基于微波水解-离子色谱的香菇多糖组成指纹图谱研究（网络首发、推荐阅读）

建立一种微波水解–离子色谱测定香菇多糖组成的方法,微波水解多糖条件：三氟乙酸浓度为3.0 mol/L;水解温度为130 ℃;水解时间为30 min;料液比为20 mg多糖样品/7 mL三氟乙酸溶液。离子色谱条件：CarboPac PA-20 离子交换柱;3.75 mmol/L NaOH溶液为流动相;流速为0.5 mL/min;检测器为脉冲安培电化学检测器;柱温为30 ℃。与常规水解–PMP衍生–液相色谱法相比,样品的分析时间由365 min缩短到65 min。方法学研究表明,方法准确性高,重现性、稳定性好,可应用于香菇多糖样品的单糖组成分析。通过106批香菇多糖样品的分析构建了基于多糖的单糖组成信息的离子色谱指纹图谱,确定6个共有特征峰,分别是岩藻糖、氨基葡萄糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖、木糖,相似度在0.95以上。该指纹图谱的建立为香菇多糖的质量控制提供参考。     

葛仙米多糖中单糖定性定量分析方法研究

建立了柱前PMP衍生高效液相色谱法分离检测6种中性糖、2种糖醛酸及1种糖胺的方法;考察了三氟乙酸(TFA)水解多糖的时间、温度以及三氟乙酸浓度对多糖水解的影响;采用液相色谱法分析葛仙米多糖提取物中的单糖组成。结果表明:甘露糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖等9种单糖平均回收率为81. 08%~102. 10%。相较于化学法,该方法准确可靠,线性关系良好,重复性和专属性好,可以很好地完成葛仙米多糖提取物中单糖的定性定量分析。     

微波消解-1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生-高效液相色谱法测定枸杞多糖含量及组成

目的 建立微波消解-1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone, PMP)柱前衍生-高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)测定枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharides, LBPs)含量及组成的方法。方法 采用微波消解技术水解LBPs进行样品前处理,利用PMP进行柱前衍生,建立结合HPLC检测LBPs的方法,并利用该方法测定4个不同枸杞产地LBPs的含量及单糖组成。结果 经方法学评价,8种单糖均具有良好的线性关系,相关系数均大于0.98;平均加标回收率为94.95%~99.22%,相对标准偏差小于1.90%;检出限和定量限良好。结论 该方法可用于LBPs含量及组成的测定,分析表明LBPs主要由葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、甘露糖、鼠李糖、木糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸组成,不同产地LBPs含量存在差异,其中甘肃玉门含量较高。     

微波辅助提取枸杞多糖的工艺优化及其抗氧化性研究

利用响应面法优化枸杞多糖的微波辅助水提取工艺,得到最佳提取工艺为:微波功率300W,微波时间1.8min,液料比26∶1,枸杞粗多糖得率可以达到9.57%(w/w)。在此工艺条件下,微波提取枸杞多糖的DPPH.清除率比BHA低5%左右(0.1mg/mL浓度除外),但ORAC值及抗油脂酸败能力略高于BHA,总体来说抗氧化活性与水提多糖相近。     

微波辅助萃取枸杞多糖的工艺研究

采用微波辅助提取枸杞中的多糖,并采用正交实验法优化主要影响因素,如微波功率,提取时间,提取温度,提取次数等。结果表明,微波辅助提取枸杞多糖的最佳工艺条件为:微波功率700W,提取温度80℃,提取时间40min,提取次数为2次,多糖得率较高。     

微波消解法提取玉米中铅镉含量的条件优化

目的优化微波消解法提取玉米中重金属铅镉的消解条件,并采取石墨炉原子吸收法测定其中的铅镉含量。方法以硝酸与过氧化氢比值及微波消解仪第3个阶段的温度、升温时间、保持时间为4个研究因素,对玉米实验材料和标准样品进行微波消解,以回收率为评价指标,通过正交试验确定在检测玉米中铅镉含量时微波消解的最佳条件。结果在处理玉米样品时,微波消解的最佳条件是硝酸和过氧化氢用量比为6:2(V:V),微波消解第3阶段温度为200℃,升温时间为8 min,保持时间为12 min。经方法学验证,发现优化方法的相对标准偏差为1.05%～1.21%,回收率为95.1%～96.8%。结论此优化方法处理玉米样品节省时间,消解完全,同时能够提高检测结果的准确度和精密度,适合大批量玉米样品中铅镉的检测。     

超细粉碎对枸杞多糖得率、结构及抗氧化活性的影响

研究建立了超细粉碎辅助提取枸杞多糖的工艺技术,并初步探讨了超细粉碎对枸杞多糖结构及抗氧化活性的影响.采用超细粉碎技术对枸杞进行预处理,在单因素试验基础上选取试验因素与水平,根据中心组合(Box-Benhnken)试验设计原理,运用响应面分析法优化工艺条件.分别采用高效液相色谱法(HPLC)、原子力显微镜(AFM)、DPPH和ABTS法进一步考察超细粉碎对枸杞多糖结构及其抗氧化活性的作用.结果:枸杞多糖的最佳提取工艺条件为水浴温度83.8℃、料液比1∶6、浸提时间95min、提取3次；在此条件下得率可达4.00％ ±0.13％,比常规粉碎法提高了15.61％；超细粉碎后枸杞多糖平均分子量明显降低,其球形颗粒状团聚物的高度和直径减小,抗氧化活性显著提高.结论采用超细粉碎技术,能有效提高枸杞多糖得率,降低多糖分子量,有助于增强其抗氧化活性.     

枸杞多糖提取工艺比较及体外抗氧化性研究

本实验选用浸泡提取法、超声波提取法、微波提取法提取枸杞粗多糖.通过对三种方法所得枸杞粗多糖提取率进行比较,并用硫酸-苯酚法对多糖含量进行定性定量分析,结果表明:浸泡提取多糖的含量最小,提取率16.90%,微波提取多糖的含量最高,提取率22.62%.根据枸杞粗多糖对自由基的清除率以及对超氧阴离子的清除作用的测定,比较同浓度条件下的VC与枸杞多糖对抗氧化活性,结果表明:枸杞多糖具有体外抗氧化活性作用,但低于VC的体外抗氧化活性.     

枸杞多糖特性和单糖组成及木糖醇含量的分析

目的 多种分析方法联合分析枸杞多糖特性和单糖组成及木糖醇含量。方法 枸杞干果采用水提醇沉的方法提取枸杞多糖,计算提取率。建立凝胶渗透色谱-示差检测-多角度激光光散射法测定枸杞多糖分子量及分子量分布;再将提取的枸杞多糖经三氟乙酸水解为单糖,建立高效阴离子色谱-积分脉冲安培法测定水解后的阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖、果糖、木糖、岩藻糖、核糖9种单糖和木糖醇。结果 采用本法检测宁夏地区的10批枸杞,枸杞多糖得率为1.86%～3.21%;10批枸杞多糖的重均相对分子量为9.12×10⁵～3.65×10⁶ Da,离子色谱法检测10批枸杞中单糖和木糖醇含量从高到低依次为阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、甘露糖、果糖、木糖醇及岩藻糖。结论 本文对枸杞多糖的重均分子量及单糖组成、含量进行初步研究,与现行质量标准中检测方法相比,控制指标更加全面、客观、准确,为建立枸杞多糖的质量控制方法提供技术参考。     

微波辅助复合酶法提取枸杞多糖及其抗氧化活性研究

采用微波辅助复合酶法提取枸杞多糖。以多糖得率为指标,在单因素试验的基础上通过响应面法优化提取工艺,并评价其抗氧化活性。结果表明：最佳提取工艺为纤维素酶∶果胶酶∶蛋白酶质量比3∶1∶2、加酶量7%(以枸杞质量计)、酶解时间2.50 h、微波时间4 min、酶解温度52℃、酶解pH 5.2,在此条件下,枸杞多糖得率为24.37%±1.65%,制得的枸杞多糖对DPPH·和ABTS⁺·的清除率分别为62.07%、 47.82%,表明其具有较好的抗氧化活性。     

基于化学计量学的枸杞多糖部分酸水解产物PMP-HPLC指纹图谱

本文通过构建枸杞多糖的部分酸水解产物指纹图谱,结合多种化学计量学方法评价不同产地枸杞多糖的差异并用于市售样品的真伪鉴别。采用水提醇沉法提取16批不同产地的枸杞多糖,采用三氟乙酸部分水解,将水解产物中的单糖和寡糖采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生化HPLC分析,通过中药色谱指纹图谱软件评估不同产地样品的相似性,采用聚类分析（HCA）、主成分分析（PCA）和偏最小二乘判别分析（PLS-DA）对指纹图谱进行综合评价。结果表明,不同产地枸杞多糖部分酸水解产物中均含有7种单糖、聚合度（DP 2~4）的半乳糖醛酸聚糖和3种其他类型的二糖。16批产地的枸杞多糖相似度在0.911~0.997,HCA、PCA和PLS-DA将不同产地的枸杞多糖分为3类,分类结果与产地有一定的相关性,并且筛选出3个影响产地间差异的标志性成分,分别为葡萄糖（Glc）、阿拉伯糖（Ara）和半乳糖（Gal）。本文建立的指纹图谱可用于枸杞多糖的质量控制。     

醋酸催化下枸杞多糖的硒化修饰及抗肿瘤活性

制备硒化枸杞多糖,初步了解其结构及体外抗肿瘤活性。利用亚硒酸钠对枸杞多糖进行修饰,通过将无机硒转化为有机硒,为得到高含硒量的枸杞多糖进行探索,找出最佳反应条件为:2mL冰醋酸作为催化试剂,硒化试剂硒酸钠用量为2g,室温下反应时间48h。通过紫外光谱、红外光谱分析,并进行了体外抗肿瘤的初步试验研究。结果:确定了硒化枸杞多糖的分子结构中存在亚硒酸基团,人宫颈癌细胞抑制率可达到26.1%。硒化枸杞多糖对人宫颈癌细胞存在一定的抑制作用。     

枸杞多糖结构及其单糖组分的分析研究

枸杞经乙醚脱脂和Sevag法脱蛋白后,用热水提取并用乙醇沉淀多糖,采用紫外光谱、红外光谱、气相色谱和FID检测器对枸杞多糖结构和功效成分单糖进行光谱分析和气相色谱分析。结果表明:枸杞多糖属于蛋白多糖,构杞多糖存在有官能团如—OH,C—O—C,C=O,-NH_2等,其糖苷键存在β-型糖苷键和α-构型的吡喃糖和呋喃糖。多糖为杂多糖,粗多糖得率为2.04%,采用DB-1701毛细管柱对乙酰化后的单糖能进行很好的色谱分离,其单糖组分至少含有8种以上的单糖:鼠李糖、岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖等,其中含量较多的是阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖,它们的摩尔比1.956:0.835:0.629,其余的单糖含量比较低。     

响应面法优化超高压提取枸杞多糖工艺

以枸杞为试验原料,以水为溶剂采用超高压提取枸杞多糖。在单因素实验基础上,通过响应面法研究了提取压力、保压时间、提取温度、液料比4个因素对枸杞多糖得率的影响,优化了提取工艺,并对枸杞多糖的体外抗氧化活性进行了研究。结果表明,超高压提取枸杞多糖的最佳工艺条件为:提取压力446 MPa、保压时间8 min、提取温度58℃、液料比23:1 mL/mg,该条件下进行三次重复试验,枸杞多糖平均提取得率为9.52%,与预测值9.54%误差为0.21%。枸杞多糖对O₂-·、·OH有一定的清除能力,当枸杞多糖浓度为1 mg/mL时,对·OH的清除率达到76.98%±2.64%,对O₂-·的清除率达到73.02%±1.83%,且枸杞多糖浓度在0~1 mg/mL范围内与抗氧化活性呈正相关。本研究为枸杞多糖提供了一种新型的提取工艺。     

枸杞硒多糖的合成及对人体肝癌HepG2细胞增殖的体外抑制作用评价

根据有机硒化合物的合成方法,本文以枸杞多糖和亚硒酸钠为原料,采用响应面法优化枸杞硒多糖的工艺条件。利用原子荧光、体外化学反应等分析技术测定了枸杞硒多糖中的硒含量,并用MTT法对枸杞硒多糖抑制人体肝癌细胞增殖的活性进行了初步评价。结果表明:制备枸杞硒多糖的最优条件是按照LBP为1 g计算,加入0.62 g Na₂SeO₃,用1% HNO₃充分溶解,再加入BaCl₂ 1 g,74 ℃反应9 h。在此条件下,枸杞硒多糖中的硒含量为648.65 μg/g。活性结果显示,枸杞多糖和枸杞硒多糖对HepG2细胞均有一定的抑制作用,所有枸杞硒多糖的抑制作用明显优于枸杞多糖,并且硒含量最高的Se-LBP₄组对肿瘤细胞HepG2的抑制效果最佳,抑制率为38.15%。枸杞硒多糖抑制HepG2增殖能力与其硒的含量呈正相关,有望作为食品、保健食品和医药的原料进一步开发。     

啤酒花多糖的提取及脱蛋白工艺研究

以超临界液态二氧化碳萃取后的啤酒花残渣为原料,采用正交实验和单因素实验,确定了啤酒花多糖的热水微波辅助萃取的最佳工艺条件:提取时间2h,料液比1∶10,提取温度90℃,微波功率750W作用时间12min;此条件下多糖提取率为2.76%。对得到的粗多糖,以蛋白脱除率和多糖保留率为指标,在比较Sevag法,盐酸-正丁醇法,三氯乙酸-正丁醇法,木瓜/菠萝蛋白酶法对粗多糖中蛋白质的脱除效果的基础上,考察了酶法和化学法联用脱蛋白工艺,并最终确定菠萝蛋白酶-三氯乙酸-正丁醇的脱蛋白效果最好,最佳条件为温度45℃,酶解时间0.5h,酶添加量22.5U/mL,pH5.5,三氯乙酸-正丁醇法除蛋白1次,蛋白脱除率和多糖保留率分别为86.77%和77.37%;而木瓜蛋白酶-盐酸-正丁醇的脱蛋白工艺在有效脱除蛋白质的同时,多糖损失最少,最佳条件为温度55℃,酶解时间0.5h,酶添加量36U/mL,pH5.5,盐酸-正丁醇法除蛋白1次,蛋白脱除率和多糖保留率分别为77.37%和84.43%。     

薄层色谱法和气相色谱法分析2种侧耳多糖的单糖组成

目的分析阿魏菇和杏鲍菇2种侧耳多糖的单糖组成。方法阿魏菇多糖和杏鲍菇多糖经完全酸水解后,用薄层色谱法(thin layer chromatography,TLC)和气相色谱法(gas chromatography,GC)分析样品的单糖组成,并测定各单糖的摩尔比例。结果 TLC法和GC法均检测出阿魏菇多糖和杏鲍菇多糖含有阿拉伯糖(Ara)、甘露糖(Man)、葡萄糖(Glc)和半乳糖(Gal)单糖组分,GC法测得阿魏菇多糖和杏鲍菇多糖中各单糖的摩尔比(Ara:Man:Glc:Gal)分别为1.00:1.75:11.79:2.22和1.00:4.53:1.92:2.24。结论阿魏菇多糖和杏鲍菇多糖的单糖组成类似,但二者的各单糖摩尔比例有差异,TLC和GC法适用于分析阿魏菇和杏鲍菇多糖的单糖组成。     

枸杞多糖的研究及其进展

枸杞多糖是枸杞的一种主要活性成分，具有多种药理作用和生物活性功能，是目前的一个研究热点。对枸杞中多糖的提取、精制、定性定量纯度检测方法、结构研究以及生理活性等多方面进行综述，并展望了枸杞多糖的发展前景和趋势。