姬松茸多糖增强免疫功能及抗疲劳作用的研究

探讨姬松茸多糖对小鼠免疫功能和抗疲劳作用的影响。成年小鼠40只随机分为对照组、姬松茸多糖低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组10只。分别以生理盐水、100、150、200 mg/kg浓度姬松茸多糖灌胃给药,持续10 d,对小鼠进行抗疲劳试验和相关免疫指标的测定。姬松茸多糖显著提高小鼠脾脏和胸腺指数(中剂量时P0.05;高剂量时P0.01);姬松茸多糖显著提高小鼠脾脏和胸腺指数,增加小鼠血清中IL-6和TNF-α的含量,提高CD4~+、CD8~+细胞计数;并能延长小鼠常压耐缺氧时间和负重游泳时间,提高小鼠血清中SOD活性,降低MDA含量。姬松茸多糖增强能够小鼠免疫功能和抗疲劳作用。     

姬松茸多糖的提取及其对D-半乳糖诱导衰老小鼠的免疫调节作用

建立姬松茸多糖(Agaricus blazei polysaccharides,ABP)的提取方法,并研究姬松茸多糖对D-半乳糖诱导的衰老小鼠免疫调节作用。采用水提醇沉法提取姬松茸多糖,通过单因素实验和正交试验筛选并优化姬松茸多糖的最佳提取工艺;采用D-半乳糖(400 mg/kg)构建衰老小鼠模型,将小鼠随机分为5组,空白对照组(CON)、模型组(MOD)、姬松茸多糖低剂量组(ABP-L,200 mg/kg/d)、姬松茸多糖中剂量组(ABP-M,400 mg/kg/d)、姬松茸多糖高剂量组(ABP-H,800 mg/kg/d);分别测定各组小鼠胸腺和脾脏指数;CCK-8法测定ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖转化;ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6含量。结果表明,姬松茸多糖最佳提取工艺为:提取温度100℃,提取时间3 h,料液比1∶20 g/mL,提取次数3次,此时姬松茸多糖的平均得率为8.814%±0.109%;与模型组相比,姬松茸多糖高剂量组显著提高小鼠脾脏(p0.01)和胸腺指数(p0.05),姬松茸多糖高剂量组极显著促进衰老小鼠脾细胞增殖(p0.01),增加衰老小鼠血清中TNF-α(p0.01)、IL-6(p0.01)含量。姬松茸多糖对D-半乳糖诱导的衰老小鼠模型具有免疫增强作用。     

姬松茸多糖对2型糖尿病大鼠代谢及抵抗素基因表达的影响

目的:探讨姬松茸多糖对2型糖尿病(2-diabetesmellitus,2-DM)大鼠糖脂代谢和抵抗素(resistin)基因表达的影响。方法:将Wistar大鼠随机分为5组,A:正常对照组;B:模型组;C:8%姬松茸多糖组;D:4%姬松茸多糖组;E:2%姬松茸多糖组。8周后,测定空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、血脂和胰岛素抵抗指数(IR);半定量RT-PCR检测resistin基因mRNA的表达水平。结果:姬松茸多糖治疗组FPG、FINS、TG、LDL、VLDL、CH、IR及resistin基因mRNA的表达均低于模型组(P0.05),而HDL的含量则高于模型组。结论:姬松茸多糖可抑制resistin基因表达,降低胰岛素抵抗;降低2-DM大鼠血糖和改善其脂代谢紊乱。     

姬松茸多糖提取物对高脂血症大鼠降血脂作用研究

为探讨姬松茸多糖对高脂血症大鼠降血脂作用及机制,采用水提醇沉法提取姬松茸粗多糖,并用DEAE-纤维素离子交换柱对多糖进行层析分级,采用高效液相色谱法分析单糖组成,并测定多糖含量;高脂饮食诱导建立高脂血症大鼠模型,将大鼠随机分成4组(空白对照组、模型组、辛伐他汀阳性对照组、姬松茸多糖组),同时对大鼠口服灌胃给药,连续42 d;测定大鼠相对肝脏指数,ELISA法检测大鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量;HE染色法观察肝脏组织病理变化,RT-PCR法检测大鼠肝脏组织中低密度脂蛋白(LDL-R)、固醇调节原件结合蛋白-1C(SREBP-1C)、胆固醇7a-羟化酶(CYP7a-1)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)、B类清道夫F(SCARB-1F)的mRNA表达水平。研究结果显示:姬松茸多糖中糖的质量分数为75.1%,DEAE-纤维素离子交换柱层析分级得到姬松茸酸性多糖级分(ABP-A),ABP-A中含有质量分数为88.6%的葡萄糖、2.4%的半乳糖、1.9%的甘露糖、1.0%的鼠李糖、0.5%的半乳糖醛酶、1.9%的木糖、2.1%的阿拉伯糖、1.6%的岩藻糖;ABP-A干预后大鼠肝脏指数显著降低(P<0.05);血清TC、TG、LDL-C含量极显著降低(P<0.01),HDL-C含量极显著升高(P<0.01);肝脏内脂滴沉积减少,肝脏中LDL-R、SCARB-1F mRNA相对表达量显著升高(P<0.05),CYP7a-1、PPAR-αmRNA相对表达量极显著升高(P<0.01),SREBP-1C mRNA相对表达量极显著降低(P<0.01)。ABP-A具有显著的降血脂作用,ABP-A的降血脂机制可能与其调控肝脏脂质代谢关键因子LDL-R、SREBP-1C、CYP7a-1、PPAR-α、SCARB-1F的表达有关。     

姬松茸多糖对糖尿病大鼠脑组织保护作用及其机制

目的:探讨姬松茸多糖对糖尿病大鼠脑组织保护作用及其作用机制。方法:将Wistar大鼠随机分为5组,A:正常对照组;B:模型组;C:2%姬松茸多糖组;D:4%姬松茸多糖组;E:8%姬松茸多糖组。8周后,HE染色观察脑组织病理变化,琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡,RT-PCR观察p53基因的表达。结果:与模型组相比,姬松茸多糖治疗组脑组织形态明显改善,脑组织细胞凋亡量明显减少,p53基因的表达明显减少。结论:姬松茸多糖对糖尿病大鼠脑组织有明显保护作用,其机制可能与抑制细胞凋亡及p53基因的表达有关。     

轮叶党参粗多糖对体外培养小鼠脾淋巴细胞及RAW 264.7细胞的免疫活性

目的:研究轮叶党参多糖对小鼠脾淋巴细胞及巨噬细胞(RAW 264.7)作用以探究其免疫增强的功效。方法:浓度为1000,500,250,125 μg/mL多糖体外分别与脾脏细胞、RAW 264.7共培养,采用ELISA法检测细胞上清中细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-6和TNF-α浓度的变化。采用MTT法,研究轮叶党参粗多糖对RAW 264.7增殖的影响。Griess法测定细胞上清液中NO的含量变化。通过RT-PCR法检测iNOS mRNA的生成情况。结果:与正常组相比,轮叶党参粗多糖组IL-2、IFN-γ、IL-6、TNF-α和NO的分泌量极显著增加(p<0.01),显著促进RAW 264.7增殖(p<0.05)。与正常组比较,iNOS mRNA明显增加。结论:轮叶党参粗多糖可与ConA协同增强T细胞活性,也可参与活化单核-巨噬细胞对特异性免疫与非特异性免疫活性起到正向调节的作用。     

姬松茸多糖对糖尿病大鼠视网膜细胞凋亡的影响

目的:探讨姬松茸多糖对糖尿病大鼠视网膜病变的保护作用及其作用机制。方法:将Wistar大鼠随机分为5组,A:正常对照组;B:模型组;C:8%姬松茸多糖组;D:4%姬松茸多糖组;E:2%姬松茸多糖组。8周后,琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡,RT-PCR观察Bax基因、Survivin基因的表达。结果:与模型组比较,姬松茸多糖组视网膜细胞凋亡明显减少,Survivin表达上调,Bax表达降低。结论:姬松茸多糖对糖尿病大鼠视网膜组织保护作用的机制可能与抑制视网膜组织细胞凋亡及上调Survivin基因,降低Bax基因表达有关。     

酵解姬松茸多糖对小鼠免疫指标和肠道菌群的影响

目的:采用小鼠试验检验酵解姬松茸多糖对小鼠免疫和肠道菌群的影响。方法:昆明系小鼠100只,随机分为5组,分别投喂试验饲料处理:基础饲料中添加质量分数为0%、0.15%、0.3%、0.6%剂量的酵解姬松茸多糖和0.6%的水提姬松茸多糖,酵解松茸多糖来源于酵素酵解姬松茸法提取。其中各组小鼠的半数于饲喂试验第7天处死,采用平板计数法检测小鼠盲肠中乳杆菌(Lactobacilli)、双歧杆菌(Bi?dobacteria)、肠杆菌(Enterobacteria)、肠球菌(Enterococci)的数量;另一半于饲喂试验的第14天处死,测定小鼠体质量、脏器指数、血清学指标及肠道菌群数量。另准备10只小鼠于第0天处死,测定试验起始点肠道菌数量作为参照。结果:试验14 d,对小鼠脾脏指数影响顺序:酵解姬松茸多糖处理组水提姬松茸多糖处理组0%剂量组,前面2组与0%剂量组比较差异显著。与0%剂量组比较,酵解姬松茸多糖各处理组血清中DAO、D-LA、ET和TNF-α的水平均显著降低;0.6%剂量酵解姬松茸多糖组TNF-α含量极显著(P0.01)低于0.6%剂量水提姬松茸多糖组,D-LA、ET显著降低(P0.05)。试验期间,多糖处理各组肠道菌数量,与0%剂量组比较均具有差异,并与试验起始期不同;与0.6%剂量水提水提姬松茸多糖组比较,0.3%剂量酵解姬松茸多糖组肠道中乳杆菌数量极显著(P0.01)增加;0.6%剂量酵解姬松茸多糖组双歧杆菌的数量显著(P0.05)增加,且肠杆菌、肠球菌的数量显著(P0.05)降低。结论:酵解姬松茸多糖具有与水提姬松茸多糖相似或更好地调节小鼠免疫功能和优化肠道菌群的作用。     

黑酵母β-1,3-1,6-葡聚糖对小鼠肿瘤及免疫功能的影响

目的:探讨黑酵母β-1,3-1,6-葡聚糖对S180腹水移植瘤荷鼠瘤体生长以及免疫功能的影响。方法:建立BALB/c小鼠S180腹水移植瘤模型,每日给予β-1,3-1,6-葡聚糖干预,并测量瘤体积。21d后,检测小鼠血清中10种细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、IFN-γ、TNF-α、TNF-β和G-CSF的水平,以及CD4、CD8、补体C3、IgG和IgM的含量。结果:β-1,3-1,6-葡聚糖能显著抑制S180移植瘤的生长(P<0.01)。与空白对照组比较,多糖灌胃组小鼠血清中细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、TNF-α、TNF-β、IFN-γ和G-CSF水平显著上升(P<0.01,P<0.05)。CD4、CD8、CD4/CD8、补体C3、IgG和IgM含量也明显增加(P<0.01,P<0.05)。结论:β-1,3-1,6葡聚糖对S180腹水移植瘤生长具有明显抑制作用,其机制可能是通过促进细胞免疫和体液免疫的功能而实现的。     

费菜粗多糖对小鼠免疫活性的研究

目的 :研究费菜(Sedum aizoon L.)粗多糖对小鼠免疫活性的研究 方法 :首先采用水提醇沉法以及Sevage法去蛋白等工艺提取费菜粗多糖。体外实验需将配置成不同浓度的多糖提取液分别与脾脏细胞,RAW 264.7共培养,采用ELISA法检测细胞上清中细胞因子IL-2,IFN-γ, IL-6,TNF-α浓度的变化。采用cck-8法,研究费菜粗多糖对RAW 264.7增殖的影响。Griess法测定细胞上清液中NO的含量变化。结果 :与正常组相比,费菜粗多糖组显著增加IL-2,IFN-γ,IL-6,TNF-α,NO的分泌量,差异具有统计学意义(p0.01)。促进RAW 264.7增殖,差异具有统计学意义(p0.05)。结论 :费菜多糖轮增加脾淋巴细胞与RAW264.7分泌IL-2、IFN-γ、 IL-6、TNF-α、NO,促进RAW 264.7增殖.     

苦丁茶冬青多糖对小鼠脾脏淋巴细胞的免疫调节和抗氧化作用

本文通过体外培养小鼠脾脏淋巴细胞研究苦丁茶冬青多糖对正常小鼠脾脏淋巴细胞免疫调节和抗氧化作用的影响。测定了不同浓度的苦丁茶冬青多糖（polysaccharide from Ilex kudingcha C.J. Tseng）对脾脏淋巴细胞体外增殖能力、抗氧化酶（SOD、T-AOC、GSH-Px和CAT）活力、丙二醛（MDA）含量及炎性细胞因子（TNF-α、IFN-γ和IL-1β）分泌水平的影响。结果显示，小鼠脾脏淋巴细胞的增殖与苦丁茶冬青多糖浓度呈正相关，在80和160 μg/mL浓度时，吸光度值分别为0.38和0.41，与空白对照组（0.31）相比具有极显著差异（P<0.01）；SOD、T-AOC、GSH-Px和CAT活力随苦丁茶冬青多糖浓度的增加而增强，浓度为160 μg/mL时，抗氧化酶活力分别为4.54 U/mg蛋白、1.06 mmol/mg蛋白、799.01 mU/mg蛋白和806.85 U/mg蛋白，与空白对照组相比具有极显著性差异（P<0.01）；此外，与空白对照组相比，苦丁茶冬青多糖显著降低MDA含量、促进NO分泌和促进脾脏淋巴细胞分泌TNF-α、IFN-γ和IL-1β。本研究结果表明苦丁茶冬青多糖可通过促进小鼠脾脏淋巴细胞增殖、增强细胞抗氧化能力及诱导炎性细胞因子分泌等发挥其免疫增强活性，该研究可为苦丁茶冬青的开发和利用提供理论支撑。     

银杏多糖对小鼠淋巴细胞免疫调节作用的研究

为研究银杏多糖对小鼠淋巴细胞的免疫调节作用,无菌分离小鼠脾淋巴细胞,制备淋巴细胞悬液,实验设空白组、阳性组（终浓度为5 μg/mL的左旋咪唑）、银杏多糖处理组（终浓度为25、50、100、200、400 μg/mL）。采用MTT法检测银杏多糖对淋巴细胞增殖的影响,流式细胞术检测银杏多糖对淋巴细胞周期的影响,ELISA法检测银杏多糖对淋巴细胞白细胞介素-4（IL-4）、干扰素-γ（IFN-γ）分泌量的影响,qRT-PCR法检测银杏多糖对淋巴细胞IL-4、IFN-γ mRNA表达的影响。结果显示,与空白组相比,银杏多糖处理组和阳性组的淋巴细胞增殖指数均极显著高于空白组（P<0.01）;与阳性组相比,200 μg/mL银杏多糖处理组的淋巴细胞增殖指数低于阳性组,但无统计学意义（P>0.05）。与空白组相比,25~400 μg/mL银杏多糖处理组G₀/G₁期占比极显著降低、S期和G₂/M期细胞总占比极显著增加（P<0.01）;与阳性组相比,200 μg/mL时G₀/G₁期占比降低、S期和G₂/M期细胞总占比极显著升高（P<0.01）。与空白组相比,阳性组、25、100、200 μg/mL银杏多糖处理组的IFN-γ/IL-4比值均极显著低于空白组（P<0.01）,400 μg/mL银杏多糖处理组的IFN-γ/IL-4比值极显著高于空白组（P<0.01）;与阳性组相比,100、200 μg/mL银杏多糖处理组IFN-γ/IL-4比值低于阳性组,但无统计学意义（P>0.05）。与空白组相比,银杏多糖处理组和阳性组的细胞因子IFN-γ、IL-4分泌量及其mRNA相对表达量均极显著高于空白组（P<0.01）;与阳性组相比,200 μg/mL银杏多糖处理组的细胞因子IFN-γ、IL-4分泌量及其mRNA相对表达量低于阳性组,但无统计学意义（P>0.05）。由此可见,银杏多糖可以通过增加小鼠脾淋巴细胞增殖、减少G₀/G₁期细胞的阻滞、促进DNA合成、促进细胞因子IFN-γ、IL-4的分泌及其mRNA的表达、维持IFN-γ/IL-4（Th1/Th2）动态平衡,来提高机体免疫功能。     

姬松茸多糖泡腾片的配方优化

由姬松茸多糖泡腾片的崩解时限和脆碎度综合得出的归一化值(Z)为响应值,对姬松茸多糖泡腾片配方中的影响因素进行优化。对酸碱质量比、柠檬酸质量百分比、聚乙二醇(PEG6000)质量百分比进行三因素五水平的试验设计,模拟得到二次多项式回归方程的预测模型,并获得姬松茸多糖泡腾片最优配方。结果表明:所得回归模型很好地反映了各因素水平与响应值之间的关系,最优配方条件为酸碱质量比0.81,柠檬酸质量分数16.96%,PEG6000质量分数4.08%。在该条件下制得的姬松茸多糖泡腾片崩解时限少于300s,脆碎度合格,与模型预测值非常接近,表明该配方具有良好的可行性。     

菠萝蜜多糖对脾淋巴细胞抗氧化作用及免疫功能的影响

本研究旨在探明菠萝蜜多糖(polysaccharide from jackfruit pulp,JFP-Ps)对正常小鼠脾淋巴细胞增殖和免疫调节的影响。通过体外小鼠脾淋巴细胞的培养实验,测定不同质量浓度JFP-Ps对正常小鼠脾淋巴细胞增殖、抗氧化能力(总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活力和丙二醛(malonic dialdehyde,MDA)含量)及细胞因子(肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β))分泌水平的影响。结果显示,JFP-Ps可促进小鼠脾淋巴细胞增殖,质量浓度为80μg/mL和160μg/mL时效果显著(P0.05);当JFP-Ps质量浓度为40μg/mL甚至更高时,T-AOC及GSH-Px、SOD和CAT活力显著升高(P0.05),但MDA含量显著降低(P0.05);JFP-Ps在质量浓度40~160μg/mL范围内可显著促进脾淋巴细胞TNF-α、IFN-γ和IL-1β的分泌(P0.05)。结果表明JFP-Ps的免疫增强活性可能与其促进小鼠脾淋巴细胞增殖、提高抗氧化活性及诱导细胞因子TNF-α、IFN-γ和IL-1β分泌水平有关。     

鱼腥草多糖对DSS诱导小鼠结肠炎的改善作用

目的: 探究鱼腥草多糖（Houttuynia cordata polysaccharides,HCP）对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎的疗效及可能的作用机制。 方法: 将雄性昆明小鼠随机分为5组（n=10）,分别为空白组、模型组、鱼腥草低剂量组、鱼腥草高剂量组和柳氮磺胺吡啶（SASP）阳性药物对照组。采用2.5%葡聚糖硫酸钠（Dextran sulfate sodium salt,DSS）水溶液让小鼠自由饮用9 d,诱导溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)模型。建模成功后,空白组和模型组自由饮用蒸馏水,鱼腥草多糖低、高剂量组分别灌胃1、2 g/kg/d鱼腥草多糖溶液,阳性药物组灌胃柳氮磺胺吡啶9 mg/kg/d,连续干预6 d。评估疾病活动指数（Disease activity index,DAI）,HE染色观察结肠组织病理切片,ELISA 检测血清中炎症细胞因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）水平以及肝肾功能指标谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、肌酐（CR）、尿素氮（BUN）含量,16S rRNA系统测序技术检测分析小鼠肠道菌群的变化,研究鱼腥草多糖对小鼠结肠炎的影响。 结果: 与模型组相比,鱼腥草多糖组能够显著的降低DAI评分(P<0.05),减少结肠组织溃疡面积,显著性降低TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-γ的水平(P<0.01)和ALT、AST、CR、BUN的含量(P<0.05,P<0.01),增加肠道菌群的丰富度。 结论: 鱼腥草多糖可缓解溃疡性结肠炎小鼠的症状,其作用效果可能与改善肠道黏膜环境、降低炎症因子水平和维持肠道菌群的稳态有关。     

香菇多糖L-2对荷瘤小鼠TNF-α和IL-2的影响

我们提取纯化得到一种重均分子量为2.03×105、单糖为葡萄糖的香菇多糖级分(L-2)后,评价了香菇多糖L-2对荷S-180小鼠细胞免疫的影响。连续10d通过腹腔注射给予小鼠不同剂量的香菇多糖L-2(10mg/kg体重),测定了正常小鼠与荷S-180小鼠的血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素2(IL-2)的含量,以及香菇多糖L-2对TNF-α和IL-2的mRNA表达的影响。与对照组小鼠相比,血清中TNF-α含量有显著增加,而血清中IL-2含量没有变化,与此同时,香菇多糖L-2可以上调TNF-α的mRNA的表达。结果揭示多糖L-2有增加TNF-α含量的作用,多糖增强免疫力与TNF-α含量增加以及在转录水平上调TNF-αmRNA的表达有关。     

甘草甜素调节U14宫颈癌小鼠免疫功能及诱导凋亡的作用

为探讨甘草甜素调节U14 宫颈癌小鼠免疫功能及诱导凋亡作用,将U14宫颈癌小鼠随机分为模型组、甘草甜素低、中、高剂量组（25、50、100 mg/kg）及环磷酰胺组（25 mg/kg）,另设正常组,每组10只;灌胃给药,1次/d,共21 d。测量各组小鼠瘤体积（最大直径）、瘤质量,计算胸腺指数、脾脏指数,TUNEL法检测细胞凋亡指数,实时定量PCR法检测Caspase-3、Bax及Bcl-2 mRNA表达,Western Blot法检测p-PI3K、p-AKT蛋白表达等指标。结果发现,与模型组比较,甘草甜素低、中、高剂量组小鼠瘤体积（最大直径）及瘤质量显著降低（P<0.05或P<0.01）,抑瘤率分别为15.68%、25.41%和38.38%;与模型组比较,甘草甜素低、中、高剂量组小鼠胸腺指数、脾脏指数、IL-2、IFN-γ、TNF-α含量、凋亡指数、Caspase-3及Bax mRNA表达显著增加（P<0.05或P<0.01）,而Bcl-2 mRNA及p-PI3K、p-AKT蛋白表达显著降低（P<0.05或P<0.01）。上述结果表明,甘草甜素具有抑制U14宫颈癌小鼠肿瘤生长的作用,该作用与改善免疫功能及诱导凋亡作用有关。     

姬松茸子实体多糖提取方法的研究

本文进行了姬松茸多糖子实体粉末水提、醇沉时的一些单因素试验和正交试验。最终得出了最优工艺条件:微波处理10min;料水比:1:30;浸提温度120℃;浸提时间3h;3倍乙醇加量沉淀6h,多糖提取得率可达9.12%。