基于Nafion和纳米金及明胶修饰的电位型高灵敏IgG免疫传感器的研究

利用滴涂于铂盘表面的Nafion膜中负电性的磺酸基与anti-IgG分子中的氨基阳离子之间的静电作用实现抗体的结合,同时通过负电性的纳米金增加抗体的固定量,最后在修饰电极的表面涂敷一层明胶(Gelatin)薄膜进行固定,制成Gelatin/anti-IgG/Au/Nafion/Pt膜,制得非标记免疫传感器.用循环伏安法(CV)和交流阻抗法(Nyquist)对电极逐层修饰过程进行了表征,并对免疫传感器的性能进行了研究.该传感器测定IgG的最低浓度为2.0 μg/L,标准曲线的线性范围在5～960μg/L,回归方程为:△E=-2.2 31.7log[IgG],响应时间为5 min.此传感器制备过程简单、稳定性好、灵敏度高、具有良好的选择性,用于生物样品分析,结果令人满意.     

一种基于纳米金／石墨烯／普鲁士蓝（PB）修饰玻碳电极非标记免疫传感器

采用电聚合的方法将普鲁士蓝（PBl聚合在玻碳电极表面,再将石墨烯修饰在PB上面,然后再采用电沉积的方法将HAuCL直接还原成纳米金粒子,沉积在石墨烯表面,最后将羊抗人IgG抗体直接固定于该修饰的玻碳电极表面,制备了用于人IgG抗原检测的非标记电化学免疫传感器。利用循环伏安法和交流阻抗研究了修饰电极表面的电化学特性,用差分脉冲伏安法对人IgG抗原进行了测定。实验表明,此免疫传感器在含不同浓度人IgG的PBS溶液（pH6．98）中测定,响应电流与人IgG浓度在5．55～455．5ng／mL范围内有良好的线性关系,其相关系数r=0．9926,检测限为0．015ng／mL（S／N=3）。该免疫传感器具有制备简单、响应时间快（5min）、稳定性好等特点。     

基于对羟基苯硫酚自组膜免疫传感器的研究

利用自组装技术将对羟基苯硫酚(4—HTH)固定在金片电极上,以1—乙基—3—(3—二甲氨基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N—羟基硫代琥珀亚胺(NHS)作为活化剂,将羊抗—小鼠IgG以共价键形式固定在对羟基苯硫酚自组装单分子膜修饰的金片电极上,制备了一种免疫传感器。根据抗体与抗原之间特异反应前后引起的电极电位变化,对小鼠IgG进行定量测定。利用循环伏安法分别对裸金片电极、对羟基苯硫酚自组装膜、抗体膜、抗原膜进行了表征。结果表明:该免疫传感器灵敏度高、响应速度快、检测范围宽,其检测下限为0.2μg/L,检测范围为0.2~30μg/L,并可以再生、重复利用,寿命可达10 d左右     

基于Nation／双层L-半胱氨酸-纳米金固定辣根过氧化氢酶的生物传感器

利用滴涂于金盘电极表面的Nation膜中负电性的磺酸基与L-半胱氨酸阳离子之间的静电作用实现L-半胱氨酸的固定化，然后利用L-半胱氨酸表面的巯基吸附纳米金，荷负电的纳米金再结合L-半胱氨酸阳离子后再吸附纳米金以制备基于多层分子自组装的辣根过氧化氢生物传感器。采用循环伏安法考察了传感器的电化学特性，用Co（bpy）3^3^＋作为电子媒介体，峰电流值与H2O2浓度在2．5×10^-5～5．0×10^-3mol／L成线性关系，检测下限为1.0×10^-5mol／L（S／N=3）。该传感器具有响应快、灵敏度高、稳定性好的性能，且具有良好的选择性，能有效排除抗坏血酸、抗尿酸等常见干扰物质对测定的影响。     

基于巯基化合物和纳米金自组装技术固定化方法的研究

该文提出了一种压电免疫传感器新的蛋白的固定化方法.先在压电石英晶体电极表面自组装半胱氨酸,再通过纳米金与氨基的共价键合作用,在巯基自组装膜的氨基表面形成一均匀的纳米金单层膜,实现蛋白质分子(抗IgG)在传感器表面的固定.探讨了半胱氨酸自组装及IgG抗体固定等一系列实验条件及参数对传感器性能的影响.传感器的频率响应和IgG的浓度在0.33～98.91μg/mL范围内具有良好的线性关系.在0.5 mol/LNaCl+0.01 mol/L NaOH溶液中,蛋白质层可容易地被洗脱,使免疫传感器获得再生.     

碳纳米管组装电化学免疫传感器测定IgG抗体的研究

应用吸附法将IgG抗原固定于多壁碳纳米管修饰的玻碳电极表面,制备用于IgG抗体检测的电化学免疫传感器。以辣根过氧化物酶为标记物,对苯二酚为底物,利用辣根过氧化物酶标记IgG抗体与待测IgG抗体竞争电极表面固定的IgG抗原,建立了免疫竞争法检测IgG抗体的高灵敏度电化学分析方法。碳纳米管的大比表面积和电化学催化作用,提高了分子识别物质的固定量和电化学检测的灵敏度。工作电位为 0.030 V(vs.SCE)时,响应电流与IgG抗体浓度在0.30~10μg/mL范围内呈良好的线性关系,检出限为0.11μg/mL。     

氢离子敏场效应管酶免疫传感器的研制

介绍了以氢离子敏场效应管为基体电极，以碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶抗体为例，在方法学上实现了电化学测量的一种酶免疫传感器．本生物传感器的响应时间达１８ｓ，标准曲线线性范围为７．８×１０（－２）μｇ／ｍｌ～０．６３μｇ／ｍｌ。另外，还讨论了适宜测量条件、抗体膜的寿命、抗原抗体复合物的寿命、抗原抗体复合物的分离及用不同抗体膜测量的重复性等。     

基于蛋白A-纳米金-丝网印刷电极的雌二醇免疫传感器

将蛋白A固定在纳米金修饰的丝网印刷电极表面,纳米金大的比表面积以及较高的表面自由能使蛋白A比较牢固地固定在其上;蛋白A分子可以定向结合17β-雌二醇抗体的Fc片段,使抗体在电极表面有序固定化。利用17β-雌二醇和酶标17β-雌二醇的酶免疫竞争反应,研制了快速测定17β-雌二醇的电化学传感器。用循环伏安法和扫描电子显微镜对修饰过程进行了表征。优化测定条件后,传感器呈现了很高的测定灵敏度,电流响应信号与17β-雌二醇浓度在0.1μg/L～20μg/L范围内呈良好的负线性相关,检出限为0.035μg/L(S/N=3)。应用该免疫传感器测定了正常人群尿样中17β-雌二醇含量,测定范围与报道的高效液相色谱法测定结果相一致,样品加标回收率为96%～114%。     

基于碳纳米管修饰金电极的多巴胺电化学传感器

利用偶氮胭脂红B（ACB）对多壁碳纳米管（MWNTs）进行非共价修饰,使其具有水分散性,将MWNTs-ACB水分散液滴涂于金电极表面并置于红外灯下烤干,即制得多巴胺（DA）电化学传感器。伏安研究表明：MWNTs—ACB膜对生物小分子DA的电化学氧化具有良好的催化作用。最优的检测条件下,DA的检测线性范围为：1．0×10-6～1．0×10-mol／L,检出限低至5．0×10-7mol／L（S／N=3）。对传感器的性能进行了考察,结果表明：该DA传感器具有良好的稳定性和重现性,灵敏度高,选择性好。将传感器应用于注射液中DA含量的测定,结果令人满意。     

基于铜配合物和抗体包被化学镀纳米金共固定的癌胚抗原安培免疫传感器

研制了基于抗体包被化学镀纳米金(AuNPs)和[Cu (bpy) 2 (ONO)]NO3配合物(CuL）共固定修饰玻碳电极(GCE)的安培免疫传感器,并用于血清中癌胚抗原(CEA)的检测。首先将GCE电极表面氧化形成羧基,进而键合上乙二胺。将此胺化电极浸泡在CuL和化学镀金溶液后, CuL可通过π-π堆积作用吸附到GCE表面,并在电极表面还原成30~50 nm的纳米金层（GCE|CuL/AuNPs）。将上述电极浸泡在CEA抗体(anti CEA)溶液中,利用AuNPs固定anti CEA,并通过辣根过氧化物酶(HRP)封闭剩余的AuNPs位点,由此构建了一类快速检测 CEA的无试剂安培免疫传感器（GCE|CuL-AuNPs /anti CEA-HRP）。由于HRP可以催化CuL和过氧化脲（CP）的氧化还原反应,因此该电极在CP溶液中形成催化还原电流。当该传感器在37 ℃下,含CEA的pH 6.5PBS溶液中温育30 min后,随着温育液中CEA浓度的增加,电极表面形成的免疫复合物也增加,导致CuL 对CP 的催化电流下降。电流下降百分比I%与CEA浓度在0.1~80 ng/mL 成线性关系,检测限为0.052 ng/mL（3σ）。由于采用化学镀法可以方便地在GCE表面制备纳米金膜进而包被抗体,并通过π-π堆积作用吸附CuL作为电子媒介体,故该免疫电极制备简单;采用可催化CP还原的HRP封闭AuNPs层多余位点,大大提高了电极灵敏度,有望用血清中痕量CEA分析。     

压电式免疫传感器检测小鼠IgG气溶胶

为优化压电式免疫传感器用于生物大分子气溶胶的检测效果,采用循环伏安法在石英晶体金电极上先聚合一层聚苯胺膜,然后,聚合一层聚间苯三酚膜,构建了双层聚合物膜,用于固定羊抗小鼠IgG抗体。配合超声雾化法产生生物大分子气溶胶,研制了一种直接气相检测小鼠IgG抗体的谐振式免疫传感器。结果表明:该传感器对小鼠IgG的响应快,检测时间为3m in;在0.42~4.8 g.L-1范围内,具有较好的线性关系;稳定性高,经固定的抗体可以保持活性60 d以上。     

纳米金结合银增强用于质量放大压电免疫传感器的设计

提出了一种基于纳米金结合银增强的质量放大方法以提高压电免疫传感器的灵敏度.通过夹心法将纳米金引入传感器表面后滴加银增强试剂,在纳米金的催化下可使银沉积在传感器上,从而对免疫反应引起的质量变化进行放大.以检测正常人IgG为例,对该方法的可行性作了研究,设计的传感器可在0.3～5μg/mL范围内实现对正常人IgG的定量检测.     

基于纳米金／石墨烯－壳聚糖－离子液体／L－半胱氨酸包覆CdTe量子点的双酚A传感器

在石墨烯、壳聚糖和1-乙基－3－甲基眯唑四氟硼酸盐（[BMIM]）复合材料（Graphene—Chits-[BMIM]）表面电沉积金,并自组装L－半胱氨酸包覆CdTe量子点,制备了修饰玻碳电极新型双酚A传感器。采用循环伏安法和电化学交流阻抗等方法研究了修饰电极的电化学特性。由于Graphene-Chits－[BMIM]复合材料中,石墨烯和[BMIMI都具有良好的导电性,该修饰电极对于双酚A有较好的电流响应。在最佳条件下,该传感器对双酚A的检测浓度范围：5．0×10^-8～7．05×10^-6mol／L,检测限为2．0×10^-8mol／L（3倍信噪比）,相关系数为0．999。     

核酸适体-捕获探针预杂交修饰制备免标记腺苷电化学传感器

核酸适体（Aptamer）是单链寡核苷酸片段,对靶分子具有高亲和力和高特异性,具有常规识别分子（如抗体和酶）所不具备的一些优点,该文基于核酸适体制备了一种用于检测腺苷的免标记电化学传感器。将腺苷的核酸适体与带巯基的捕获探针通过硫-巯键组装到金电极表面,用6-巯基己醇（MCH）作为缺陷探针封闭电极表面,得到的MCH／Aptamer-Capture／Au界面,构筑的电化学传感器对腺苷具有特异性识别功能,检测腺苷的线性范围为1×10-6mol／L～2．5×10-4mol／L,检测限为0．1μmol／L,相对标准偏差（R．S．D）为2．0％。该传感器对腺苷的检测具有灵敏度高、检测范围宽、制作简便、成本低,并且具有良好的选择性和重现性。     

基于Au—Ni复合材料的新型葡萄糖传感器的研究

利用新型Au—Ni复合材料,通过壳聚糖将Au—Ni复合材料修饰到电极表面．制备了一种新型的用于葡萄糖检测的电化学传感器。以XRD表征了Au—Ni材料,以循环伏安法,交流阻抗法,计时电流等电化学方法研究了此传感器的电化学特性。研制的电极对葡萄糖检测的线性范围为2．5×10^-9．5×10^-4mol／L,检测限为lxl0...     

结合PAH聚电解质和纳米金界面的压电免疫传感器研究

提出了一种聚丙烯氯化铵(PAH)-纳米金固定抗体的压电免疫传感器界面的构建方法.先在压电石英晶振的金电极表面自组装一层半胱氨酸单层膜,通过戊二醛交联带大量NH2基的聚电解质PAH,随后在PAH膜表面自组装一层纳米金粒子,以静电吸附作用固定IgG抗体,研制成一种新的压电免疫传感器的界面,用于对相应抗原的检测.研究了PAH浓度及抗体固定化等实验条件的影响,探讨了传感器的主要响应特性与再生性能,并与戊二醛直接固定的传感器的性能进行了比较.结果表明,前者固定的抗体的活性较高,响应频率较大,检测的线性范围较宽,非特异性吸附小,能有效地改善传感器的灵敏度和检测限,而且容易进行传感器的再生.     

适用于鱼肉中氯霉素检测的抗体包被金磁纳米微粒修饰安培免疫传感器研究

研制了基于氯霉素抗体包被Fe3O4/Au金磁纳米微粒(GMP)和三乙撑四胺铜(II)(CuL)共固定修饰平面热解石墨电极的安培免疫传感器(PRG|CuL / anti CAP-GMP),用于测定鱼肉中CAP含量.该免疫传感器是利用外加磁场,将anti CAP-GMP吸引到CuL修饰的PRG电极(PRG|CuL)表面制备而成.CuL对H2O2还原具有良好的电催化能力,当该传感器在含CAP样品液中温育后,CAP与电极表面的anti CAP的免疫结合物导致CuL对H2O2的催化还原电流(I)降低,电流下降值(△I)和CAP浓度成正比,可用于CAP定量测定.在25℃的pH=6.5磷酸盐缓冲液(PBS)中温育30 min,该传感器对CAP的检测线性范围为0.6~110 ng/mL,检出下限为0.092 ng/mL(3σ法).应用于鱼肉中CAP检测并与传统的液相色谱法(HPLC)比较,结果一致,其添加回收率在97%~104%之间.该免疫传感器集分离、富集为一体,电极表面可更新,检测灵敏快速,对于水产品中痕量氯霉素分析提供了一种新颖的方法.     

免疫球蛋白M(lgM)非标记免疫传感器的研究

本文介绍用醋酸纤维素-戊二醛-己二胺-抗体抗原膜与专用原电极研制的lgM非标记免疫传感器.采用均匀设计法优化了膜结合抗原抗体的实验条件,研究了抗体浓度对电极灵敏度及线性范围的影响,并对抗原抗体结合时间、测试介质等条件进行了选择.与同类电极相比,该电极使用方便、响应快、灵敏度高、重现性和稳定性较好.在最佳测试条件下,电极线性范围47~850μg/mL,相关系数0.9973.用于血清样品测量,取得满意结果.     

基于电聚合硫堇膜与纳米复合材料界面的直接电化学免疫传感器的构建

本工作采用电聚合手段在玻碳电极表面制备聚硫堇基质膜,借硫堇膜上富含的氨基基团实现对碳纳米管与纳米金颗粒二元纳米复合材料的化学组装,制备稳定的碳纳米管/纳米金/聚硫堇传感界面, 以此传感界面固定免疫活性物质,发展了一种无电子媒介的酶免疫传感器.结果表明,电极采用碳纳米管/纳米金颗粒界面固定免疫活性物质,其传感响应性能明显优于单独采用碳纳米管的情况.以人IgG免疫体系为例,电极以此界面固定人IgG抗体,并通过夹心方式直接响应酶催化H2O2的还原电流信号,实现了对人IgG浓度的灵敏测定.此外,采用甘氨酸-HCl缓冲液洗涤使用后的传感器,可有效洗脱其表面的免疫复合物,实现传感器的重复使用.     

基于胱胺自组装膜和SiO2纳米颗粒增强效应的日本血吸虫压电免疫传感器的研究

提出了一种基于胱胺自组装膜和SiO2纳米颗粒增强效应的生物分子固定法,并将之用于日本血吸虫压电免疫传感器的研究.所制备的SiO2纳米颗粒具有生物亲和性高和比表面积大等优良理化性能,经表面功能化后可高效键合日本血吸虫抗原(SjAg)分子,制得敏化的SjAg@SiO2颗粒.将SjAg@SiO2固定于修饰了胱胺自组装膜的石英晶体表面,发展了一种新型压电免疫传感器,用于日本血吸虫抗体(SjAb)的检测.实验结果表明,SiO2颗粒的纳米三维(3D)空间结构有利于所固定的抗原对抗体的识别,进而获得了对目标物SjAb的高灵敏检测.所研制的传感器检测感染兔血清样中SjAb浓度的线性范围为0.6～22.7 μg/mL,检测下限为0.4 μg/mL(S/N=3).此外,临床实际样品的分析结果表明,该免疫传感技术的分析检测能力与经典酶联免疫法(ELISA)相接近,可望用于血吸虫病临床生化诊断、现场筛查和疫情监控等.