测试片法在食品菌落总数检测中的应用研究

目的探究菌落总数测试片法检测食品中菌落总数的可行性。方法用菌落总数测试片法和国家标准方法同时对制备的菌悬液、自然污染食品样品和人工污染食品样品的菌落总数进行检测,采用t-检验分析2种方法检测结果的差异,采用Pearson相关分析确定2种检测方法之间的相关性。结果菌悬液和自然污染食品样品菌落总数测试片法的变异系数为0.16%~3.76%,人工污染食品样品的变异系数为0.78%~8.61%;菌落总数测试片与国家标准方法在不同类型食品样品检测结果之间没有显著性差异(P<0.05),2种方法的检测结果呈正相关(r2>0.976,P<0.001)。结论菌落总数测试片法的检测效果与国家标准方法相当,可作为替代方法,用于检测食品中的菌落总数。     

流式细胞技术检测酸性饮料中菌落总数的研究

利用流式细胞技术(Flow Cytometry,FCM)检测酸性饮料(pH<4.6)中的菌落总数并与平板法和滤膜法进行比较分析,建立FCM快速检测酸性饮料中菌落总数的方法。选择13种常见实验菌株,通过人工加菌实验进行验证。结果表明,基质和含菌量对FCM法的检测结果影响较大,酸性饮料中的部分菌株难以直接被FCM法检出,需经过滤富集菌于中性TSB肉汤中36 ℃培养22 h排除基质和含菌量低的影响,培养后的菌溶液经FCM法与平板法检测结果均在一个数量级。运用AOAC官方分析方法对酸性饮料中不同浓度13种实验菌株滤膜法和增菌22 h后FCM法的定性检测结果进行统计学分析,卡方值X2<3.84,同时假阴性率=1.9%<2%,假阳性率=4.2%<9.6%,说明FCM法可替代滤膜法进行酸性饮料中菌落总数的定性检测,用于产品的快速放行。     

采用ATP生物发光法分析6株常见细菌ATP含量差异

以ATP生物发光法为基础,辅以国标平板计数法,分析和测定了大肠埃希氏菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、乳酸链球菌、乳酸片球菌等6株常见细菌中ATP含量的差异。结果显示:当单位体积菌悬液的ATP荧光值相同时,6株细菌菌落总数无明显差异;当菌悬液的菌落总数相同时,6株细菌的单位体积菌悬液ATP含量无明显差异。研究结果同时说明ATP生物发光法能够定量测定常见区域中的细菌总数。     

婴幼儿辅食中细菌总数及蜡样芽孢杆菌污染情况分析

通过平板菌落计算法和最大近似值（MPN）法检测市售婴儿辅食中细菌总数和蜡样芽孢杆菌污染情况,并对MPN法得到的疑似蜡样芽胞杆菌进行基因间隔序列（ITS）插入性序列分析和形态鉴定。结果表明,101份样品中只有30份样品菌落总数达标,合格率仅为29.7%,部分超标产品的细菌总数达105CFU/g~106CFU/g。市售3种婴幼儿辅食-米粉、奶伴侣和面条中细菌总数及食源性致病菌蜡样芽孢杆菌检出情况不容乐观。     

ATP生物发光法快速检测电子烟雾化液菌落总数

利用三磷酸腺苷(ATP)生物发光法建立快速检测电子烟雾化液微生物菌落总数的方法并进行优化,与国家标准微生物检测方法进行对比分析。结果表明:(1)ATP荧光检测仪的最优检测温度为25℃,反应时间为30s,ATP检出限为2.36×10~(-12) mol/L,RSD为3.5%~8.2%,加标回收率为97%~108%;(2)滤膜过滤富集检测可实现低活菌数样品的检测,混合纤维素酯滤膜的富集检测效果优于聚碳酸酯滤膜和醋酸纤维滤膜,富集后检测ATP生物荧光的相对光度值与富集前活菌总数具有良好的对数线性相关关系(r~20.96);(3)采用ATP检测方法估算的活菌总数结果与平板计数检测结果没有显著性差异(P0.05),对电子烟雾化液的卫生情况评价结果一致。ATP生物发光检测方法可快速计算电子烟雾化液菌落总数,对于电子烟安全卫生风险评估具有建设意义。     

凝胶型菌落总数测试片的研制

本文以脑心浸液（BHI）肉汤为营养组分,以黄原胶与卡拉胶两种冷水可溶凝胶作为复合凝胶,研制出可应用于食品微生物菌落总数检测的凝胶型测试片。通过正交试验确定测试片培养基附加组分最优添加组合,并试验了两种凝胶不同复配比例对理化及微生物结果的影响,最终确定测试片培养基组分为BHI 38.5 g/L,TTC 0.008 g/L,SAP 0.05 g/L,丙酮酸钠2.0 g/L,且黄原胶与卡拉胶比例为8:2时,测试片达到最优性能。本文研制的菌落总数测试片,与国标平板计数方法相比,两种方法线性相关性达到0.99以上,测试片检出限可达2 CFU/mL,灵敏度达到100%;与行业主流产品3M Petrifilm菌落总数测试片相比,定量结果无明显差异,R2达到0.99。本文所研制的凝胶型菌落总数测试片可应用于食品中菌落总数的检测。     

3种不同培养基和1种测试片检测水溶性化妆品中菌落总数的结果分析

目的使用t检验法分析3种不同培养基和1种测试片检测水溶性化妆品中菌落总数结果。方法参照《化妆品安全技术规范》(2015年版),使用卵磷脂吐温80营养琼脂、TTC营养琼脂、平板计数琼脂方法进行样品菌落总数检测,然后使用Petrifilm TM菌落测试片检测样品。运用配对t检验法评价4种不同方法对水溶性化妆品中菌落总数计数结果一致性的影响。结果在10~2、10~3 CFU/m L 2种不同浓度,平板计数琼脂法结果波动性最大,无法抑制菌落蔓延,而TTC营养琼脂和菌落测试片相对卵磷脂吐温80营养琼脂,具有抑制菌落蔓延生长、提高计数结果准确性的作用。结论在一定浓度下,可根据实际情况来选择相应培养基检测水溶性化妆品中菌落总数以提高检测效率和质量。     

基于测试片法与平板计数法对不同类型食品中菌落总数结果的比较分析

目的比较菌落测试片法与平板计数法在不同类型食品中菌落总数测定结果的差异。方法在市面上随机抽取生肉制品、鲜奶制品、豆制品、粮食制品、冷冻饮品、坚果籽实、即食果蔬制品共112批,同时按菌落测试片法和平板计数法进行菌落总数测定,并对计数结果进行统计学分析。结果菌落测试片法与平板计数法的测定结果对数值差值的平均值|d log|= 0.06(<0.5),配对t检验P=0.860(>0.05)。结论菌落测试片法与平板计数法对上述7种类型的食品菌落总数测定结果无显著性差异,菌落测试片法可用于上述食品的菌落总数测定。     

AOAC PetrifilmTM菌落总数测试片法与食品中菌落总数测定国标方法的比较研究

目的:确证AOAC 990.12PetrifilmTM菌落总数测试片计数食品中菌落总数的检测性能.方法:对AOAC990.12 PetrifilmTM菌落总数测试片法与国家标准GB4789.2菌落总数测定法进行比较实验.在20个政府机构和食品企业实验室,对生肉、熟肉、水产品、调味品、冰激凌、原奶、奶粉和豆制品等8大类845份食品样品进行了测定.结果:AOAC 990.12PetrifilmTM方法与国标GB4789.2法检测8类食品样品的菌落总数测定结果的P值均大于0.05,无显著性差异.结论:使用AOAC 990.12PetrifilmTM菌落总数测试片法检测食品中的菌落总数等效于食品微生物学检验菌落总数测定的国家标准方法.     

食品中菌落总数的国标法测定注意事项及微生物快速测试卡法检测

综述了食品中菌落总数的国标法检测注意事项,并介绍了微生物快速测试卡在菌落总数测试中的应用,指出测试片法将成为未来微生物检测中有前景的手段之一。     

可过滤液体饮料中微生物学检验滤膜法和平板计数法的等效性比较分析

比较分析滤膜法和平板计数法在检验可过滤饮料中菌落总数、霉菌和酵母计数以及大肠菌群计数微生物指标是否具有等效性。通过预实验结果,采集可过滤液体饮料样品分别加入定量的枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉以及大肠杆菌制备成样品,分别采用滤膜法与平板计数法分别检测菌落总数、霉菌计数、酵母计数以及大肠菌群计数,参照采用ISO 17994:2014《水质-用两种定量方法对比微生物回收率的基本要求》对滤膜法和平板计数法的检测结果,然后进行数据比较分析,以验证两种方法在可过滤液体饮料微生物学检验中的是否具有等效性。结果表明当取样量为100时,滤膜法和平板计数法在检测可过滤液体饮料微生物学检验中具有等效性。滤膜法与平板计数法应用于可过滤饮料中微生物学指标的检验可考虑相互取代。     

基于标准物质评价平板计数琼脂培养基的生长率

目的:建立一种平板计数琼脂（plate count agar,PCA）培养基的生长率的评价方法。方法:使用待测PCA培养基对大肠杆菌标准物质进行测定,并根据公式计算大肠杆菌在待测PCA培养基上的生长率。对建立的评价方法的重复性和再现性进行验证。并使用建立的方法对9个品牌PCA培养基的生长率进行评价。结果:所建评价方法的重复性相对标准偏差为9.09%,再现性相对标准偏差为14.42%。不同品牌PCA培养基的生长率存在差异,但都满足0.83≤P_R≤1.17的要求。结论:本研究成功建立了一种基于标准物质的培养基质量评价方法,该方法具有重复性和再现性,可以快速高效评价PCA培养基的生长率。     

鸡蛋壳表面细菌数量及种群多样性分析

采用GB 4789.2-2010菌落总数计数及Miseq测序分析物种多样性及群落结构的方法,对蛋鸡场鸡蛋壳表面细菌数量及种群结构进行研究。结果检测8组样品的菌落总数为3.79±0.67~5.06±0.75 Log CFU/eggshell±SD;获得的163214条优化序列分属于变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、放线菌门(Actinobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、梭杆菌门(Fusobacteria)及蓝菌门(Cyanobacteria)。8组样品普遍存在假单胞菌属(Pseudomonas)、埃希氏-志贺氏菌属(Escherichia-Shigella)、泛菌属(Pantoea)、芽孢杆菌属(Bacillus)、肠球菌属(Enterococcus)细菌;而各样品分别以假单胞菌属(Pseudomonas)、埃希氏-志贺氏菌属(Escherichia-Shigella)、不动杆菌属(Acinetobacter)、芽孢杆菌属(Bacillus)、寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)以及肠球菌属(Enterococcus)的相对丰度最大,依次为67.89%、36.15%、68.08%、40.12%、21.59%和26.98%。试验结果表明鸡蛋壳表面细菌数量大、种群多,不同样品间存在相似性差异。鸡蛋腐败变质可能与鸡蛋壳表面细菌种群有关,有待进一步研究。     

电导率法快速检测食品细菌总数的研究

电导率法是最近发展起来的应用于微生物检验的一项电化学技术。本研究先建立了利用电导率法测定几种常见食品细菌总数的标准曲线,然后通过平行实验验证了电导率法快速检测食品细菌总数的重现性,再通过配对实验比较了电导率法与国标法测定结果符合率;经统计学卡方检验,结果 P〉0.05,表明两种方法无显著性差异,结果符合率为92.7%;说明电导率法作为一种快速检测方法用于食品细菌总数的检验是可行的。     

螺旋平板法在菌悬液计数及食品和化妆品菌落总数检测中的应用

应用螺旋平板法和国标方法分别对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌的培养菌悬液以及食品、化妆品样品161份进行菌落总数检测,国标法培养48h后进行手工计数,螺旋平板法自动接种培养48h后进行仪器自动计数,将两种方法结果进行比较,结果无显著性差异(P＞0.05)。因此螺旋平板法适用于菌悬液计数及食品和化妆品菌落总数的测定。     

婴幼儿米粉中菌落总数检测方法的比较

目的 比较5种不同方法检测婴幼儿米粉中菌落总数的检测效果, 确定最优的检测方法。方法 采用PCA直接倾注法、添加2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride, TTC)方法、无菌滤网过滤基质方法、倾注后覆盖法、试纸片法分别测定10种婴幼儿米粉中的菌落总数。结果 5种方法检出率顺序为倾注后覆盖法＜PCA直接倾注法＜添加TTC法、试纸片法＜无菌滤网过滤法。倾注后覆盖法较PCA直接倾注法能有效地抑制容易蔓延生长的需氧细菌, 但两者受米粉基质的影响较大。添加TTC法能降低米粉基质对计数结果的干扰, 采用试纸片法能减少米粉基质和米片对计数的影响, 但两者都抑制平板中部分革兰氏阳性菌的生长, 导致计数结果偏低。采用无菌滤网过滤法能有效地消除米粉基质与米片的干扰, 且不受TTC对菌落的抑制因素影响。结论 在对婴幼儿米粉的菌落总数检测中, 无菌滤网过滤法优于其他4种方法。     

罗非鱼中菌落总数测量结果的不确定度评定

目的对罗非鱼中菌落总数测量结果进行不确定度评定。方法采用平板计数法测定罗非鱼中的菌落总数,通过建立数学模型,识别不确定度来源,对不确定度来源进行分析,估算出各不确定度分量对测量不确定度的影响,最终合成测量结果的相对标准不确定度。结果被测样品中细菌总数为23000 CFU/g,在95%的置信区间下,扩展不确定度为920 CFU/g(k=2)。结论样品重复测定和结果修约是影响该方法不确定度的主要因素,因此该方法测量不确定度的评定对检测结果准确度的提高具有指导意义。