三种蓝莓抗氧化及抗Hep G2细胞增殖活性的比较分析

以三种常见市售蓝莓[大兴安岭野生蓝莓(Vaccinium uliginosum L.)、贵州兔眼蓝莓(Vaccinium ashei Reade)和智利蓝莓(Vaccinium corymbosum L.)]为研究对象,研究了其总多酚、总黄酮和总花色苷含量及抗氧化活性和抗Hep G2细胞增殖活性,并分析了活性成分含量与活性功能的相关性。结果表明:大兴安岭野生蓝莓的总多酚、总黄酮和总花色苷的含量及DPPH和ABTS自由基的清除能力显著高于贵州蓝莓和智利蓝莓(p0.05);细胞抗氧化实验结果表明大兴安岭野生蓝莓的CAA(CellularAntioxidant Activity)值显著高于贵州蓝莓和智利蓝莓,为202.40±6.33μmolQE/100g鲜果(非PBS清洗处理时)和65.40±3.04μmolQE/100g鲜果(PBS清洗处理时)(p0.05);三种蓝莓均对HepG2细胞增殖有较强的抑制作用,其中大兴安岭野生蓝莓的抗HepG2细胞增殖的半数有效浓度EC50显著低于贵州蓝莓和智利蓝莓,分别为150.41±7.82、212.87±13.10和221.53±12.53 mg/mL(p0.05);蓝莓的CAA值与总多酚和总黄酮含量之间显著相关,抗Hep G2细胞增殖的EC50值与总多酚、总黄酮和总花色苷含量之间显著相关(p0.05)。以上结果表明大兴安岭野生蓝莓具有极大的开发利用优势。     

黍子的抗氧化活性及其与功能活性成分的关系

通过建立C57BL/6肥胖小鼠模型,评价了黍子对小鼠肝脏抗氧化性能的影响。并在分析比较其多酚和黄酮含量的基础上,利用抗氧化化学分析和细胞评价试验,研究了黍子抗氧化活性与其主要功能活性物质含量之间的关系。结果表明:高脂饮食削弱了小鼠肝脏的抗氧化性能,日粮中添加黍子后,高脂饮食小鼠肝脏的抗氧化能力得到了明显的改善。不同黍子品种间多酚和黄酮的含量差异较大。总多酚含量变异系数可达63.61%,变幅为0.78~3.44mg/g。总黄酮含量变异系数可达68.46%,变幅为0.89~10.17 mg/g。不同品种黍子提取物的总抗氧化能力指数(ORAC)和细胞抗氧化活性(CAA)均存在显著性差异,且黍子提取物的ORAC和CAA值与黄酮和多酚的总含量相关,均呈正向线性关系,相关系数R~2分别为0.811和0.565。     

不同品种龙眼果肉酚类物质的抗氧化活性比较

为研究不同龙眼品种资源中酚类物质、黄酮类化合物含量及其抗氧化性差异,选取广东省农业科学院果树研究所龙眼资源圃的24个龙眼品种,分析其果肉中游离态和结合态总酚、总黄酮物质的含量,采用DPPH自由基清除能力、ABTS总抗氧化能力、FRAP抗氧化能力和氧自由基吸收能力ORAC四种不同方法评价其体外抗氧化能力差异;不同龙眼品种果肉总酚、总黄酮含量与DPPH、ABTS、FRAP、ORAC四种不同方法测定的抗氧化能力的变幅和变异系数较大,呈现出显著的基因型差异;不同品种龙眼果肉的多酚和黄酮的含量分别与ABTS自由基清除能力、FRAP和ORAC呈极显著(p0.01)正相关关系,而与DPPH自由基清除能力的EC50值呈极显著负相关关系(p0.01)。采用快速聚类法将24个不同品种的龙眼聚成多酚及总黄酮含量和抗氧化能力差异显著的三大群类。不同品种龙眼果肉游离态和结合态酚类物质含量与其抗氧化活性均呈显著正相关关系,提示酚类物质是龙眼果肉抗氧化活性的主要成分;酚类物质和黄酮类物质在龙眼果肉中主要以游离态存在,其中结合态平均占总酚含量的17.45%。     

基于HepG2细胞模型的褐赭色羊肚菌多酚抗氧化及抗增殖活性研究

本实验研究了褐赭色羊肚菌游离酚和结合酚体内抗氧化能力以及对HepG2细胞的毒性和抗增殖作用。采用HPLC对褐赭色羊肚菌多酚组分进行鉴定,测定多酚抗氧化能力指数(ORAC);以人肝癌细胞HepG2为模型,测定多酚细胞抗氧化活性(CAA值)及抗增殖活性(EC50值)。结果显示:褐赭色羊肚菌游离酚和结合酚含量分别为(4.27±0.07)、(0.14±0.01)mg GAE/g DW;其ORAC值分别为(4624.52±400)、(429.41±60)μmol TE/100 g DW;CAA值分别为(15.33±0.60)、(0.37±0.01)μmol QE/100 g DW(PBS清洗)和(51.84±0.83)、(1.27±0.04)μmol QE/100 g DW(不经PBS清洗)。游离酚和结合酚浓度为125μg/m L和70μg/m L时,对HepG2细胞增殖抑制率分别为77.28%、66.31%,且试验浓度范围内,羊肚菌多酚对HepG2基本无细胞毒性。褐赭色羊肚菌多酚具有一定的细胞抗氧化及抗增殖活性,可将褐赭色羊肚菌作为开发此类功能营养食品的原料,为羊肚菌的进一步综合利用提供理论依据。     

热带水果多酚提取物的抗氧化和抗增殖活性研究

为明确12种热带水果多酚提取物的总酚含量、总抗氧化能力和抗肿瘤细胞增殖活性,分别采用Folin-Ciocalteu法确定了水果提取物的总酚含量,采用ORAC和FRAP的方法确定了其抗氧化能力,采用MTT的方法确定了其抗人肝癌细胞HepG2增殖的活性。结果显示,12种水果提取物的总酚含量为26.17-229.67 mg GAE/100g 鲜重,最高杨桃的总酚含量为最低鳄梨的8.78倍;ORAC和FRAP抗氧化值分别为607.05-2631.17 μmol TE/100g 鲜重和462.12-1067.92 μmol TE/100 g鲜重,杨桃具有最高的ORAC和FRAP抗氧化值,分别是最低木瓜的4.33倍和鳄梨的2.31倍;11种水果提取物抑制肿瘤细胞HepG2增殖的IC50值为31.79-66.93 mg/mL,抑制活性最弱木瓜的IC50值为最强杨桃的2.11倍。水果提取物的总酚含量与其ORAC抗氧化值（R2＝0.7839）、FRAP抗氧化值（R2＝0.7636）和抑制HepG2细胞增殖的IC50值（R2＝0.8847）之间具有显著的相关性。     

荔枝果肉多酚不同极性分部的构成谱及其抗氧化活性比较

利用乙酸乙酯和正丁醇2种不同极性溶剂对荔枝果肉多酚提取物水溶液分部萃取,采用高效液相色谱分析不同极性分部萃取物的多酚组分及其含量差异,并采用细胞抗氧化法评价其抗氧化活性差异。结果表明:荔枝果肉多酚不同极性分部的得率、总酚含量、总黄酮含量、多酚组成及含量、抗氧化活性存在显著性差异。3个极性分部萃取物的得率以水相最高(36%),正丁醇相(32%)次之,乙酸乙酯相(16%)最低。总酚含量以乙酸乙酯相最高,正丁醇相次之;总黄酮含量以正丁醇相最高,乙酸乙酯相次之;而抗氧化活性以正丁醇相最强,水相次之。乙酸乙酯相多酚组成主要为原花青素B2、表儿茶素等原花青素类化合物;正丁醇相多酚组成主要为槲皮素-3-芸香糖-7-鼠李糖苷等黄酮类化合物。     

荔枝果肉多糖级分的抗氧化和α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

为了探究不同荔枝果肉多糖级分的理化性质、抗氧化能力和α-葡萄糖苷酶抑制活性差异,采用DEAE-52离子交换树脂分离纯化得到2种荔枝果肉多糖级分LPI和LPII,比较两者的中性糖、糖醛酸和蛋白质含量,并采用氧自由基清除能力(ORAC)和细胞抗氧化(CAA)评价其抗氧化活性,采用对-硝基酚-α-D吡喃葡萄糖苷(PNPG)法探究其α-葡萄糖苷酶抑制活性。研究结果表明LPII含有较多的中性糖和蛋白质,较少的糖醛酸,表现出更强的抗氧化和α-葡萄糖苷酶抑制活性,其中LPI和LPII的ORAC和CAA值分别是24.51,30.08μmol/g和5.36,8.72μmol/g,其抑制α-葡萄糖苷的IC_(50)值分别是0.33,0.26 mg/m L。荔枝果肉多糖的生物活性与其中性糖和蛋白质含量密切相关。     

不同品种李子多酚组成及抗氧化活性

为研究不同品种李子果皮、果肉多酚组成及抗氧化活性,以9个不同品种的李子(芙蓉李、巫山李、玫瑰李、红布李、黑布李、西梅李、脆红李、江安李、青李)为原料,提取游离酚和结合酚,测定其1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力和抗氧化能力(oxygen radical absorbance capacity,ORAC)值,并通过高效液相色谱分析其多酚组成。结果显示:9种李子果皮总酚含量范围为111.52~775.88 mg GAE/100 g;果肉总酚含量范围为120.65~301.91 mg GAE/100 g,其中红布李果皮、果肉总酚含量均最高,西梅李总酚含量均最低。在多酚组成上,游离酚含量显著高于结合酚,且多酚组分主要为酚酸(原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸)。体外抗氧化结果显示:9种李子果皮、果肉多酚均具有一定的抗氧化活性,DPPH自由基清除IC50值范围为4.38~46.46μg/m L,ORAC值范围为0.24~210.50μmol TE/g,其中巫山李果肉游离酚对DPPH自由基的清除能力最强,红布李果皮游离酚ORAC值最高。     

发酵程度不同的茶浸提液抗氧化能力比较及茶多酚细胞抗氧化活性研究

为研究发酵程度对茶浸提液体外抗氧化活性的影响,明确茶叶中主要的抗氧化活性成分,采用DPPH法和ORAC法对4种不同发酵类型茶浸提液的体外抗氧化活性进行测定,并对茶叶中功能性成分含量与抗氧化活性的相关性进行分析,同时还以HepG2人肝癌细胞为研究对象,对主要抗氧化活性物质的细胞抗氧化能力(CAA)进行分析。研究结果表明,2种抗氧化活性测定方法均得到相同的抗氧化活性规律:未发酵茶半发酵茶全发酵茶后发酵茶;相关性分析显示:茶叶中主要的抗氧化活性物质是茶多酚(P0.01),氨基酸含量对其抗氧化活性也有一定影响(P0.05);茶多酚显示出很强的细胞抗氧化能力,其CAA值相当于44.2±1.24μmol槲皮素/100μmol。     

菜籽肽的ACE、肾素抑制活性及抗氧化性研究

本研究采用1、3、5、10 ku的超滤膜分离菜籽蛋白嗜热菌蛋白酶水解物(TPH),得到了4种不同分子质量的菜籽肽,研究了各菜籽肽的血管紧张素转化酶-Ⅰ(ACE)抑制活性、肾素抑制活性、氧自由基吸附能力(ORAC)和细胞抗氧化(CAA)活性。结果表明,菜籽肽的分子质量与其ACE抑制活性、肾素抑制活性以及ORAC值有明显的正相关性(P0.05);1 ku的菜籽肽的ORAC值远高于TPH的,其ORAC值(Trolox)高达(4 363.53±45.87)μmol TE/g,是谷胱甘肽(GSH)的2.4倍,其中2个菜籽肽的ORAC值与GSH相当(p0.05);细胞抗氧化试验表明TPH的CAA值最高,为(26.53±1.71)μmol QE/g,其次是1 ku组分,其CAA值是(23.91±0.69)μmol QE/g。研究认为,菜籽蛋白酶水解物及各菜籽肽不仅具有ACE和肾素双重抑制活性,还有一定的氧自由基吸收能力。因此,菜籽蛋白可用于开发降血压制剂或相关功能性产品。     

Phytochemical composition,cellular antioxidant capacity and antiproliferative activity in mango (Mangifera indica L.) pulp and peel

Cellular antioxidant activity (CAA) and inhibition of hepato‐cellular carcinoma (HepG2) proliferation were evaluated for the first time in the pulp and peel of mango cultivars. Comparatively, peel had high flavonoids and tocopherols content and showed significant antioxidant activity. Among all the studied cultivars, the Xiao Tainong peel was predominant with highest fistein, mangiferin and alpha‐tocopherol content and significant cellular antioxidant activity value 2986 ± 380 μmol QE/100 g FW. The HepG2 cells antiproliferation was maximum in the peel of Da Tainong and pulp of Aozhou with lowest EC₅₀ values, 2.35 ± 0.65 (peel) and 185.4 ± 10.9 (pulp) mg mL^?1, in a dose‐dependent manner. Negative associations of flavonoids and tocopherol compounds with CAA and antiproliferative activity in mango confirmed synergistic, additive or antagonistic actions of phytochemicals. The current study suggests that mango peel could be used as a value added ingredient or functional food and may contribute considerably to promote consumer health.     

苦荞麸皮黄酮抗氧化及抗肿瘤活性

以西南地区的两种苦荞麸皮为实验材料（重庆酉阳苦荞麸皮（T1）;四川西昌苦荞麸皮（T2））,通过氧化自由基吸收能力实验（oxygen radical absorbance capacity,ORAC）测定苦荞麸皮黄酮的化学抗氧化能力,采用人肝癌细胞HepG2为细胞模型,研究苦荞麸皮黄酮的细胞抗氧化活性（cellular antioxidant activity,CAA）及对He pG2 细胞抗增殖活性。结果表明： T 1 和T 2 苦荞麸皮黄酮的ORAC值分别为（ 5 7 . 0±3 . 5 ） 、（73.6±6.3）μmol TE/g。T1和T2苦荞麸皮黄酮的细胞抗氧化值分别为（44.4±5.2）、（52.5±2.7）μmolQE/100 g（PBS清洗）;（32.9±3.2）、（30.9±2.2）μmol QE/100 g（不经PBS清洗）。在对HepG2细胞体外抗增殖活性研究实验中,通过与对照组细胞相比,发现当苦荞麸皮黄酮的质量浓度为21.9 mg/mL时,T1和T2苦荞麸皮黄酮对HepG2细胞增殖的抑制率分别约为51%和82%（P＜0.01）,二者相应的EC50值分别为（23.0±0.5）mg/mL和（13.7±0.1）mg/mL。因此,苦荞麸皮黄酮具有一定的体外细胞抗氧化和抗增殖的能力,可将苦荞麸皮作为此类功能性食品开发的原料资源。     

基于HepG2细胞模型的香菇柄粉多酚抗氧化及抗增殖活性

以人肝癌细胞HepG2为细胞模型,经过不同粉碎条件处理香菇柄粉后,研究香菇柄粉游离酚的细胞抗氧化及多酚抗增殖活性。结果表明：香菇柄粉游离酚的细胞抗氧化活性（cellular antioxidant activity,CAA）值为9.90～24.22 μmol QE/100 g,普通粉碎组最高,纳米超微粉碎组最低,CAA值随粉体粒径减小而降低（不经磷酸盐缓冲液（phosphate buffer saline,PBS）清洗）;气流超微粉碎组CAA值为0.65 μmol QE/100 g,普通粉碎组和纳米超微粉碎组未表现出细胞抗氧化活性（PBS清洗）。香菇柄粉游离酚的抗增殖活性（半数有效浓度（medianeffective concentration,EC50）值）为1.888～5.213 mg/mL,结合酚的抗增殖活性（EC50值）为2.225～4.751 mg/mL,气流超微粉碎处理对香菇柄粉结合酚的抗增殖活性有增强作用。     

热风干制对荔枝果肉多糖抗氧化活性的影响

干制被广泛应用于荔枝的保藏和精深加工,但是干制会导致多糖结构的变化以及生物活性的改变。为了探究热风干制对荔枝果肉多糖的影响,本研究通过分析多糖基本成分、分子量分布、紫外光谱、特征粘度等比较了热风干燥前后鲜荔枝果肉多糖(LPF)和干荔枝果肉多糖(LPD)的理化特性;采用DPPH、ABTS、Fe3+还原抗氧化力(FRAP)和氧自由基清除能力(ORAC)4种方法比较两者的抗氧化活性差异。结果表明,经过干制加工后,荔枝果肉多糖的中性糖含量降低,蛋白含量增加,多糖分子发生裂解,特征粘度下降,抗氧化活性显著提高,其中LPD的FRAP和ORAC值分别是LPF的8.98和4.35倍,LPF和LPD的DPPH·清除能力的IC50值分别是1.98和0.11 mg/mL,两者在4 mg/mL终浓度清除ABTS+·百分率分别是21.87%和98.81%。由此表明热风干制能够显著影响荔枝多糖的理化特性,进而增强其抗氧化活性。     

荔枝多酚的抗氧化性动力学及稳定性

采用DPPH自由基清除法和铁还原比色法研究荔枝多酚的抗氧化性。水相/有机相荔枝多酚的DPPH自由基清除能力及铁离子还原能力的动力学反应模式均表现为剂量及反应时间的双重依赖关系。荔枝多酚对温度敏感。随着温度的升高(25～70℃),其多酚含量及其抗氧化活性均呈下降趋势;荔枝多酚含量及抗氧化性在弱碱性范围内(pH8～9)较稳定;荔枝多酚对光照敏感,随着光照时间的延长(12～96h),其多酚含量及其抗氧化活性逐渐下降;荔枝多酚含量与其抗氧化活性相关性较强,当处理造成荔枝多酚含量发生改变时,其抗氧化活性也发生较大变化。低温、弱碱性及避光均有利于荔枝多酚含量与其抗氧化活性的稳定。     

不同打浆及杀菌处理对荔枝浆品质的影响

荔枝浆品质的劣变与氧气和热处理存在密切关系,本文比较了常规打浆(CB)与低氧打浆(LB)对荔枝浆品质的影响,并研究了低氧打浆对超高压(HHP)和热处理(HT)荔枝浆4℃贮藏过程中品质的影响。结果表明,与常规打浆相比,低氧打浆对荔枝浆可溶性固形物含量、pH和总酸无显著影响(P>0.05),而L^*值显著上升(P<0.05),a^*值显著降低(P<0.05),总酚含量提高了24.70%,除原花青素B2、芦丁、儿茶素和香草酸外,其它6种单体酚含量均显著增加(P<0.05)。贮藏过程中,不同打浆方式联合HPP和HT的荔枝浆L^*值均呈下降趋势、a^*值均呈上升趋势,其中LB+HHP组L^*值始终最大;贮藏至28 d,低氧打浆联合超高压处理组总酚、DPPH自由基清除能力以及铁离子还原能力均高于其它三组。综上,低氧打浆能更好地保护荔枝浆的色泽、酚类物质和抗氧化能力,减少超高压和热处理的荔枝浆在贮藏过程中的品质劣变,其中LB+HHP处理更具优势,可作为一种新型荔枝浆加工技术。     

热泵干燥过程荔枝果肉多酚组成及抗氧化活性变化

以荔枝鲜果为原料,分析高温热泵干燥过程中荔枝果肉多酚的组成及抗氧化性活性变化。对干制过程中荔枝进行取样测定果肉总酚的质量分数、存在形式及酚类化合物组成和其抗氧化能力。结果表明:荔枝经干制后果肉中游离酚、结合酚和总酚质量分数显著降低(P<0.01);游离酚、结合酚和总酚的ORAC抗氧化值显著降低(P<0.01),其中游离酚对抗氧化能力的贡献最大;抗氧化能力和酚质量分数的多少呈显著正相关,酚质量分数越高,抗氧化能力越强。经干制后,荔枝果肉游离酚组成中没食子酸、香草酸、咖啡酸、表儿茶素和芦丁质量分数显著上升(P<0.05);儿茶素显著下降(P<0.05);四甲基邻苯二酚质量分数持续下降,干制成品中未检测到;结合酚中没食子酸、儿茶素、咖啡酸和表儿茶素质量分数显著上升(P<0.05);芦丁质量分数显著下降。     

基于广泛代谢组学的荔枝果肉营养代谢物综合解析

采用基于超高效液相色谱-电喷雾四极杆飞行时间串联质谱法多反应监测模式的广泛靶向代谢组学对10 个荔枝品种的果肉中539 种代谢物进行鉴定,描述关于荔枝代谢物组成和丰度的全面信息。结果表明：荔枝果肉初生代谢物298 个（55.29%）,次生代谢物228 个（42.30%）;其中氨基酸及其衍生物（82 个,15.21%）、脂质（60 个,11.13%）、有机酸（59 个,10.95%）、核苷酸及其衍生物（53 个,9.83%）、糖类及醇类（25 个,4.64%）是主要的初生代谢物,黄酮（129 个,23.93%）、酚酸类（54 个,10.02%）、生物碱（31 个,5.75%）是主要的次生代谢物。采用主成分分析和聚类热图分析系统地比较10 个荔枝品种的代谢物,发现不同品种间存在明显的分组模式,共聚类为3 组且与品种之间的熟期及风味品质相对应。同时关注每类成分中相对含量大于1%的最重要的代谢物,揭示了各类代谢物对荔枝果肉营养的贡献,发现了γ-氨基丁酸、肌醇、石榴酸、葫芦巴碱几种丰度较高且具有特殊功效和营养的代谢物。鉴于荔枝的代谢产物鉴定与人们的营养与健康、果实风味及抗性有着密切的关系,本实验将为鲜食营养、栽培育种、综合利用提供理论依据和参考信息。     

Phenolic profiles and cellular antioxidant activity of longan pulp of 24 representative Chinese cultivars

The phytochemical composition and antioxidant activity of fruits are associated with their health benefits. Longan is a traditional Chinese edible and medicinal fruit, but its varietal differences in phytochemical profiles and antioxidant activity were unknown. Twenty-four longan cultivars from southern China were investigated in this study. Their total phenolic and flavonoid contents in pulp were 22.09–132.47 mg gallic acid equivalents/100 g and 2.48–14.26 mg catechin equivalents/100 g, respectively. The mean contributions of free phenolics and ?avonoids to the total were 82.5% and 94.0%, respectively. Among 10 individual phenolics detected by HPLC, the contents of epicatechin, 4-methylcatechol, chlorogenic, and vanillic acids were relatively higher. The cellular antioxidant activity (CAA) of longan pulp showed significant varietal discrepancies and positive correlation with phenolic and flavonoid contents. Phenolics in longan pulp of 24 cultivars showed lower CAA potential than many other fruits with the CAA qualities from 0.35 to 1.21 µmol quercetin equivalent/100 µmol total phenolics. Longan cultivars were classified into six groups by hierarchical clustering analysis. Six cultivars in group 4 and 6 had higher phytochemical contents and CAA activity.