Ca2+对悬浮培养HEK293细胞的细胞团形成、细胞生长和代谢的影响

利用HEK293细胞在悬浮培养中具有聚集成团的体外培养特性,在250ml的Bellco的搅拌培养体系中,以细胞团粒径、细胞粒径、细胞数、细胞活力、葡萄糖比消耗速率 (qglc)、乳酸比生产速率 (qlac) 和乳酸对葡萄糖得率 (Ylac/glc) 为观察指标,考察了HEK293细胞在Ca2 浓度设置为0μmol/L、250μmol/L、500μmol/L、750μmol/L和1000μmol/L的搅拌培养体系中的细胞团形成、细胞生长和代谢.实验发现:培养基中的Ca2 浓度决定着HEK293细胞在悬浮培养中能否形成细胞团并影响着细胞团的粒径分布和细胞团内细胞相互连接的紧密程度;在250～1000μmol/L的Ca2 浓度范围内,HEK293细胞团的平均粒径与培养基中的Ca2 浓度成正比;Ca2 浓度对以细胞团的形式悬浮培养的HEK293细胞的生长和代谢无明显的影响.实验结果提示,Ca2 浓度是调节HEK293细胞团粒径分布、维持悬浮细胞团中HEK293细胞正常生长和代谢的有效控制参数.     

玉米根尖细胞遗传学效应监测孔雀石绿污染的研究

以玉米(Zea mays L.)根尖为材料,研究孔雀石绿对玉米根尖的致畸效应.以不同浓度的孔雀石绿为诱变剂,测定玉米根尖细胞的微核率、有丝分裂指数和染色体畸变率.结果表明:孔雀石绿能诱发较高频率的微核率,即在一定的浓度范围内(0mg/L～0.50mg/L)其微核率随孔雀石绿处理浓度的升高而增加,但高于一定浓度(0.50mg/L～2.00mg/L)反而呈下降趋势;在一定浓度时能引起玉米分生组织细胞的分裂指数变化,在1.00mg/L时,有丝分裂指数最大;孔雀石绿还能诱导玉米根尖细胞产生较高频率的染色体畸变,在0.50mg/L时,畸变率最高且产生多种类型的染色体畸变.孔雀石绿对玉米根尖细胞具有明显的致畸效应,在一定范围内可以指示环境中孔雀石绿的污染程度.     

明胶固定化壳聚糖膜的细胞相容性评价

用碳二亚胺将明胶固定于壳聚糖膜表面,以改善壳聚糖的细胞相容性.采用MTT法评价膜材料对L929细胞的毒性.将壳聚糖膜(CS)、明胶固定化壳聚糖膜(CS-GEL)与人角膜上皮细胞(HCEC)体外复合培养,观察细胞的形态及生长情况,考察材料的细胞粘附率、材料对细胞活性与增殖的影响,并通过流式细胞术对细胞周期和凋亡进行分析.结果表明,CS-GEL具有良好的细胞粘附性,HCEC在CS-GEL上的生长和增殖情况优于CS,与CS相比,CS-GEL上HCEC的G1期比例下降,S期和G2期增加.明胶的引入缩短了细胞在膜表面的适应时间,使其尽快进入正常的细胞周期;同时表面固定的明胶可抑制细胞凋亡.因此,明胶固定化壳聚糖膜具有良好的体外细胞相容性,有望成为一种较好的角膜修复材料.     

生物材料对细胞生物学行为的影响

随着细胞生物学、基因工程等研究领域的发展,临床使用的生物医用材料已经由单纯的生物材料制成的植人物,发展成细胞与生物材料的复合物.生物医用材料不仅应具备生物安全性、生物相容性、血液相容性,还应该具有细胞外基质的作用.本文综述了生物材料作为细胞外基质,对细胞粘附、细胞生长及细胞凋亡的影响.     

纳米级PLA-P85-PLA两亲性共聚物的细胞相容性研究

检测新合成的用作口服胰岛素载体的纳米级PLA-P85-PLA两亲性共聚物的细胞相容性,为临床安全应用提供理论依据。根据所合成材料将来的应用领域,选用Caco-2细胞系为研究对象,采用快速评定细胞增殖率和细胞毒性的四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)、中性红摄取(NRU)法和乳酸脱氢酶(LDH)释放法评价共聚物PLA-P85-PLA纳米粒的细胞毒性。结果表明,所合成的共聚物PLA-P85-PLA纳米粒在作用时间(12和24h)和浓度范围(5、10、20和50mg/L)内,对Caco-2细胞无毒性,且有一定的增殖促进作用。新合成的两亲性共聚物PLA-P85-PLA纳米粒无细胞毒性,具有良好的细胞相容性,可用作口服胰岛素载体,为进一步的动物实验提供基础数据。     

胶原模拟多肽对L929细胞粘附的影响

设计合成了3种模拟胶原三螺旋结构或/和整合素识别位点的胶原模拟多肽(CMP),对其进行体外细胞相容性评价,研究其对小鼠成纤维细胞(L929)生长、粘附的影响。实验证实,3种CMP对成纤维细胞生长无明显的细胞毒性反应;3种包被胶原模拟多肽的基底均能在一定程度上促进细胞粘附、生长,具有良好的细胞粘附率和细胞附着形态,其中包含三螺旋结构和整合素识别位点的CMP27具有更好的促粘附效果,细胞粘附数量和形态与胶原接近。初步研究结果证实,胶原三螺旋结构与整合素识别位点共同作用促进L929细胞粘附。因此,CMP可以有效促进细胞粘附,有望作为粘附剂应用于生物医学领域,可为设计以多肽为基础的生物活性材料提供新的研究思路。     

几种齿科合金生物相容性的比较

用银钯合金、镍铬合金、钴铬合金、2号合金的浸提液体外培养小鼠成纤维细胞(L929),以含10%胎牛血清的RPMI1640培养基作为阴性对照组。用5种浸提液分别培养L929细胞4 h、7 h、24 h、48 h后,用MTT法检测细胞增值率并计算caspase-3活化度。在荧光显微镜下观察48 h后各组细胞的状态。使用凋亡相关因子caspase-3的表达强度辅以时间梯度分析其与齿科合金生物相容性的相关性。结果表明:加样培养48 h后各实验组均有大量凋亡细胞,但是有明显的不同,在镍铬合金组内可见橙色坏死细胞;各组细胞的毒性为0级,其细胞增值率的排序为:钴铬合金组>2号合金组>银钯合金组>镍铬合金组;各实验组的Caspase-3活性有显著的差异(P<0.01),Caspase-3活化度由高到低的排序为:钴铬合金组>2号合金组银钯合金组>镍铬合金组。各时间点Caspase-3活化度也有显著的差异(P<0.01),其由大到小的排序为:4 h、48 h、7 h、24 h;这几种齿科合金生物相容性由高至低的排序为:钴铬合金>2号合金>银钯合金>镍铬合金。镍离子、银离子是影响其生物相容性的主要因素。在时间梯度的辅助下评价4种齿科合金生物相容性,Caspase-3与MTT的结果一致.     

国产膨体聚四氟乙烯的预处理及其细胞毒性评价

在评价圆产膨体聚四氟乙烯的细胞毒性和预处理方法的优劣的基础上,寻找国产替代材料,并比较国产膨体聚四氟乙烯与进口材料的细胞毒性.采用MTT(四甲基偶氮唑蓝)法检测经过不同方法预处理的国产膨体聚四氟乙烯和进口材料的细胞毒性.按细胞毒性分级的国家标准对其进行分级,评价其细胞毒性.结果表明,以上各组材料毒性级别均为1级,即无细胞毒性.国产膨体聚四氟乙烯具有良好的细胞相容性,以高锰酸钾溶液进行预处理可获得最佳效果.     

喂饲前体提高悬浮培养水母雪莲细胞的黄酮产量

为提高水母雪莲细胞悬浮培养的生物量及次级代谢产物黄酮的含量,在培养基中喂饲肉桂酸、乙酸钠和苯丙氨酸等三种黄酮生物合成前体,考察了它们对水母雪莲细胞TUIP-8悬浮培养的影响.在(17±1)℃环境中悬浮培养TUIP-8水母雪莲细胞,喂饲这三种前体均能显著促进雪莲黄酮的生物合成,并且对细胞的生长抑制效应较小.在接种时喂饲前体,低浓度添加肉桂酸(7.14 mg/L)、乙酸钠(3.57 mg/L)和苯丙氨酸(3.57 mg/L)更有利于提高黄酮产量.培养后期喂饲前体的效果要好于接种时喂饲,其中17.85 mg/L的乙酸钠对黄酮合成的促进作用最强,可使黄酮含量从7.8%提高至12.4%,黄酮产量可提高63%.在(25±1)℃环境中悬浮培养TUIP-8水母雪莲细胞,喂饲前体促进雪莲黄酮生物合成的效果不明显,与对照相比黄酮产量只提高5%～10%.反应器培养的雪莲细胞总黄酮含量可下降至8.5%,但在培养后期使用含有28 mg/L乙酸钠、60 mg/L苯丙氨酸的改进MS培养基,雪莲细胞的黄酮含量可恢复至11%,细胞密度可达到21 g(干重)/L.在悬浮培养水母雪莲细胞过程中添加乙酸钠和苯丙氨酸等前体物质可以促进雪莲黄酮的合成.     

微波复温对玻璃化冻存小鼠骨髓有核细胞活性的影响

对ICR小鼠骨髓有核细胞进行玻璃化深低温保存,在冻存1、5、10、20、30d后,骨髓有核细胞样品分别采用常规的38℃水浴复温和微波复温,即在300mL10℃水中,控制微波功率为800W,频率2450MHz,复温时间80s.检测骨髓有核细胞的功能变化,比较两种复温方法对细胞活性的影响.结果表明:骨髓有核细胞玻璃化冻存1～20d,其存活率、细胞内琥珀酸脱氢酶(SDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性都有下降的趋势,过氧化氢(H2O2)含量显著增加,但冻存20d后这些指标保持基本稳定,与第30d比较无显著差异(P＞0.05).微波复温组的细胞存活率,细胞内SDH、SOD的活性高于水浴复温组,细胞内H2O2含量明显低于水浴复温组.说明微波复温能够提高复温速率,对骨髓有核细胞的损伤要低于水浴复温.     

Estimation of Parameters of Universal Distribution of Moments of Failure of Products

A method is proposed for estimating the parameters of a mixture of exponential and Weibull distributions for which the accuracy of preliminary estimates obtained by graphical analysis is refined in accordance with the criterion of maximum likelihood. The efficiency of the proposed method is supported by the results of statistical modeling.     

方波幅度的测量不确定度

介绍了用众数法评价方波幅度时的不确定度分析和评价过程;讨论了主要的不确定度来源,包括众数判别区间的影响、波形测量系统幅度测量误差的影响等等;给出了减小不确定度的主要措施,并结合一个实例,给出了方波幅度的不确定度评价结果。     

空压机轴承箱蜗壳温度探头油封改造

由于空压机进气侧轴承箱蜗壳温度探头密封效果不好,使空压机及其后续管道受到油污染。后将温度探头的O形圈密封改为骨架油封,杜绝了轴承箱漏油问题。文章简介空压机的结构和技术参数,详细介绍了骨架油封的制作和优点。     

秒表检定的测量不确定度评定

介绍了用标准时间间隔发生器检定秒表时,测量结果不确定度分析和评定过程;讨论了测量不确定度的几个主要来源;通过一组实例,给出了秒表检定不确定度的分析和评定结果,该过程和结论可应用在对于计量标准进行相应指标的不确定度分析上,也可用于估计秒表检定本身的不确定度。     

一起珠光砂堵塞过冷器的故障处理

在KDON-4500/4500-3型空分设备精馏塔大加温过程中发生管道断裂故障,珠光砂进入纯氮通道堵塞过冷器并造成空分设备停车。介绍为排除故障而对过冷器进行正、反向吹扫的管线流程。阐述了为避免同类故障再次发生,对冷箱内管道、支架所作的改进措施以及精馏塔加温吹扫的优化操作。     

水三相点复现的不确定度评定

水三相点是开尔文热力学温度的唯一基准点，也是ITS-90国际温标重要的定义固定点。因此，水三相点不确定度分析对整个温标的建立、温度量值传递起着至关重要的作用。近3年来，中国计量科学研究院研制出一系列高质量的水三相点容器，加强了水三相点的研究，为不确定度的分析提供了更为可靠的实验依据。同时，不确定度的分析也是客观评价新研制容器性能的一个重要指标。因此，根据实验结果对新研制容器所复现的水三相点进行了不确定度评定。评定结果表明，其扩展不确定度为0．16mK(k=2．69，P=0．99)。     

Calculation of the Heat of Combustion of Hydrocarbon Components of Fuels

Development is continued of the empirical method for the calculation of the heat of combustion of organic compounds and, in particular, of hydrocarbons of different structures by the additive scheme based on their chemical structure.     

输入估计值的测量不确定度评定

本文所介绍的与1993年由ISO等7个国际组织联合发表的《测量不确定表示指南》（简称《指南》）完全一致，只是指南上的实用于物理测量的绝大多数领域，而本文介绍的仅适用于校准实验的测量。同时本文主要侧重于对输入估计值的A类测量不确定度和B类测量不确定度的评定的介绍，为输出估计值的测量不确定度评定奠定了良好的基础。     

Assurance of the Uniformity of Measurements of the Power of Laser Radiation

On the basis of an analysis of the principle underlying the construction of standards and systems designed for reproduction of the unit of mean power and energy of laser radiation, it is shown that these standards consist of unified subsystems that carry the principal metrological load. By means of such a division, it is possible to realize a systems-engineering synthesis of standards with preassigned error. __________ Translated from Izmeritel'naya Tekhnika, No. 11, pp. 20–23, November, 2005.     

鲍鱼壳珍珠层无机文石片的层状微结构研究

贝壳珍珠层是软体动物壳的最内层,经过若干世纪的自然进化,贝壳珍珠层形成了优良的微结构,并使贝壳具有了相当高的强度、刚度及断裂韧性.本文利用扫描电镜(SEM)观察了鲍鱼贝壳珍珠层的主要微结构特征,发现其是由层状的无机文石片和有机胶原蛋白质组成的生物陶瓷复合材料.根据发现的贝壳珍珠层层状微结构特征,建立贝壳珍珠层三维有限元模型,并用此模型分析了珍珠层的拉伸屈服极限与无机文石片拉伸屈服极限及其厚度的关系,研究表明珍珠层的屈服极限随无机文石片屈服极限的增加和无机文石片厚度的减小而增加.