生香酵母的培养方法及在白酒生产中的应用

文章介绍了生香酵母的培养方法，探讨了影响生香酵母细胞数和出芽率的主要因素，对其增殖方式也进行了研讨，并简要介绍了生香酵母在白酒生产中的应用。     

通过测定胞外腺苷酸激酶活性确定酵母自溶

我们研制了一种可以监控酵母泥细胞渗透性和自溶的方法。腺苷酸激酶(AK；EC2．7．4．3，ATP：AMP磷酸转移酶)可催化反应：2ADP←→ATP AMP。这个反应生成的ATP可利用精确的荧光素酶反应进行测定。AK是一种胞内酶。健康的细胞并不分泌或排泄。它可被视为自溶的标志。这种实验可检测单一酵母细胞的AK含量，技能范围超过50，稀释样品的技能范围还可以加大。我们应用欧洲和非洲的几个啤酒厂酵母培养方法，发现酵母贮存时间、温度和酵母的生理状态有一定的关系。健康的酵母细胞胞外的AK活性较低(通常小于60AK单位)；衰老或贮存条件恶劣的酵母向啤酒中释放较多的AK。衰老的细胞可达到500单位AK，贮存不当的酵母可达3000至6000单位不等。这种新方法可监控酵母的渗漏和自溶，帮助酿酒师探寻最优的啤酒泡沫质量和酵母活力。     

发酵过程中酵母菌细胞循环与啤酒质量的关系

酵母菌细胞循环分为四个阶段，分别为G0/G1、S、G2和M阶段，在这四个阶段中，G1阶段是最重要的，因为酵母细胞在这个阶段要为出芽做许多必不可少的准备。因此，通过分析G1阶段发生的生物化学反应，将更有利于发酵性能的精确控制。然而，由于缺少对单个细胞中DNA和RNA同时进行监控的方法，还不能对G1阶段细胞内部发生的转换进行详细研究。为了解决这个问题，我们通过对用于哺乳动物细胞中的DNA和RNA进行双重染色方法的改进。已发展了一种对酵母细胞中DNA和RNA进行双重染色的新方法。在含有EDTA的酸性环境下，用吖啶橙对酵母细胞中DNA和RNA进行染色。这样，用一台流动血细胞计数器就可以测定出酵母细胞中DNA和RNA的含量。借助于这种方法，我们发现了G1阶段中DNA和RNA数量上的变化．RNA的合成先于DNA的合成，这与酵母的出芽繁殖相符合。G1阶段中DNA／RNA的合成与发酵性能和啤酒质量存在相关性。值得关注的是首次芽殖之前DNA／RNA的合成对成品啤酒质量有着明显的影响。     

纳米级微生物细胞破碎机在酱油生产中的应用

对纳米级微生物细胞破碎机及其在酱油生产中的应用研究，对该机工作原理、结构、技术参数、操作方法、破碎效果及其在酱油生产中的应用作了介绍。该机制取酵母抽提物，酵母破碎率达97．8％，氨基酸态氮含量达6．04％。将其入醪发酵生产，提高酱油风味，产品符合GB18186-2000酱油质量标准。     

固定化酵母细胞在鼠曲草啤酒中的应用

探讨了固定化啤酒酵母在鼠曲草啤酒中的应用，采用正交试验确定了固定化酵母的最佳条件和鼠曲草啤酒的发酵工艺条件。固定化酵母细胞的最佳条件为海藻酸钠浓度为6％，氯化钙浓度为0．5％，固化时间为1h；鼠曲草啤酒的发酵工艺为主发酵前添加3．0％的鼠曲草提取液，发酵时间为8d。     

对酵母细胞酶法破壁的研究

研究了在重组酵母测评系统中，重组酵母细胞破壁条件的优化问题。通过酶法破壁酵母细胞得知，对于0．75mL酵母液来说，最佳反应时间为4h，最适反应温度为40℃，最佳酶量为10mg。同时，蜗牛酶破壁效果明显好于溶菌酶。     

啤酒酵母细胞活性检测的新方法——细胞分析仪法

提出了一种新的检测啤酒酵母细胞活性的方法———细胞分析仪检测法。通过这种方法 ,研究了啤酒酵母自溶对酵母细胞活性的影响 ,以及高低温贮存时酵母细胞活性的变化情况。结果表明 ,低温贮存较高温条件贮存细胞活性下降幅度小。另外 ,还对不同代数酵母在发酵过程中的细胞活性进行了跟踪测定与比较分析 ,指出了啤酒发酵过程中酵母细胞活性的变化趋势 ,同时发现酵母的细胞活性影响啤酒中双乙酰的还原。     

海藻酸钙固定水生假丝酵母生产耐酸性α-淀粉酶

介绍了以海藻酸钙为载体，对水生假丝酵母进行包埋固定处理，并利用这种固定化细胞生产酸性α-淀粉酶的方法。实验表征了固定化过程的工艺条件对海藻酸钙固定化水生假丝酵母细胞的结构、机械强度和产酶性能的影响，确定了最优的工艺条件为：在30％条件下，将2．8％海藻酸钠、0．6％的菌体的混合液体，通过注射器缓慢注入4％CACl2溶液中固定4h。这种固定化细胞的产酶能力为70．24U／mL，比游离细胞高9．45倍。     

酿酒酵母细胞固定化研究

初步研究了海藻酸钙固定化技术在酿酒酵母上的应用。分析在不同条件下固定化酵母的发酵性能、机械强度，并对固定化酵母与游离酵母的发酵力进行了分析。结果表明，酵母细胞固定化后，其使用寿命、发酵周期均有大幅度提高。海藻酸钠的浓度3％，氯化钙浓度为2．0mol／L，固定化温度20℃，酵母细胞的固定化效果最为理想。     

评估酵母活性方法的综合研究

本文对评估酵母活性的方法进行了研究。主要分成三类，即细胞染色法，细胞培养法和细胞生理状况测定法。文中详细阐述了细胞生理状况测定法中的肝糖含量测定法、蛋白酶A法、胞内pH法、累加的酸化力测定法，为研究酵母活性的细微区别提供了合理、精确、简捷的方法。     

固定化生长酵母桔子酒发酵的研究

本文研究了固定化生长酵母细胞在桔子酒发酵中的生产特性，初步探索了搅拌罐反应器用于固定化生长酵母细胞桔子酒连续发酵的可行性。     

固定化多菌种发酵苦瓜酒的研究

以苦瓜为主要原料，采用固定化酿酒酵母和产香酵母酿造苦瓜酒。对游离细胞与固定化细胞的分批发酵和连续发酵的动力学进行了研究，并建立了相应的发酵动力学方程。结果表明，酿酒酵母和产香酵母2种菌种菌量的最佳配比为4：1，发酵温度25℃，共固定化细胞分批发酵和连续发酵凝胶粒的充填系数分别为0．25和0．5，游离混合细胞的发酵时间为7d，共固定化细胞连续发酵稀释速率0．12／h，其发酵时间为0．5d左右。经60批次连续发酵实验，固定化细胞粒子的机械强度良好．     

胞内pH法评价酵母活性的研究

酵母细胞内pH与酵母生长和发酵状况密切相关，用胞内质子的释放能力可以衡量酵母细胞的生理状态。为了测定质子在酵母生理条件下的释放能力．在较低pH下，利用荧光法来测量胞内pH，简称ICP法。通过发酵试验证明，ICP法对于准确地评估啤酒生产过程中酵母细胞活性的细微区别，是非常有效的。     

酵母细胞的高效转化方法

运用醋酸锂处理酵母细胞，建立并优化了酵母完整细胞的高效质粒转化体系，转化率达１０４μｇ－１．通过对影响转化的诸因子的研究，发现载运ＤＮＡ是影响酵母完整细胞转化效率的最主要因素，热休克处理及处理时间、聚乙二醇相对分子质量及浓度等对转化率也有显著影响。     

固定化多菌种发酵海藻酒的研究

采用PVA固定化酿酒酵母和产香酵母发酵海带，酿造海藻酒。对游离细胞与固定化细胞的分批发酵和连续发酵的动力学进行了研究并建立了相应的发酵动力学方程。实验结果表明：酿酒酵母和产香酵母最佳配比为4：1，发酵温度20℃，固定化细胞分批发酵和连续发酵凝胶粒的充填系数分别为0．25和0．5，游离混合细胞的发酵时间为7d，固定化细胞连续发酵稀释速率0．12/h，发酵时间为0．5d左右。经160d连续发酵实验，PVA固定化细胞粒子的机械强度良好。     

预充氧时Lager和Ale酵母的氧需求

适量的氧供给对酵母增殖及其发酵性能是很重要的，因为氧是合成甾醇和不饱和脂肪酸的关键。替代麦汁充氧的是预充氧技术，也就是在发酵前将酵母细胞直接处于氧环境的处理方法。本文介绍的是两种lager和六株ale酵母菌株预充氧反应的研究结果，酵母细胞的预充氧在一个膜环路反应器中进行。尽管每株菌株的反应不同，但获得的数据是成功的，不同菌株的甾醇和不饱和脂肪酸的累积变化显著。预充氧期间，检测的甾醇浓度可增加1．5～4倍，不饱和脂肪酸的浓度可增加1．5～6倍。其中七株预充氧的酵母发酵性能良好，一株ale酵母的预充氧未能使其发酵条件最优化。同未经充氧处理的酵母细胞相比，预充氧酵母发酵的酯类和高级醇明显较高。该实验结果表明，预充氧技术替代麦汁充氧是相当有希望和值得进一步实验的。     

以玉米芯为原料发酵生产富含虾青素的饲料酵母

玉米芯是一种资源丰富的农副产品。采用氨水、稀酸、稀碱处理玉米芯，再用纤维素酶-木聚糖酶复合酶系可将玉米芯水解生成可发酵性糖类，然后以法夫酵母作为茵种发酵来生产饲料酵母，从而获得了含有虾青素的饲料酵母，大大强化饲料酵母的营养，提高了酵母的价值。实验结果表明，8％的氨水和4％的氢氧化钠处理玉米芯，所得还原糖效率都较好；不同的初始糖浓度对酵母生长具有不同的影响，2％的糖浓度有利于菌体的生长和虾青素的合成；酵母可能利用多种氮源进行生长，蛋白胨、鱼粉等有机氮有利于细胞的生长；[Goucose]／[Ammonium suhte]=0．7时细胞干重有较大值，而虾青素的浓度却在[Goucose]／[Ammonium sul—fate]=2时有较大值，为2．46mg,／L。5升罐上间歇培养中，最终细胞干重为3．3g／L，虾青素产率2．7ms／L。     

生物工程技术在苹果酸-乳酸发酵中的应用

苹果酸－乳酸酵母是葡萄酒中的苹果酸在乳酸菌的作用下转变为乳酸和CO2的过程，它有利于葡萄酒质量的提高。介绍了生物反应器和采用基因工程方法构建的苹果酸－乳酸酵母进行葡萄酒生物降酸的技术。（1）游离生物反应器。使用细胞循环式发酵以在到高细胞生物量；或控制连续发酵；（2）固定化细胞，有包埋法和吸附法。（3）固定化酶技术。（4）苹果酸－乳酸酵母的应用。构建的苹果酸－乳酸酵母能在7d内将苹果酸转为乳酸，并具有良好的酿酒特性。（津京）     

固定化酵母在啤酒发酵上的应用

目前，固定化酵母在啤酒发酵上的应用的研究方兴未艾．该项技术是建立在固定化酵母、生物反应器的设计、食品工业卫生控制以及各种风味物革取技术迅速发展的基础之上的。固定化酵母技术的优点在于它能将原来分批发酵法啤酒生产改进为连续发酵，从而大大提高了生产能力，并能较容易地改变生产工艺使产品质量达到均一。从最新的资料上看，啤酒生产的主发酵与后熟可从原来的两至三周缩至一天。首先介绍一下酵母的固定化材料和生物反应器，最简便的方法并无固定化材料，它利用酵母细胞自身具有的凝聚特性将酵母细胞装载于反应器中，尽管这种装置…     

冷冻面团中酵母的抗冻性及抗冻酵母的研究进展

随着烘焙工业中冷冻面团技术的引进和迅速发展．酵母的抗冻性作为冷冻面团的一个主要影响因素,也应引起关注。文章综述了对冷冻面团中酵母抗冻性的研究进展,从物理和生物学的角度分析了温度变化对酵母抗冻性的影响,冷冻过程中介质中和细胞内部冰晶的形成是造成细胞损伤的主要物理因素。探讨了抗冻酵母的选育和培育方法,如调整培养条件选育抗冻酵母、生物技术培育抗冻酵母等。总之,要想得到真正的抗冻酵母,就要从酵母冷冻过程中的变化和抗冻机理研究,为抗冻酵母的工业生产提供理论指导。