨质谱数据库。样品经乙腈超声提取,提取液经QuEChERS吸附剂净化,以ZORBAX Eclipse AAA色谱柱(150mm×4.6 mm,4.5μm)分离,乙腈和0.1%乙酸为流动相梯度洗脱。筛查限为0.10~0.75 mg/kg,平均回收率在49.4%~88.1%;相对标准偏差为5.0~14.8%。该方法通过紫外光谱确定非法添加药物特征吸收波长,结合滥用药物高分辨质谱数据库,通过精确质量数的检索匹配对非法添加药物实现快速筛查,并使用保留时间、同位素丰度和多级特征碎片离子进行确证。根据多级碎片离子,推导出裂解途径。具有简便、快速、高效、准确等优点。在缺乏标准品或对照品的情况下,即可得到准确可靠的结论。适用于保健食品中非法添加药物的有效快速筛查。     

Monitoring of 35 illegally added steroid compounds in foods and dietary supplements

The adulteration of foods and dietary supplements with steroids has been well attested and has the potential to be dangerous owing to various possible side-effects. Therefore, detecting the presence of steroids in various health food products has become increasingly important. The purpose of this study was to monitor illegally adulterated health food products by applying multiple reaction monitoring techniques to tandem liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS/MS). Various food and supplement samples advertised for the treatment of arthritis, bone ache and joint pain were collected over a 4-year period (2010–13) from local and online Korean sources. The method was validated based on limits of quantification of 0.5–15.0 ng g^?1 and recoveries in spiked solid samples of 81–119%. Approximately 30% of the tested samples were identified as having been illicitly adulterated. Six compounds were observed overall, including dexamethasone (45.1%), cotrisone-21-aceteate and prednisone-21-acetate (16.2%), and betamethasone (14.4%), and found in some samples in high concentrations.     

保健食品中非法添加药物检测技术研究进展

保健食品是特殊食品,向其中添加违禁药物的现象屡禁不止,市场监管人员需要根据不同的需要选择合适的检测技术。本文对目前保健品中违禁药物的常用样品前处理方法和检测技术光谱法、薄层色谱分析法、液相色谱法、气相色谱-质谱法进行综述,以期为保健品中违禁药物的检测和市场监管提供参考。     

HPLC同时测定调味料中非法添加多组分工业染料的方法研究

目的 建立了同时测定调味料中15种工业染料含量的HPLC方法.方法 采用CAPCELL PAK C18 MG (250 mm x4.6 mm,5μm)色谱柱,以硝基呋喃-乙腈- 20 mmol/L乙酸铵为流动相体系进行梯度洗脱,分别在波长为450、530和600 nm下检测.结果 方法的线性范围:2～50 μg/ml,r≥0.99.15种工业染料的检出限为0.05～0.53 mg/kg;15种组分的平均回收率73.68％～89.33％,相对标准偏差(n=6)0.8％～8.1％.结论 本方法快速、准确,灵敏,可用于同时测定食品中15种非法添加的工业染料.