使用SPR生物传感器快速检测大肠杆菌E.Coli 0157∶H7

利用大肠杆菌抗体的免疫吸附反应,使用集成化手持式 SpreetaTM SPR传感器快速检测大肠杆菌E.Coli 0157∶H7,采用亲和素 生物素系统放大检测的响应信号,并引入复合抗体作为二次抗体,使该传感器对大肠杆菌的检测限由106cfu/mL下降到105cfu/mL。     

利用胶体金复合抗体提高SPR生物传感器的微生物检测精度

使用集成化手持式SpreetaTMSPR传感器快速检测大肠杆菌,将亲和素生物素系统用于SPR免疫传感器以保证检测的准确性。利用大肠杆菌抗体的免疫吸附反应,采用一次抗体抗原二次抗体的夹心式方法增加质量,扩大检测大肠杆菌的信号。引入胶体金复合抗体作为二次抗体大幅度增加质量,进一步扩大了检测信号。同时延长胶体金复合抗体与微生物的结合过程,使检测信号进一步稳定与放大,从而显著提高了检测精度,使该传感器对大肠杆菌的检测精度由106cfu/mL提高到101cfu/mL。     

乳化法制备两歧双歧杆菌微胶囊

以两歧双歧杆菌BB01和BB28为试验菌株,活茵数及包埋产率为指标,研究了海藻酸钠浓度、CaCI：浓度、乳化时间及固定化时间对乳化法制备两歧双歧杆菌微胶囊的影响．结果表明：当两歧双歧杆菌BB01微胶囊制备的条件分别为海藻酸钠浓度2％、CaCl2浓度1％、乳化时间10min、固定化时间15min时,对应的活菌数分别为4．9×10^9cfu／mL、3．06×10^9cfu／mL、2．47×10^9cfu／mL和4．37×10^9cfu／mL,包埋产率分别为80％、56．7％、40．9％和54．1％;当两歧双歧杆菌BB28微胶囊制备的条件分别为海藻酸钠浓度2．5oA、CaCl。浓度1％、乳化时间15min、固定化时间15min时,对应的活菌数分别为4．0×10^9cfu／mL、41×10^9cfu／mL、1．59×10^9cfu／mL和5．55×10^9cfu／mL,包埋产率分别为80％、92％、87％和76．1％．     

兔肉发酵火腿的研制

以兔腿肉为原料,经腌制、发酵,采用L9（3）^4正交试验,研制兔肉发酵火腿,测定其pH值、游离氨基酸和三甲胺-氮含量,建立发酵菌株的最佳组合。结果表明当菌株L26、C18、Y163之间的比例为3：3：2,接种量为3×10^7cfu／g、3×10^7cfu／g、2×10^7cfu／g,发酵温度30～35℃时,火腿中的游离氨基酸含量高,品质最好。     

脱脂乳对L.bulgaricus和S.thermophilus生长的影响

将保加利亚乳杆菌(L.bulgaricus,LB)和嗜热乳链球菌(S.thermophilus,ST)分别接种于不同浓度的脱脂乳中培养,检测两菌株在生长过程中酸度、pH值、活菌数的变化。结果表明:20％脱脂乳培养基对两菌株的生长都有一定的促进作用,二者在20％和14％脱脂乳中生长时,最终的活菌数分别为LB(2.0×10~9cfu./mL,6.0×10~8cfu./mL)和ST(2.2×10~9cfu./mL,7.2×10~8cfu./mL)。     

食品中大肠杆菌O157:H7的选择性培养与检测方法研究

为检测食品中的大肠杆菌O157:H7,初步研究了此菌在选择性培养基SMAC、CR-SMAC上的菌落形态,并结合大肠杆菌O157:H7的生理生化特性以及血清学凝集实验对其做了进一步检测,建立了对大肠杆菌O157:H7的选择性培养检测方法.用此法对模拟牛奶样品进行检测,判断检出限为4 cfu/mL.     

双歧杆菌与酸奶菌的混合发酵中菌种配比的研究

选用耐氧驯化过的双歧杆菌分别与不同来源的酸奶菌种进行混合发酵。比较了不同接种量对制作的发酵乳在保存期内所含双歧杆菌活菌的影响。实验表明：在双歧杆菌接种量不大（体积分数2％）的情况下,可在发酵乳中获得可观的双岐杆菌。在10天内,双歧杆菌活菌数达10^8cfu/mL,随着时间的延长,至15天,双歧杆菌活菌数仍可达10^7-8cfu/mL。     

优化感受态细胞制备方法提高转化效率的研究

通过研究不同生长状态、处理溶液、保存时间及热激时间对感受态细胞制备的影响,分析了影响大肠杆菌株JM109和DH5α感受态细胞形成因素,优化了制备感受态细胞的方法。结果表明,OD600为0.43的大肠杆菌菌液经处理液（20 mmol/L MgCl2＋80 mmol/L CaCl2）处理,-85℃放置12～14 h,42℃热激处理90 s,转化效率最高,可达5.5×10^5～6×10^5 cfu/μg DNA（pSilencer2.1-U6-neo）,随着质粒放置时间增加,转化效率下降。     

基于自组装及纳米磁球放大的大肠杆菌 O157:H7的压电免疫检测

应用压电免疫传感器快速检测了大肠杆菌O157:H7(E. coli O157:H7).将巯基乙酸(MACA)自组装在AT切向的压电金电极上,以N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)为反应介质,形成酰氨键固定大肠杆菌抗体.并通过α-甲基丙烯酸(MAA)把抗体修饰在纳米磁球上,采用夹心法将抗原夹在两个抗体间,压电石英晶体交流阻抗(PQCI)和循环伏安法对修饰过程进行了表征,抗原浓度与形成夹心复合物前后的PQCI振动频移相关.其免疫传感器能在3h内检测2×103～8×108 CFU/mL范围内的目标细菌,106CFU/mL情况下重复性实验的RSD在7%以下.     

液晶传感竞争免疫法检测天蚕素B

制备了一种基于液晶取向变化的非标记液晶型免疫传感器,并结合竞争免疫反应原理,将其用于天蚕素B检测.首先采用硅烷化试剂3-氨丙基三乙氧基硅烷/二甲基十八烷基[3-(三甲氧基硅基)丙基]氯化铵(APTES/DMOAP)混合自组装构建可诱导液晶分子呈均一垂直排列的基底敏感膜,再通过戊二醛交联法将天蚕素B固定到基底表面,当天蚕素B抗体与天蚕素B特异性结合后扰乱了液晶分子的取向,使液晶膜的颜色和亮度发生变化,并通过计算偏光显微镜成像灰度强度,可在0.01~0.1ng/mL范围内定量化分析天蚕素B浓度.结果表明,固定化天蚕素B浓度为150ng/mL,天蚕素B抗体浓度为500ng/mL时,天蚕素B检测限可达0.01ng/mL.本方法具有灵敏度高、特异性好、非标记和操作简单等优点.