响应面法优化Bacillus subtilis抗菌脂肽发酵工艺条件

为了提高枯草芽孢杆菌抗菌脂肽(Surfactin)发酵产量,利用单因素分析、响应面法对菌株发酵工艺条件进行优化。单因素分析显示,培养时间、温度和转速对菌株的抗菌脂肽产量有显著影响(P0.05);响应面法优化得到最优发酵工艺条件为培养时间39 h、温度31℃、转速173r/min、接种量5%、装液量100 m L/250 m L。在最优发酵条件下,抗菌脂肽粗提物产量达到2.54g/100 m L(湿重),是优化前产量的1.6倍。     

不同提取方法对金华火腿粗肽液抗氧化活性的影响

研究两种提取方法(磷酸盐和盐酸)所得金华火腿粗肽液的抗氧化活性,以自由基的清除能力,金属离子螯合能力,还原力以及总抗氧化能力为测定指标,以还原型谷胱甘肽(GSH)作对照。结果表明:磷酸盐法提取的金华火腿粗肽液(P)多肽含量显著(p0.05)高于盐酸法提取的金华火腿粗肽液(H);质量浓度低于5mg/m L时,P和H清除DPPH自由基与超氧阴离子自由基能力无显著差异;P螯合金属离子的能力显著(p0.05)高于H和GSH;当质量浓度为4mg/m L时,P还原力显著(p0.05)高于H;当质量浓度为1mg/m L时,P总抗氧化能力达到GSH的48%,显著高于H(p0.05)。因此磷酸盐所提取的金华火腿粗肽液抗氧化能力优于盐酸所提取的金华火腿粗肽液。     

诺邓火腿粗肽抗氧化活性及亚硝酸钠清除活性

以诺邓火腿为研究对象,提取诺邓火腿粗肽,测定不同质量浓度粗肽液对羟自由基(·OH)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的清除效果、Fe~(2+)螯合能力、脂质氧化抑制能力及普通条件和模拟胃液条件下对亚硝酸钠的清除能力。结果表明:质量浓度为5.0 mg/m L的诺邓火腿粗肽液对·OH和DPPH自由基的清除率分别为47.81%和67.10%,与相同质量浓度的谷胱甘肽(glutathione,GSH)相比差异极显著(P0.01);质量浓度为5.0 mg/m L的粗肽液对Fe~(2+)的螯合率为31.38%,与GSH相比差异不显著(P0.05);质量浓度为25.0 mg/m L的粗肽液反应结束后144 h时的脂质氧化抑制率达77.86%,与GSH相比差异极显著(P0.01);普通条件和模拟胃液条件下,质量浓度为10.0 mg/m L的粗肽液对亚硝酸钠的清除率分别为(84.31±0.77)%和(80.97±2.00)%,与GSH相比差异极显著(P0.01)。综上所述,诺邓火腿粗肽液具有一定的抗氧化活性和脂质氧化抑制能力,同时具有较强的亚硝酸钠清除活性。     

白酒黄水中提取乳酸链球菌素的研究

对大孔吸附树脂粗提取白酒黄水中乳酸链球菌素的条件进行了研究,结果表明,各个因素对粗提取效果影响大小的顺序为树脂添加量提取温度提取时间转速。乳酸链球菌素最适合粗提取条件为:树脂添加量1.5%,提取温度50℃,提取时间24 h,转速150 r/min,粗提取物效价为572.02 IU/m L。     

迷迭香提取物抗氧化作用及其对果蝇寿命的影响

目的:探究迷迭香提取物(RE)的抗氧化能力及其作用机制。方法:以2 d龄Oregon K野生型雄性果蝇为试验模式生物,饲喂添加不同质量浓度(0,0.2,0.5,1.5 mg/m L)迷迭香提取物的培养基,采用生存试验与急性试验研究迷迭香提取物对果蝇寿命的影响;测定果蝇体内超氧化物歧化酶(SOD)与过氧化氢酶(CAT)活力及氧化产物丙二醛(MDA)的含量;用Real time-PCR法测定果蝇体内抗氧化基因SOD、CAT、MTH(Methuselah)m RNA表达量的变化。结果 :给予迷迭香提取物后,果蝇的平均寿命及最高寿命较空白对照组均明显延长,SOD、CAT酶活力及其基因m RNA表达水平显著升高(0.5,1.5 mg/m L,P0.05),MDA含量极显著下降(P0.01),同时MTH m RNA表达水平呈下调趋势(P0.05)。结论 :迷迭香提取物延缓衰老与抗氧化的作用可能通过上调内源性抗氧化酶来实现。     

黑豆种皮中原花青素的提取和纯化研究

本文主要研究黑豆(Phaseolus vulgaris)种皮中原花青素的提取和纯化方法。通过使用超声波辅助提取法粗提原花青素(Procyanidins,PC),以AB-8型大孔树脂吸附法纯化粗提物,并对纯化产物进行了红外色谱定性分析。单因素提取实验结果显示:提取条件分别在乙醇的浓度为60%,提取时间在40 min,料液比为1:20以及提取温度为50℃时提取效率相对较高。随后正交试验结果显示了最优综合提取条件为:乙醇浓度为60%、提取时间为50 min、料液比为1:20(m/V)、提取温度为60℃;确定了AB-8型大孔树脂纯化工艺的最佳动态吸附和解析条件为:以0.6 mg/m L的原花青素粗提液为上样液质量浓度,流速为1.0 m L/min,吸附平衡时间为4 h,60%的乙醇溶液作为洗脱液,洗脱流速1.5 m L/min,解析时间为3 h;且红外光谱定性分析显示以上条件纯化原花青素相对有效。     

L-蛋氨酸对发酵干酪用嗜热链球菌生长及代谢的影响

为研究嗜热链球菌KLDS 3.0501降解L-蛋氨酸产生含硫风味物质(VSC)过程中的代谢情况,采用气-质联用法(GC-MS)、连续监测法及GB/T5009.124-2003《食品中氨基酸的测定》中的方法,分析L-蛋氨酸对KLDS 3.0501生长和代谢的影响。结果表明:培养24 h后,产生甲硫醇(11.59%);培养48 h后,产生二甲基二硫(0.25%),同时甲硫醇相对含量减少至9.49%。胱硫醚裂解酶(C-S lyase)的比活力为(51.15±2.00)m U/mg。当培养基中不含L-蛋氨酸时,对数期至5 h,稳定期KLDS 3.0501酸化速率p H为0.45±0.04a;增加L-蛋氨酸质量浓度(2.0 g/L)能延长对数期至6 h,且随L-蛋氨酸质量浓度的增加,稳定期菌体的酸化速率显著加快(P0.05)。在整个生长期间,消耗量较大的是脯氨酸、天冬氨酸、亮氨酸(0.3 g/L),其次是缬氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸等(0.15~0.3 g/L),甘氨酸、组氨酸、赖氨酸、精氨酸消耗量最低(0.15 g/L)。KLDS 3.0501可作为干酪生产的发酵剂菌株,并在后熟期间形成其独特的风味。     

紫色甘薯醇提物抗疲劳机制研究

为了研究紫色甘薯醇提物的抗疲劳效应,设计小鼠运动耐力实验,检测小鼠血液生化指标和小鼠骨骼肌核蛋白PGC-1α蛋白表达的影响。结果显示,20mg/m L、10mg/m L组小鼠的运动耐力有显著性延长(P<0.01),表明紫色甘薯醇提物可以提高肌肉的耐力。生化检测结果表明,10mg/m L、20mg/m L组能降低血清尿素、丙二醛、血乳酸的含量(P<0.05),能显著增加肝糖原存储量(P<0.01),显著提高总超氧化物歧化酶的活性(P<0.01)。Western Blot检测结果显示,静止状况下,PGC-1α表达提高了3%;运动状况下,PGC-1α表达提高了6.81%。实验结果表明,紫色甘薯醇提物能提高小鼠体内抗氧化能力,增加糖原含量,降低代谢产物累积,提高PGC-1α蛋白表达来提高小鼠体内能量代谢,达到抗疲劳能力。     

大孔离子交换树脂对菊粉纯化效果的研究

采用树脂法对菊粉粗提液进行脱色、脱蛋白研究。通过静态和动态筛选实验,得出D280与D151两种离子交换树脂组成的串联树脂对菊粉粗提液脱色、脱蛋白效果最好。结果表明:最佳脱色、脱蛋白条件为树脂m(D280)∶m(D151)=2∶1,p H为6.5,流速为3.19m L/min,在此条件下树脂纯化菊粉粗提液的最大体积为28.3m L/(g树脂),粗提液的脱色率、脱蛋白率、菊粉保留率分别为90.1%、88.9%、96.8%。     

利用体外发酵模型研究叶绿素对儿童肠道菌群的影响

通过不同年龄儿童粪便的体外发酵,研究叶绿素的生物代谢及对肠道菌群的影响,探明其生物活性,明确摄入绿叶蔬菜的健康意义。体外发酵试验菌群测序分析结果表明:叶绿素降低了儿童肠道菌群的多样性,添加叶绿素体外发酵24 h后,2岁儿童菌群多样性指数由2.6～3.2降至2.4～2.7,5岁儿童菌群多样性指数由2.5～2.8降至1.8～2.4。属水平上,柯林斯菌属、双岐菌属相对丰度降低,乳酸菌属的相对丰度升高。菌群代谢物检测结果表明,叶绿素促进同年龄儿童粪便代谢物乳酸、乙酸水平的增加,说明叶绿素具有一定的生物活性,影响肠道菌群组成及其代谢产物含量的变化。     

灵芝栽培菌丝多糖的提取优化、表征和生物活性分析

从食药用菌灵芝的栽培菌丝中提取一种粗多糖,并优化提取工艺,对粗多糖进行表征,分析其生物活性。结果表明:最佳实践工艺为反应时间4 h、反应温度60℃、液料比为20:1,粗多糖提取率为(6.50±0.16)%。菌丝粗多糖具有α-和β-2种葡聚糖构型,对正常肝细胞无毒副作用,同时可以有效抑制黑色素瘤细胞的进一步增殖(P0.01)、胃癌细胞组和乳腺癌细胞组也有类似效应(P0.05),表明菌丝粗多糖确实具有抑制某些癌细胞增殖的生物活性。     

枯草芽孢杆菌CCTCC M207209对食源性病原菌的抑制作用

采用杯碟法、对峙培养法和平板对扣法分别检测了枯草芽孢杆菌CCTCC M207209的活菌菌碟、无菌体发酵液、多糖提取液、蛋白质粗提液及其挥发性气体产物对金黄色葡萄球菌、肠球菌、化脓链球菌、大肠杆菌、沙门氏菌等食源性病原菌的抑制作用。结果表明,枯草芽孢杆菌CCTCC M207209的活菌菌碟和发酵液对所有参试病原菌均有显著抑制作用;蛋白质粗提液对除化脓链球菌以外的所有病原菌有显著抑制作用;挥发性气体产物对所有病原菌均无抑制作用;所有抑菌活性物质对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强,初步确定其为蛋白类物质。     

桑葚粗提液对壬基酚诱导大鼠焦虑行为的干预作用及其机制

目的:探讨桑葚粗提液对壬基酚染毒大鼠焦虑行为的干预效果。方法:48只SPF级SD大鼠随机分为正常对照组(玉米油)、桑葚对照组(桑葚粗提液,按多酚含量计,120 mg/kg)、壬基酚染毒组(270 mg/kg)、桑葚粗提液低、中、高剂量干预组(壬基酚灌胃剂量均为270 mg/kg,桑葚粗提液干预剂量分别为30、60和120 mg/kg),利用旷场实验(OFT)和高架十字迷宫(EPM)来观察桑葚粗提液对壬基酚染毒大鼠焦虑行为的影响,并用ELISA试剂盒检测单胺类神经递质5-羟色胺、多巴胺、去甲肾上腺素水平和单胺氧化酶活性。结果表明,高剂量干预组大鼠在旷场实验中进入中央区域距离、进入中央区域的次数以及在高架十字迷宫实验中进入开臂时间百分比和进入开臂次数百分比均显著高于染毒组(p0.05)。与壬基酚染毒组相比,高剂量干预组大鼠下丘脑5-羟色胺和多巴胺水平,中剂量干预组大鼠下丘脑多巴胺水平显著下调(p0.05),而且高剂量干预组还明显上调单胺氧化酶的活性(p0.05)。同时随着干预剂量的增加,去甲肾上腺素水平逐渐降低但并无显著性差异。结论:桑葚粗提液降低壬基酚所致焦虑大鼠下丘脑5-羟色胺、多巴胺、去甲肾上腺素水平,其作用机制可能与上调下丘脑单胺氧化酶的活性有关。     

紫甘薯提取物对高脂饲喂果蝇的抗氧化作用机制

目的:探究紫甘薯提取物(Purple sweet potato extract,PSPE)对高脂膳食饲喂果蝇寿命的影响及其作用机制。方法:2天龄雌性果蝇随机分为5组,正常组培养于普通培养基中,高脂组于添加10%猪油的高脂培养基中培养,实验组分别在添加PSPE 0.5、1.0、2.0 mg/m L的高脂培养基中培养,每3天更换新鲜培养基,统计果蝇存活率,并计算果蝇平均寿命及最高寿命。测定果蝇体内相关抗氧化酶活力及其基因表达水平。结果:PSPE可以明显延长果蝇的平均寿命及最高寿命。1.0mg/m L PSPE能够显著升高果蝇体内铜锌超氧化物歧化酶(Cu-Zn-superoxide dismutase,Cu-Zn-SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活力(P0.05),降低丙二醛(malonaldehyde,MDA)及蛋白质羰基(Protein carbonyls,PCO)含量(P0.01);0.5 mg/m L PSPE显著升高果蝇Cu-Zn-SOD、Mn-SOD以及CAT m RNA表达水平(P0.05),2.0 mg/m L剂量组显著升高果蝇Cu-Zn-SOD及Nrf2 m RNA(P0.05)表达水平。结论:PSPE能够有效增强果蝇体内的抗氧化能力,延长果蝇寿命,其作用机制可能与升高内源性抗氧化基因的表达有关。     

芦荟粗提液对红富士苹果常温贮藏保鲜的影响

为了研究芦荟粗提液对红富士苹果常温贮藏条件下保鲜及生理的影响,采用黄酮含量分别为0.02,0.035,0.05 mg/m L的芦荟粗提液浸泡5 min,然后装入厚度为0.03 mm的苹果专用保鲜袋中常温【20±1℃】贮藏。以清水浸泡为对照。试验结果表明:芦荟粗提液处理能够较好地抑制苹果贮藏过程中呼吸强度和乙烯释放量,降低呼吸和乙烯峰值,有效延缓相对电导率和丙二醛含量的上升。同时在一定程度上诱导了过氧化物酶、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性的增加,增强了果实自身的抗逆性。芦荟粗提液处理能够较好地抑制红富士苹果常温贮藏期间的生理变化,降低膜脂过氧化程度,对保持果实品质、缓后熟衰老具有较好的作用。以黄酮含量为0.05 mg/m L的芦荟粗提液处理效果最好。     

五味子醇提残渣中粗多糖的免疫活性研究

目的:研究五味子醇提残渣中粗多精对小鼠免疫活性的影响.方法:采用热水浸提法从五味子醇提残渣中提取粗多糖.注射环磷酰胺(CTX)造成小鼠免疫功能低下模型,观察五味子粗多糖对小鼠腹腔吞噬功能、血清溶血素水平的作用.结果:北五味子脱蛋白粗多糖能极显著增强腹腔巨噬细胞吞噬功能(p＜0.001),未脱蛋白粗多糖能显著增强腹腔巨噬细胞吞噬功能(大剂量组P＜0.01、小剂量组P＜0.05),而南五味子粗多糖只有大剂量组能增强腹腔巨噬细胞吞噬功能(吞噬指数P＜0.05),并呈一定的量效关系.南、北五味子粗多糖大、小剂量组能显著提高小鼠血清溶血素水平(p＜0.01).结论:五味子醇提残渣中粗多糖具有较好的免疫增强作用.     

黄芪多糖和皂苷综合提取工艺研究

采用L_9(3~4)正交试验法,先探究料液比、提取温度、提取时间和提取次数对醇提皂苷效果的影响,再探究料液比、提取温度、提取时间和提取次数对水提多糖效果的影响,确定了最优的黄芪皂苷和多糖的综合提取工艺。得出最佳优化工艺为先用75%乙醇以料液比1∶10(g/m L),提取温度70℃,提取时间2 h,提取3次,醇提后药材经烘干处理后再用纯水以料液比1∶6(g/m L),提取温度100℃,提取时间2 h,提取2次。     

壳聚糖对竹荪水提液中镉的去除及其机理研究

为探讨壳聚糖对竹荪水提液中镉的去除及其去除机理。以竹荪水提液为研究对象,利用壳聚糖吸附其中的镉,以镉吸附率和粗多糖保留率作为指标,在单因素的基础上,进行p H、壳聚糖添加量、吸附温度和吸附时间的四因素三水平正交实验,并探究了壳聚糖吸附前后的竹荪水提液中镉形态的变化。结果表明:最佳吸附条件为:p H7.0、壳聚糖添加量0.35 g/100 m L、吸附温度70℃、吸附时间2.5 h,在此条件下,镉吸附率为63.8%,粗多糖保留率为85.6%,镉含量达到食品安全标准限量的要求;形态分析结果显示壳聚糖主要吸附竹荪水提液中游离态、无机态和稳定态的镉。表明壳聚糖对竹荪水提液中镉具有较好的吸附效果,且对功效成分粗多糖的影响较小。     

山楂、决明子及其配伍的降血脂作用

为研究山楂、决明子及其配伍加入香肠中对小鼠脏器指数和血脂水平的影响,以小鼠为研究对象,饲喂基础饲料及分别添加了30％的普通香肠、山楂香肠(3％山楂粗提液)、决明子香肠(2％决明子粗提液)、配伍香肠(3％山楂粗提液+2％决明子粗提液)的饲料.结果表明:香肠中添加山楂、决明子及其配伍均能显著(P＜0.05)降低小鼠的肾脏指数,极显著(P＜0.01)降低小鼠的肝脏指数;极显著(P＜0.01)降低低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量,极显著(P＜0.01)升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量;香肠中添加山楂能显著(P＜0.05)降低总胆固醇(TC)的含量,香肠中添加配伍能极显著(P＜0.01)降低甘油三酯(TG)的含量.而香肠中添加了山楂、决明子及其配伍对小鼠的心脏指数、脾脏指数和腹腔脂肪重量则无显著(P＞0.05)影响.表明香肠中添加山楂、决明子及其配伍能减少脂肪在肝脏、肾脏的沉积、并降低血脂水平,以配伍组效果最佳.     

牛磺酸和FK506对HepG2细胞胆固醇水平的影响

目的:以总胆固醇(Total cholesterol,TC)、游离胆固醇(Free cholesterol,FC)和胆固醇酯(Cholesterol ester,EC)为评价指标,探讨牛磺酸对FK506诱导肝癌细胞Hep G2细胞胆固醇水平代谢异常的影响。方法:首先建立损伤模型,加终浓度为1、5和10μg/m L的FK506,分别在培养24、48 h后测定细胞存活率以及胞内TC、FC和EC水平,确定FK506处理的终浓度;在此基础上,再添加终浓度为0.1、1、10和20 mmol/L的牛磺酸,分别培养24、48 h,测定细胞内TC、FC和EC水平。结果:培养24、48 h,5和10μg/m L FK506处理都使细胞TC、FC水平明显升高(p0.05),EC水平没有明显变化,但10μg/m L FK506作用48 h时,细胞存活率显著下降到70%,因此确定FK506处理的终浓度为5μg/m L。在FK506(5μg/m L)预处理6 h后,0.1、1、10和20 mmol/L的牛磺酸作用24、48 h都可显著降低FK506诱导的细胞TC、FC水平升高(p0.05),但作用24 h的效果优于48 h,以20 mmol/L作用24 h降胆固醇效果最佳。结论:FK506通过增加FC诱导Hep G2细胞胆固醇水平升高,而牛磺酸通过降低FC改善了细胞高胆固醇水平。