反应萃取法分离水中L-色氨酸和L-赖氨酸

以分光光度计为检测手段,通过对二甲氨基苯甲醛法和茚三酮法联用,建立了一种测定L-赖氨酸和L-色氨酸混合水溶液中两种氨基酸的含量的方法。以二(2-乙基己基)磷酸为萃取剂、正辛醇为溶剂构成的溶剂萃取体系,研究了水中L-色氨酸和L-赖氨酸在有机相中萃取分配行为。结果表明:在pH为2.0时,水相中的L-赖氨酸经有机相两次萃取后可得到纯品,平均回收率为77.2%。负载于有机相中的氨基酸,用等体积的1mol/L HCl反萃,再调反萃液酸度至pH为2.0,重复上述操作一次,可得色氨酸纯品,其平均回收率为76.0%。     

葡萄糖/L-赖氨酸模拟体系非水相Maillard反应研究

使用热重分析仪测定了葡萄糖、L-赖氨酸及其混合物的热重特性,并用热重-固相微萃取-气相色谱-质谱( TG-SPME-GC-MS)联用系统测定了葡萄糖+L-赖氨酸混合物在5个温度段的热解产物,还研究了L-赖氨酸与葡萄糖的配比和空气流量对2-乙基-3,5-二甲基吡嗪和3,5-二乙基-2-甲基吡嗪产生量的影响.结果表明:①葡萄糖/L-赖氨酸模拟体系的反应活化能大大低于其各自的降解活化能.反应早期是一个吸热过程,135～245℃是Maillard反应产物的第一失重区,失重40％;②模拟体系热解产物中共鉴定出39种成分.100～250℃葡萄糖和L-赖氨酸体系非水相Maillard反应产物的以酮类、糠醛类为主,250 ～ 350℃产物主要为吡嗪、吡啶、吡咯、噁唑、咪唑等含N杂环化合物,其中重要的香味产物自150℃开始生成;③在空气流量200 mL/min以及葡萄糖和L-赖氨酸质量比1:1条件下,2-乙基-3,5-二甲基吡嗪和3,5-二乙基-2-甲基吡嗪的产生量最大.     

37℃下金属离子对模式体系Maillard反应的影响

为研究低温下金属离子对模式Maillard反应体系的影响,测试了D-葡萄糖与L-谷氨酸、L-苯丙氨酸、L-脯氨酸、L-赖氨酸、L-天门冬氨酸、L-丙氨酸在37℃,pH 6.5和/或添加Fe2+,Cu2+,zn2+,Mg2+,K+的条件下反应1～35 d的Maillard反应产物在420 nm处的吸光度.结果表明,在相同条件下,赖氨酸的反应活性是其他5种氨基酸的3-6倍;在金属离子作用下,除K+对脯氨酸与葡萄糖体系呈抑制作用外,其他各Maillard反应体系的棕色化程度均被催化增强.其中.Fe2+,Cu2+催化效果最好.     

赖氨酸营养强化米的工艺研究

使用L-赖氨酸盐酸盐作为赖氨酸营养强化剂,通过浸吸法对大米的赖氨酸进行强化。通过单因素和正交试验表明：在影响强化米中赖氨酸含量的几个因素中,对强化米中赖氨酸含量影响的大小次序为：L-赖氨酸盐酸盐浓度〉液料比〉浸吸时间〉浸吸温度。其中,L-赖氨酸盐酸盐浓度为非常显著影响因素,料液比、浸吸时间为显著影响因素。赖氨酸营养强化米优化后的工艺条件为：L-赖氨酸盐酸盐浓度0.5%、液料比1∶1、浸泡时间3h、浸吸温度35℃。在此条件下进行营养强化,强化米中赖氨酸含量达0.296%。     

双水相体系萃取分离L-组氨酸的研究

采用PEG-(NH4)2SO4双水相体系萃取分离L-组氨酸。实验考察了pH、温度、聚乙二醇加入量、L-组氨酸初始浓度、硫酸钠及L-赖氨酸的存在对萃取分离的影响。结果表明:L-组氨酸在该双水相体系的分配系数K随体系pH和聚乙二醇加入量的增大而减小,随着L-组氨酸初始浓度和L-赖氨酸加入量的增大而增大,而温度和Na2SO4的影响不明显;L-组氨酸在该双水相体系的萃取率η随体系pH和聚乙二醇加入量的增大而增大,随着L-组氨酸和L-赖氨酸加入量的增大而减小,而温度和Na2SO4的影响同样不明显。     

鸡蛋壳赖氨酸螯合钙的制备及其结构表征

为提高废弃鸡蛋壳的利用率,对鸡蛋壳赖氨酸螯合钙的制备工艺进行研究,并对其结构进行表征,以开发一种新型氨基酸生物钙制剂。本文以鸡蛋壳和L-赖氨酸为原料,赖氨酸螯合钙螯合率为指标,优化鸡蛋壳赖氨酸螯合钙的制备工艺。通过单因素试验和响应面试验,考察螯合反应时间、反应温度、溶液p H和L-赖氨酸与Ca Cl2摩尔比等因素对赖氨酸螯合钙螯合率的影响,优化确定最佳螯合工艺为:反应时间为49 min,反应温度为70℃,溶液p H为8.7,L-赖氨酸与Ca Cl2摩尔比为2:1。在此条件下,赖氨酸螯合钙螯合率为82.84%,较柠檬酸钙和谷氨酸钙螯合率分别高3.55%和1.72%。采用红外光谱、X衍射分析了鸡蛋壳赖氨酸螯合钙的结构,结果表明L-赖氨酸中的-NH2键和-COOH键均参与了螯合反应,L-赖氨酸中氨基上的N原子和羧基上的O原子均参与了反应,因此赖氨酸与钙形成了螯合物。     

离子交换法分离发酵液中ε聚L赖氨酸

研究了ε-聚L-赖氨酸发酵液前处理的工艺条件。以蛋白质和ε-聚L-赖氨酸浓度为指标,分别使用5mol/L氢氧化钠于p H8.5沉淀蛋白质和5ku的聚砜超滤膜进行超滤,达到了良好的去除杂蛋白的效果。同时探讨了离子交换法分离发酵液中ε-聚L-赖氨酸的工艺。以ε-聚L-赖氨酸吸附量为指标,采用静态吸附法选择合适的树脂:弱酸型HD-2阳离子交换树脂,其最大吸附量可达到28.8mg/g。     

赖氨酸发酵清液pH值对离子交换树脂吸附的影响

离子形态会对强酸性阳离子交换树脂的吸附能力及选择性产生影响,L-赖氨酸在不同pH值下存在4种离子形态,以不同pH值的赖氨酸发酵清液为试验对象,研究了在离子交换树脂吸附时树脂柱出口料液中赖氨酸含量、树脂柱吸附赖氨酸量、洗脱液纯度、98%硫酸消耗量的变化。试验结果表明:不同pH值的赖氨酸发酵清液上柱时,赖氨酸的收率、树脂柱吸附量没有明显不同,但pH值为4.5的赖氨酸发酵清液,经树脂柱后得到的洗脱液纯度最高,平均可达98.56%,而且调节pH值时浓硫酸消耗量较低。     

响应面法优化海湾扇贝壳赖氨酸螯合钙的制备工艺

为提高废弃扇贝壳的利用率,对扇贝壳制备赖氨酸螯合钙的工艺进行研究。以海湾扇贝壳和L-赖氨酸为原料,在一定条件下制备赖氨酸螯合钙,考察了反应温度、时间、L-赖氨酸与Ca~(2+)摩尔比例和pH对螯合产率的影响。在单因素的基础上进行响应面实验,确定螯合工艺为:反应温度63.4℃,反应时间34.0 min,L-赖氨酸与Ca~(2+)摩尔比例2.1∶1,pH为8.4。在此最优条件下,获得的产品螯合产率为82.16%,螯合物中的钙含量为9.58%。傅里叶红外光谱显示钙离子与L-赖氨酸发生了螯合反应,形成了Ca-N键和Ca-O键,有赖氨酸螯合钙的生成。     

发酵谷物中产L- 赖氨酸益生菌的筛选与鉴定

为了扩展高产L- 赖氨酸菌种在食品、饲料中的应用与提高微生物发酵生产L- 赖氨酸的安全性,从面包、麻花、馒头、发面饼、大列巴、黏豆包发酵谷物的生面团及米酒、白酒曲中分离培养出66 株产L- 赖氨酸益生菌菌株。将这些菌株进行培养、发酵,并利用高效液相色谱技术检测其发酵液中L- 赖氨酸的含量,筛选出发酵液富含L- 赖氨酸的菌种两株。最后利用16S rDNA 分析及Blast 分析、特异性引物PCR 技术鉴定出这两株菌为肠膜明串球菌ATCC 8293 和德氏乳杆菌ATCC BAA-365。其发酵液中L- 赖氨酸含量分别为52.33、46.09g/L,较其他菌种相对较高。     

一株产L-赖氨酸菌株发酵培养基的响应面优化

本试验优化了一株黄色短杆菌HXLl09的发酵培养基以提高L．赖氨酸的产量。在研究葡萄糖、硫酸铵、豆饼水解液、KH2P04·3H20、MgS04·7H20、FeS04·7H20、MnSO4·H2O4＋单因素实验的基础上,DesignExpert软件的Box-BehnkenDesign（BBD）建立响应面模型。结果表明：HXL109最佳产酸条件为：葡萄糖89.48g／L,豆饼水解液30．77g／L,硫酸铵20．89g／L,KH2P04·3H204．5g／L。在此条件下L．赖氨酸的产量为142．65g门L,与预测值（143．67g／L）吻合度较高。通过发酵对比实验可见,用响应面分析法对该L-赖氨酸产生菌发酵培养基进行优化,可获得最佳的工艺条件。     

PITC柱前衍生反相高效液相色谱法测定维生素功能饮料中L-赖氨酸和牛磺酸的含量

建立反相高效液相色谱法检测维生素功能饮料中L-赖氨酸和牛磺酸的含量的分析方法。维生素功能性饮料中的L-赖氨酸和牛磺酸通过苯异硫氰酸酯(PITC)柱前衍生,生成有紫外响应的氨基酸衍生物苯胺基硫甲酰氨基酸(PTC-氨基酸),PTC-氨基酸经RP-HPLC梯度洗脱后检测维生素功能饮料中L-赖氨酸盐酸盐和牛磺酸的含量。使用ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6×150mm 5-Micron),流动相A为0.1mol/L的乙酸钠溶液,流动相B为乙腈;流速为1.0mL/min;检测波长为254nm;柱温27℃;进样量20μL。牛磺酸和L-赖氨酸在线性范围内相关系数r0.999,回收率大于97.6,日内RSD分别为0.54%和0.46%(n=6)。结果表明本方法操作性强、灵敏度高,适用于维生素功能饮料中牛磺酸和L-赖氨酸的检测。     

300m3赖氨酸发酵罐搅拌系统改造

以加强传质混合为目的提出300m3赖氨酸发酵罐搅拌系统改造方案,采用计算流体力学(CFD)数值模拟方法分析了搅拌系统轴功率、流型、传质混合能力,成功指导了搅拌系统改造,在电流增大的情况下,平均单罐产量提高2.44t,平均糖酸转化率提高约1个百分点.     

耐酸酒精酵母的诱变选育研究

以耐酸性酒精酵母A3为出发菌株,对其原生质体进行紫外线（UV）与亚硝基胍（NTG）复合诱变,利用三级筛选模式,筛选出一株高产突变菌株UN1-81。该菌株在发酵结束后,酒精度达到11.17%vol,比出发菌株提高了16.47%以上,且经过20次传代培养,酒精产量稳定。     

在线固相萃取富集-高效液相色谱法快速测定花生中白藜芦醇

建立了简便、快速测定花生中白藜芦醇的在线固相萃取富集-高效液相色谱法。固相萃取富集柱填料为dsDNA,在线固相萃取富集过程的上样溶剂为纯水,淋洗溶剂为纯水,转移溶剂为乙腈-水（80：20,V/V）,分析测定溶剂为乙腈-水（25：75,V／V）。本方法对白藜芦醇检测的线性方程为Y=1843．805X＋39．1791,相关系数为0．99978;检出限（LOD）为0．004mg／kg;定量限（LOQ）为0．01mg／kg;基质4个水平添加回收率（n=6）在92．48％-107．98％;6次加标回收相对标准偏差（RSD）在0．19％～6．05％。     

乙二醛改性支链状阳离子聚丙烯酰胺的合成及其对纸张增强性能的研究

以N-羟甲基双丙烯酰胺(NMA)为交联性单体、2-巯基乙醇为链转移剂,以过硫酸铵和亚硫酸氢钠(mAPS∶mNaHSO3=1∶2)组成氧化还原引发体系引发丙烯酰胺(AM)、阳离子单体甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵(DMC),进行水溶液自由基共聚合反应,制备了支链状阳离子聚丙烯酰胺(CPAM)。然后用乙二醛对合成的CPAM进行改性,制备了乙二醛改性的阳离子聚丙烯酰胺树脂(GPAM)。结果表明:当丙烯酰胺用量为55%、NMA用量为8%、2-巯基乙醇用量为1.0%、DMC用量为5.5%、引发剂用量为0.5%(wt)、乙二醛用量为30%(wt)、改性温度为60℃、改性时间为140min时,产物的增强效果较好。当用量为0.3%时,纸张的干抗张指数提高了24.6%,湿抗张指数提高了381%。并用红外光谱(FT-IR)和核磁共振氢谱(1H-NMR)对产物的结构进行了表征。     

羟基酪醇的抗氧化作用

目的:研究羟基酪醇(HT)对过氧化氢(H2O2)诱导人胚肾293(HEK-293)细胞氧化性损伤的保护作用。方法:以HEK-293细胞为靶细胞,分为空白对照组、H2O2损伤组(20μM)、HT低浓度(12.5μM)、中浓度(25μM)、高浓度(50μM),对H2O2损伤组预处理1h。用免疫组化方法检测细胞内8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的表达水平;采用荧光探针2’,7’-二氢二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)检测细胞内活性氧类(ROS)水平;以荧光法检测细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)水平。结果:与空白对照组比较,H2O2损伤模型组细胞内8-OHdG的表达升高、ROS水平增加、GSH水平下降(P<0.05,P<0.01)。HT预处理后HEK-293细胞内8-OHdG的表达明显降低,ROS水平降低,GSH水平升高。结论:HT通过抗氧化作用抑制细胞DNA的氧化性损伤,减轻H2O2对HEK-293细胞的损伤作用,从而产生保护作用。     

壳聚糖丙烯酰胺接枝共聚物的制备及其与Fenton氧化法联合处理麦草浆中段废水

以硝酸铈铵为引发剂,合成了壳聚糖丙烯酰胺接枝共聚物（CAM）;结果表明,当m（丙烯酰胺）∶m（壳聚糖）=3∶1,c（硝酸铈铵）=3 mmol/L,反应温度为60℃时,合成的CAM接枝率达到239.4%,单体转化率达到79.83%;将其与Fenton试剂联用,可处理麦草浆中段废水。Fenton氧化预处理的最佳工艺为：ρ（H2O2）=2 g/L,m（H2O2）∶m（FeSO4）=2∶1,pH=4,处理时间为60 m in。絮凝阶段处理的最佳工艺为：ρ（CAM）=10 mg/L,在此条件下,处理后麦草浆中段废水CODCr去除率达82.38%,浊度去除率达到98.53%。     

大豆对SMV1号株系的抗性遗传分析及抗病基因的SSR标记

利用杂交组合合丰25（S）×东农93-046（R）的F1、F2和F2∶3群体进行了抗病性鉴定,结果表明：F1在接种后表现抗病,F2群体分离比例为3（抗）∶1（感）,对F2衍生的F2∶3家系接种鉴定,纯合抗病家系、抗感分离家系和纯合感病家系的比率符合1∶2∶1,表明东农93-046对SMV1号株系的抗性由一对显性基因（RSMV1）控制。并利用东农93-046（R）×Conrad（S）的正反交组合F2进行抗性鉴定,结果正反交后代均表现为3∶1的分离比例,无细胞质效应,进一步证明了东农93-046是受一对基因控制的抗性种质。经改良的分离群体组群分析法研究发现,东农93-046抗SMV1的位点（RSMV1）位于F连锁群上,与SSR标记的连锁顺序为HSP176、Satt114、RSMV1、Satt510、Sct_033、Satt334、Satt362,标记与RSMV1之间的遗传距离分别为10.9cM、4.3cM、6.6cM、11.7cM、18.0cM和35.3cM。根据标记HSP176选择基因型纯合和杂合的抗病植株,其符合率分别达到100.0%和94.5%。     

淀粉接枝苯乙烯-丙烯酸酯表面施胶剂的制备及应用

通过自由基聚合反应,在淀粉分子链上接枝苯乙烯（St）、丙烯酸丁酯（BA）和N-羟甲基丙烯酰胺（HMAM）单体,合成了一种淀粉接枝表面施胶剂。探讨了过硫酸铵、引发剂和单体用量对施胶效果的影响。结果表明,其最佳合成工艺条件是：过硫酸铵用量为5%,m（FeSO4）/m（H2O2）为0.03,m（单体）/m（淀粉）为2,m（St）/m（BA）为3,HMAM用量为3%。当施胶浓度为0.09%,硫酸铝用量为0.3%时,施胶度可达60s。