谷氨酸发酵生产菌的研究与开发

L-谷氨酸微生物工业化发酵生产已有50余年历史,回顾国内各味精厂曾使用过的菌种,主要是1．天津短杆菌：2．钝齿棒杆菌;3．北京棒杆菌及它们的突变株．．目前厂家用葡萄糖发酵所使用的菌种主要为天津短杆菌T613的突变株,有FM820：FM84—415：FM-1至UFM-20;S9114等上述生产菌种,主要是通过诱变为主的微生物育种而获得,它的产酸能力伴随着谷氨酸发酵生产发展获得了很大的提高。但如果在现有产酸能力情况下．继续采用经典微生物育种技术（如诱变、细胞融合等手段）选育芮种,以期达到大幅度提高产酸率和糖酸转化率已相当困难。因此,采用现代基因工程手段改造菌种,从而提高产酸率和糖酸转化率不失为目前最有效的方法。     

谷氨酸发酵生产菌的研究与开发

L-谷氨酸微生物工业化发酵生产已有50余年历史,回顾国内各味精厂曾使用过的菌种,主要是1.天津短杆菌;2.钝齿棒杆菌;3.北京棒杆菌及它们的突变株。[1]目前厂家用葡萄糖发酵所使用的菌种主要为天津短杆菌T613的突变株,     

L-谷氨酸生产菌的选育及其发酵条件的研究

采用黄色短杆菌（Brevibacterium flavum)T1为始发菌株，根据代谢控制发酵原理，利用紫外线、硫酸二乙酯进行诱变，定向选育出具有寡霉素抗性、谷氨酸氧肟酸盐抗性的温度敏感突变株TM106。然后，以温度敏感突变株TM106和产酸率高（10．5％以上）的天津短杆TG961为亲株。通过原生质体融合技术，成功地选育出了产酸率高的融合子CM021，并且该菌株系温度敏感型菌株，可用于谷氨酸强制发酵。在摇瓶条件下，产酸达13.6g/dI；在6m^3发酵罐上进行中试，产酸达14．6g/dI，转化率达62％。     

L-谷氨酸温度敏感突变株的细胞融合育种及发酵条件

以黄色短杆菌为出发菌株，定向选育出具有寡霉素抗性、谷氨酸氧肟酸盐抗性的温度敏感突变株TMGO106，将其与产酸率高(10．5％)的天津短杆菌融合，得到融合子CM 1021，此菌株系温度敏感突变株，可用于谷氨酸强制发酵。经培养及发酵条件优化，在6m^3发酵罐上发酵32h，谷氨酸产率达14．6％，糖酸转化率达62．8％，达到国际先进水平。     

浅谈棒杆菌的谷氨酸分泌机理

在近半个世纪前的1957年，日本的Dr．S．Udeka和Dr．S．Kinoshita发现谷氨酸棒杆菌及其泄漏谷氨酸的独到特性以来，基于这个原始发现选育出的许多该细菌的突变株已经应用到发酵法生产L-谷氨酸，并达到了500m^3的工业发酵生产规模。尽管谷氨酸发酵生产已有40多年的历史以及多年对谷氨酸菌的详细研究，但是对于棒杆菌的谷氨酸分泌机理仍然未能完全阐明清楚。     

谷氨酸高产菌GDK-9的定向选育及其发酵过程研究

以天津短杆菌GDK6为出发菌株,通过原生质体紫外诱变、紫外诱变和硫酸二乙酯(DES)诱变定向选育L-谷氨酸生产菌。经摇管初筛、摇瓶复筛、遗传标记验证、单菌落分离和连续传代,最终筛选出1株L-谷氨酸高产菌GDK-9。该菌株在未优化条件下摇瓶发酵42h产L-谷氨酸79.2g/L。另外,试验结果证实GDK-9菌株的遗传标记和产酸能力十分稳定。在优化条件下,通过7L罐发酵32h,谷氨酸产量达131.5g/L,糖酸转化率达到62.2%。     

谷氨酰胺高产菌株的选育

本研究以产生谷氨酸的黄色短杆菌为出发菌株,经ＮＴＧ诱变,筛选出抗ＳＧ的高产谷氨酰胺菌株,摇瓶试验结果表明：突变株Ｂ．Ｆ３６６产谷氨酰胺５．８３％,发酵周期４２ｈ,副产物谷氨酸极少,是较为理想的生产谷氨酸胺的优良菌种。     

5’—肌苷酸生产菌的选育及其发酵的初步研究

本文对5'-肌苷酸产生菌的选育及发酵条件对产酸的影响作了研究。 以谷氨酸棒杆菌265为出发菌,利用紫外线硫酸二乙酯以及亚硝基胍等常规诱变手段进行了反复诱变。在此基础上,又采用原生质体诱变的新技术,最后获得一株突变株519,在最佳发酵条件下积累肌苷酸量达7g/L,比原菌株提高了2倍。 本文还对影响发酵产酸的各种因素进行了研究,主要包括种子培养基和发酵培养基、pH值、种龄、接种量、通风量、温度以及添加某些成分等对发酵产酸的影响,并就其中某些因素的影响从理论上进行了探讨。     

提高谷氨酸菌种产酸的措施

味精是人们普遍喜爱的调味品,不但鲜味强烈,而且能调节人体生理功能,具有良好的保健功能与促进生长发育的作用,所以也是目前产量最大的调味品。味精生产的关键工序在发酵,其水平的高低直接影响到企业的经济效益,而发酵高产的首要条件是菌种,所以各单位领导都十分重视,想方设法提高菌种的产酸水平。１　优良菌种目前谷氨酸生产上使用的菌种有Ｂ９、Ｔ６１３,７３３８,ＦＭ４１５及经诱变处理的突变株。这些菌种都有各自的优点,在生产上发挥了良好的性能,使发酵水平逐步提高,生产成本不断降低,创造了良好的经济效益。然而,…     

谷氨酸温度敏感型菌株CN1021的原生质体融合育种

本文以温度敏感型突变株 TMG0106和产酸高的天津短杆菌TG961为亲株,通过原生质体融合技术,成功地选育出了产酸率高的融合子CN1021,并且该菌株系温度敏感型菌株,可用于谷氨酸强制发酵.     

原生质体融合技术在L-谷氨酸菌株育种中的应用

本文阐述了原生质体融合技术在L-谷氨酸高产菌诱变育种中的应用方法和步骤,选育得到温敏型谷氨酸菌种产酸153g／L的菌株FM00—189。     

提高及稳定谷氨酸产生菌TH－89产酸率的研究

为了进一步提高与稳定谷氨酸产生菌ＴＨ－８９的产酸率，以谷氨酸棒杆菌ＴＨ－８９为亲株，利用紫外线（ＵＶ）、硫酸二乙酯（ＤＥＳ）进行复合诱变和定向选育（耐高糖、耐高谷氨酸、以琥珀酸为唯一碳源），最终获得一突变菌株ＺＨ－１２．当初糖浓度为１６％时，该菌摇瓶小试平均产酸率和平均转化率分别达９．８５％和６２．２％，而最高产酸率和转化率分别达１０．９％和６９％。     

L—谷氨酸发酵的研究

采用乳糖发酵短杆菌（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌａｃｔｏｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）Ｌ－谷氨酸产生菌ＺＱ－１，进行３０ｍ＾３发酵罐Ｌ－谷氨酸一次性中糖发酵工业化试生产，连续５罐发酵平均产酸率为６．７５％，转化率为４８．３％。     

L-组氨酸产生菌株的选育

以谷氨酸棒杆菌 (Corynebacteriumglutamicum)ATCC1376 1为出发菌株 ,利用硫酸二乙酯和亚硝酸选育 3 氨基 1,2 ,4 三氮唑和组氨酸甲酯抗性突变株 ,但组氨酸没有得到大量的积累。选育出能在D 葡萄糖酸基本培养基上生长的突变株D 18,D 4 0 ,D 74 ,D 79,发酵 3d产酸达 1 0～ 1 6g/L。     

提高及稳定谷氨酸产生菌TH—89产酸率的研究

为了进一步提高与稳定谷氨酸产生菌ＴＨ－８９的产酸率，以谷氨酸棒杆菌ＴＨ－８９为亲株，利用柴外线（ＵＶ）、硫酸二乙酯（ＤＥＳ）进行复合诱变和定向选育（耐高糖、耐高谷氨酸、以琥珀酸为唯一碳源），最终获得一突变菌株ＺＨ－１２。当初糖浓度为１６％时，该菌摇瓶小试平均产酸率和平均转化率分别达９．８５％和６２．２％，而最高产酸率和转化率分别达１０．９％和６９％。     

谷氨酸生产菌T_6-13抗噬菌体菌株BM91-1的选育

谷氨酸生产菌株T_6-13经紫外线诱变获得抗6株噬菌体突变株BM91—1,其产酸能力达4.66g/dl,与原生产菌株水平近似。该菌株具抗噬菌体突变株的所有特征。     

提高谷氨酸发酵产酸率的途径

提高谷氨酸发酵产酸率的途径很多，可以在选育菌种上入手，也可以在改进培养基配方、研究发酵工艺条件上做文章。本文仅从技术管理角度，就当前谷氨酸发酵生产中往往容易被生产管……     

从土壤中分离L-色氨酸生产菌株及其高产诱变选育的研究

根据微生物菌株生物合成L-色氨酸代谢途径的特性,设计了产色氨酸的细菌选择性分离筛选培养基,对从土壤中分离得到的832株细菌通过初筛和复筛,筛选到6株L-色氨酸产生菌株,并对其进行了初步分类鉴定,确定了这6株菌均为为谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutanicum)。其中1株可产L-色氨酸0.85g/L,进一步通过NTG以及紫外线照射多重诱变育种得到苯丙氨酸和酪氨酸双重营养缺陷型与多种色氨酸结构类似物抗性突变株,遗传性状稳定,产酸量达到10.82g/L。     

谷氨酸高产菌株的选育和应用

在利用微生物发酵生产中，不论其生产工艺怎样，归根结底是由微生物的新陈代谢活动来完成的。谷氨酸发酵生产也不例外，因此，谷氨酸生产中菌种的优劣决定了其生产的好坏。但在工业生产中，随着谷氨酸菌种传代次数和增加，培养条件的改变等，在生产上应用的高产优良菌株也会出现衰退，表现为生产性能(产谷氨酸量)的降低，     

稀土元素对谷氨酸发酵产酸及其谷氨酸脱氢酶的影响

以目前我国谷氨酸发酵广泛使用的谷氨酸棒杆菌S9114 为实验菌株 ,研究了稀土元素对谷氨酸发酵产酸及其谷氨酸脱氢酶的影响。结果表明LaCl3、CeCl3和NdCl3浓度分别为 0 72 0、0 0 71和 0 0 0 7mmol/L时 ,促使谷氨酸发酵产酸水平提高 6%～ 8% ,对菌体的GDH NADPH的酶活性有显著的激活作用。实验还表明 ,稀土元素对纯化GDH NADPH的活性也有一定的调节作用