酶法催化柚皮苷制备根皮素及其抗氧化活性分析

本文阐述一种高效,环保制备高价值天然抗氧化剂根皮素的方法。以天然的柑橘提取物柚皮苷为原料,经一锅法加氢反应制得柚苷二氢查尔酮,再以α-鼠李糖苷酶（α-rhamnosidase）和纤维素酶（cellulase）高效催化水解而制得根皮素。采用单因素和正交实验对α-鼠李糖苷酶和纤维素酶酶解反应的pH、温度、酶与底物比进行优化,同时对根皮素、三叶苷、柚苷二氢查尔酮、柚苷的抗氧化性进行了研究,结果表明：α-鼠李糖苷酶（α-rhamnosidase）酶解最佳工艺为温度60 ℃、pH 4、酶与底物比为0.6:1;纤维素酶（cellulase）最佳工艺为温度45 ℃、pH 5.5、酶与底物比为0.3:1。在此工艺下根皮素的转化率为96.10%,比原工艺提高了10.53%。抗氧化性研究结果为：清除DPPH自由基能力根皮素（0.18±1.45）>三叶苷（0.3±1.63）>柚苷二氢查尔酮（0.95±1.24）>柚苷（8±1.97）,还原铁离子能力为根皮素（7.1±0.68）>三叶苷（2.51±0.75）>柚苷二氢查尔酮（2.05±0.58）>柚苷（0.11±0.92）。本方法条件温和,周期短且转化率高,易于放大生产。抗氧化性结果表明根皮素具有较高的抗氧化性。这对根皮素的放大生产及应用具有重大意义。     

柚皮苷二氢查尔酮的抗氧化活性研究

利用4种常见的抗氧化方法和分子对接,研究柚皮苷二氢查尔酮的抗氧化活性。通过测定酪氨酸酶活性,研究其美白活性,并用MTT试验测定其细胞毒性。试验结果表明:柚皮苷二氢查尔酮有较好的抗氧化性和美白活性,对小鼠黑色素瘤B16细胞的安全浓度为小于等于500μmol/L。     

两种二氢查尔酮甜味剂的包埋反应及产物表征

柚皮苷二氢查尔酮(Naringin DC)和新橙皮苷二氢查尔酮(NHDC)是目前最常用的二氢查尔酮类甜味剂,但由于两种物质的常温水中溶解度极低,限制了其使用范围,现研究用β-环糊精、复凝聚法和糖接枝法对两种二氢查尔酮甜味剂进行包埋增加其溶解度,并用红外光谱,荧光光谱,扫描电镜等方法对包埋产物进行结构表征,得到的结论为三种包埋方法都能有效的包埋两种二氢查尔酮甜味剂,虽然包埋产物的甜度有所下降,但是两种甜味剂的常温水中溶解度均有极大提高,并且包埋产物的常温水复溶性极好。     

响应面优化化橘红柚皮苷超声辅助提取工艺

为了研究化橘红药用价值、开发柚皮苷产品,本文通过单因素实验以及响应面优化对化橘红中柚皮苷的超声波辅助乙醇浸提工艺进行了研究,结果表明,化橘红中柚皮苷最佳的提取工艺参数为提取温度57.5℃,液料比60.9(mL·g-1),乙醇体积分数为50.8%;化橘红柚皮苷的实际得率为7.87%,接近于响应面预测值7.95%,因此响应面优化柚皮苷的超声波辅助提取工艺真实可信,超声波辅助提取效率高。     

沙田柚皮中柚皮苷和果胶综合提取工艺研究

本研究利用柚皮苷、果胶性质的差异,探索了沙田柚皮中柚皮苷、果胶综合提取工艺。即先以沙田柚皮粉为原料,采用乙醇法提取沙田柚皮中柚皮苷,起到脱色、除杂的目的,且柚皮中原有的可溶性果胶损失少。再以脱柚皮苷后的沙田柚皮粉为原料,采用酒石酸法提取果胶。酒石酸可高效地催化沙田柚皮中的原果胶发生水解转化为可溶性果胶,此外酒石酸具有螯合钙、镁等金属离子作用,有利于果胶溶出,提高果胶的提取率。研究结果为,以沙田柚皮粉为原料,乙醇法提取柚皮苷的优化工艺为:固液比为1∶10,乙醇浓度为70%,提取温度为40℃,提取时间为60min。以脱柚皮苷的沙田柚皮粉为原料,酒石酸法提取果胶的优化工艺为:提取液pH为1.5,固液比为1∶20,提取温度为95℃,提取时间为2h。     

化橘红粉末饮片颗粒度适宜性研究

为了将化橘红原饮片粉碎分级处理,研究粉碎度对质量的影响.将化橘红饮片粉碎成不同粒径的粉末,分别加相当于饮片质量15倍的水量,设置水浴温度90℃,加热30 min,将化橘红内柚皮苷的溶出度、高效液相色谱图谱及浸出物量作为指标,考察不同粉粹度的影响.结果发现,2号样品饮片粒径为24～50目时所含有效成分柚皮苷的溶出度最大(...     

黑曲霉TC-01产柚苷酶对柚皮苷酶解作用的研究

柚皮苷是一类主要的类黄酮物质,它是引起柚类和葡萄果实苦味的主要来源,去除柚皮苷会使果汁苦味减轻,而柚皮苷酶能在不影响柑橘果汁品质的前提下较好地去除苦味。但是由于不同来源的柚苷酶的结构不同,其催化特性也不尽相同,本文通过利用前期筛选的黑曲霉(Aspergillus.niger TC-01)产柚苷酶对柚皮苷酶解作用进行研究,实验采用高效液相色谱法测定柚皮苷、普鲁宁和柚皮素的三者之间含量变化,确定酶解最适温度、时间、pH及酶用量,并测定TC-01产柚苷酶的米氏常数以确定酶解反应的最佳条件。结果表明,TC-01产柚苷酶酶解最适温度为60℃、酶解最适时间为30-40min,最适pH4.0,酶最佳用量为24u/mL。米氏方程为Y=0.0018X-3.0×10-6,其中Km值为598.8ug/mL,Vmax=2.06g/(min.mL)。此研究结果为柚苷酶的应用提供了理论依据。     

柚皮苷-卵磷脂包合物的制备及其理化性质研究

柚皮苷是一种天然抗氧化剂,具有多种生物活性,但是存在脂溶性差、口服吸收率低等问题。为了提高柚皮苷的脂溶性和生物利用度,本研究制备了柚皮苷-卵磷脂包合物,并采用紫外(UV),红外(IR),差示量热扫描(DSC),X-射线衍射(XRD)等波谱分析方法研究了该包合物的理化性质。研究结果表明,柚皮苷与卵磷脂并没有形成一种新的化合物,柚皮苷只是以一种无定形状态分散在卵磷脂中,二者是通过氢键、范德华力等非共价键形式相结合。同时对比了柚皮苷与柚皮苷-卵磷脂包合物中柚皮苷在正辛醇中的溶解性,结果表明,与卵磷脂形成包合物后,柚皮苷在正辛醇中的溶解度由3.28μg/m L增加至755.50μg/m L,脂溶性得到了显著的提高;亚油酸体系中抗氧化能力实验表明,柚皮苷与卵磷脂的包合可以显著提高柚皮苷在脂溶性体系中的抗氧化能力。     

柚皮苷-金属配合物的抗氧化活性研究

采用二苯代苦味肼基自由基(DPPH)法和硫代巴比妥酸法(TBA)对3种柚皮苷-金属配合物的抗氧化活性进行了测定.结果显示,3种柚皮苷-金属配合物对DPPH自由基均具有清除作用,其清除能力大小依次为:柚皮苷-铁(Ⅲ)配合物、柚皮苷-锌(Ⅱ)配合物和柚皮苷-铜(Ⅱ)配合物;柚皮苷-铁配合物和柚皮苷-锌配合物对亚油酸的过氧化反应均表现出抑制作用,其中柚皮苷-铁配合物的抗氧化活性高于抗坏血酸,而柚皮苷-铜配合物对亚油酸过氧化反应表现出较大的促进作用.柚皮苷与铁盐或锌盐形成金属配合物后其抗氧化活性得到提高,不同柚皮苷-金属配合物具有不同的抗氧化活性.     

二次回归正交试验优化超声波辅助提取柚皮苷

以柚皮为原料,研究了超声波辅助提取柚皮中柚皮苷的工艺条件,在单因素实验基础上,通过二次回归正交试验优化了超声波辅助提取柚皮中柚皮苷的工艺条件。结果表明:柚皮中柚皮苷最佳提取工艺条件:料液比1∶26(g/mL),pH值11,乙醇浓度70%,超声波频率25kHz,提取温度60℃。在此条件下,柚皮苷提取率可达2.91%。     

比色法测定饮料中柚皮苷含量的研究

介绍了利用比色法测定橙汁饮料中柚皮苷的方法。柚皮苷与一缩二乙二醇反应显色,在420 nm波长下测定其吸光度,建立柚皮苷含量与吸光度的线性方程为D(λ)=3.473 2ρ+0.008 9,线性范围为0 g/L~0.24 g/L,r=0.998 9,平均回收率为97.49%,相对标准偏差为2.85%。该方法具有简便、快速、准确的特点,适用于含有此类物质饮料的检测。     

反胶团萃取柚皮苷的初步研究

反胶团萃取法是一种新型、高效的生物活性物质分离技术。通过五因素三水平的正交试验,研究反胶团体系中丁二酸-2-乙基己基酯磺酸钠(AOT)浓度、萃取pH、萃取离子强度、反萃取pH、反萃取离子强度对柚皮苷提取的影响。结果表明,萃取pH值和反萃取pH值对柚皮苷的反胶团萃取起着显著作用,因素作用的主次顺序为萃取pH值>反萃取pH值>萃取离子强度>AOT浓度>反萃取离子强度。最优提取条件为萃取pH4.0、反萃取pH10.0、萃取离子强度0.2mol/L、AOT浓度50.0mmol/L、反萃取离子强度0.5mol/L。柚皮苷的萃取率可达96.15%。     

几种树脂对柚苷的吸附作用研究

对5种大孔树脂进行了柚苷静态等温吸附、动态吸附、解吸和果皮柚苷提取液吸附试验。结果表明这五种树脂对柚苷的吸附和解吸性能良好，其中A、B、C3种树脂效果最佳，它们的单分子层的饱和吸附量分别是95．3mg／g，111．5mg／g和115．0mg／g，对浓度1mg／ml柚苷的无泄漏吸附量分别是34．7mg／ml，32．8mg／ml和37．5mg／ml。只需要2～3倍床体积的95％乙醇即可全部洗脱柚苷。它们可用于柚苷的回收和提纯，以及抽和葡萄柚汁的脱苦。     

新地奥明在抑制柑橘类果汁苦味中的应用

柠碱和柚苷是柑橘汁和柑橘类果汁中的主要苦味成分,本文综述了苦味形成机理和添加新地奥明(Neodiosmin)对柑橘类果汁的苦味成分的抑制作用。     

柑橘类果汁脱苦的研究进展

柑橘类果汁中苦味物质主要由柠檬苦素，柚皮苷等组成。对柑橘类果汁脱苦的代谢法、吸附法等9种方法进行了综述。     

胡柚汁热处理过程柚皮苷变化特性

采用高效液相色谱法(HPLC)进行定量分析,研究了加热温度和加热时间对胡柚汁中柚皮苷含量的影响。试验结果表明:加热时间一定,随着加热温度的升高,柚皮苷含量呈总体上升趋势,在75～90℃之间变化明显。时间试验中,加热15min时,胡柚汁中的柚皮苷含量达到最大值。优化试验显示,加热时间是影响胡柚汁热加工中柚皮苷变化的主要因素,加热温度次之,采用高温度短时间的热处理方式有利于控制胡柚汁中柚皮苷的含量。     

柚苷酶在柑桔果醋加工中的应用

在柑桔果醋加工中,利用柚苷酶进行脱苦实验,结果表明：发酵温度在25℃-28℃,酸度控制在0．5－0．8 /100mL,柚苷酶加量在15μ/mL,柚苷酶有较佳的活性;酒精度为6．0％－8．0％（V）时,有利于醋酸发酵,制得的果醋清亮透明,酸甜可口,果香明显,基本无苦味。     

酶促酯交换反应制备柚皮苷酯及其抑制HepG2细胞的增殖活性

本文研究了非水相条件下利用固定化脂肪酶~(IM)TL催化柚皮苷的酯交换反应,得到了一系列带有不同链长脂肪酸的柚皮苷酯。固定化脂肪酶~(IM)TL对反应显示出高催化活性,其底物转化率均达到90%以上。在4 mL叔戊醇体系中,50 mg ~(IM)TL酶,柚皮苷:酰基供体=1:20,50℃的条件下,反应3 h后,区域选择性达99%以上。在对柚皮苷酯进行液相分析、质谱和核磁鉴定后,发现酰化产物为柚皮苷-6’’-O-酯。研究发现柚皮苷酯的Clog P发现随着链长的增长而增加,其中柚皮苷肉豆蔻酯的Clog P值为6.50。HepG2细胞抑制实验的结果显示柚皮苷酯对HeG2细胞增殖的抑制活性与柚皮苷酯的脂溶性相关。相较于柚皮苷,柚皮苷酯对HepG2细胞具有更好的抑制增殖作用。带有长链脂肪酸的柚皮苷肉豆蔻酯具有更加良好的脂溶性,对HepG2细胞增殖抑制作用更强(2.28%)。以上研究表明酶促合成生成的柚皮苷酯比柚皮苷具有更广阔的应用前景。