双歧杆菌优良菌株的筛选及耐消化道逆环境性能

以改良MRS培养基作为选择性培养基,初筛得75 株严格厌氧且菌落呈蓝色的双歧杆菌疑似菌株。在pH3.0和含3.0 mg/mL胆盐的改良MRS培养基中培养20 h,得到吸光度较高的11 株,并选出耐酸耐胆盐较好的NCU712、NCU701、NCU708进行生理生化鉴定,NCU712基本符合长双歧杆菌的特征。经16S rDNA分子生物学鉴定菌株NCU712为长双歧杆菌。并在模拟人体消化道逆环境下对菌株NCU712的耐受力进行初步研究。结果表明：在pH 3.5以上的人工胃液中,NCU712活菌数随着作用时间的延长而略有上升;pH 2.5时菌株NCU712的D值为30.42 min;pH 3.0时D值为92.97 min,作用2.5 h活菌数保持在107 CFU/mL以上;人工肠液作用4.0 h后,活菌数保持在108 CFU/mL以上;3.0 mg/mL胆盐中培养24 h后,活菌数下降1（lg（CFU/mL））。说明NCU712对人体胃肠道耐受性良好。     

纳豆芽孢杆菌优良菌株的筛选及人工消化液耐受性研究

从市售的燕京、顺食真、御城3种品牌的纳豆中利用脱脂牛奶平板分离初筛得到35株疑似纳豆芽孢杆菌,经琼脂糖-纤维蛋白平板复筛得到1株纤溶酶活性相对较高的菌株CN11;进行形态特征、生理生化特性及16S rDNA分子生物学鉴定,确定CN11为纳豆芽孢杆菌。对该菌进行人工消化液耐受性实验,结果表明:CN11在pH 1.5,2.5,3.5的人工胃液中作用,活菌数随pH的降低和作用时间的延长而逐渐下降,但最终仍在107 cfu/mL以上;在人工肠液中作用,活菌数随作用时间的延长缓慢上升,最终为5.7×10~8 cfu/mL;在含0.3%牛胆盐的培养基中生长,活菌数随培养时间的延长而下降,但最终仍在10~8 cfu/mL以上;可见CN11对人工消化液有很强的耐受性。因此,CN11是一株具有相对较高纤溶酶活性,并对人体消化道逆环境有较强耐受力的纳豆芽孢杆菌。     

降胆固醇乳酸菌鉴定及其在体外模拟胃肠环境中抗性研究

一株源于四川泡菜的具有降胆固醇能力的乳酸菌p5经形态学、生理生化特征和16SrDNA序列分析,鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum p5).在体外模拟胃肠环境中的抗性研究结果表明,p5具有较强耐酸能力,pH值为2.0时,2h活菌数保持在106cfu/mL;pH值为2.5时,4h内活菌数仍可保持在106cfu/mL,pH值为3.0～3.5时,p5 6h内活菌数可保持在106cfu/mL;p5具有耐高浓度胆汁盐的能力,在0.1%胆汁盐MPS中,p5表现出生长趋势,在0.2%～0.5%胆汁盐MRS中,p5活菌数下降急速,但6h后活菌数能保持在105cfu/mL;p5对肠炎沙门氏菌、大肠杆菌、铜绿假单胞杆菌、金黄色葡萄球菌等肠道致病菌有明显抑制作用.p5可望作为食品工业用菌种的资源.     

藏灵菇酵母菌K1耐胃肠道逆环境特性及降胆固醇的实验研究

利用从藏灵菇中筛选的马克斯克鲁维酵母K1菌株探讨胃肠道耐受性及体外降胆固醇功效。分别在pH 1.5~4.5、胆盐浓度0.3%~3.0%、NaCl浓度3.0%~6.0%的模拟胃肠道环境下,采用活菌计数法检测K1菌株的耐胃肠道逆环境特性,以邻本二甲醛法检测其降胆固醇效果。结果表明,在pH2.5~4.5作用4h活菌数超过106cfu/mL,0.3%~3.0%胆盐及3.0%~6.0%NaCl作用8h活菌数为104cfu/mL~106cfu/mL,在pH1.5~3.0(4h)及胆盐浓度0.3%~3.0%的模拟人体胃肠道环境下降胆固醇率40.0%~52.8%。显示K1菌株具有较强的耐胃肠道逆环境特性及良好的降胆固醇能力。     

甘南藏族传统发酵乳中高产胞外多糖菌株筛选及发酵特性研究

采用苯酚-浓硫酸法检测胞外多糖含量,对从甘南藏族传统发酵乳中分离的20株乳酸菌进行筛选。结果表明,菌株MN-002为高产菌株,在12%脱脂乳中产生的胞外多糖为(502.92±17.46)μg/m L。综合培养形态、显微形态、生理生化指标和16S rRNA基因序列分析,鉴定其为嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)。发酵结果显示,在12%脱脂乳中发酵5 h后pH即降至4.6以下,发酵6 h后活菌数达到7.8×10~8 cfu/g,菌株产酸速度快,为产黏菌株,发酵风味突出,且后酸化弱;稳定性研究结果表明,发酵乳在4℃贮藏21 d后,其中的乳酸菌活菌数仍保持在3.2×10~8 cfu/g,在43℃条件下发酵12%脱脂乳7 d后,pH值降至3.65,酸度为140°T,活菌数保持在4.7×10~7 cfu/g,揭示该菌株在酸性发酵乳中具有较好的稳定性。综上,菌株MN-002为一株性能优良、具有良好稳定性的菌株,可作为乳酸菌发酵剂进行进一步开发。     

三株益生菌发酵特性的测定

为获得最大生物量,利用比浊法做标准曲线测定发酵液中的活菌数,研究了三株益生菌的发酵特性.结果表明,双歧杆菌S1在pH7.0、150r/min、35℃条件下发酵27h活菌为2.15×109 cfu/mL,保加利亚乳杆菌Q6在pH5.5、200r/min 、35℃条件下发酵36h活菌为4.75×109cfu/mL,嗜热链球菌B6在pH7.0、200r/min、40℃条件下发酵30h活菌为1.43×109cfu/mL.     

自然发酵豆酱中明串珠菌的分离鉴定

分离筛选传统发酵豆酱中的明串珠菌,研究其益生特性。以采集自东北6 个地区的56 份自然发酵豆酱为研究对象,用稀释涂布平板方法对明串珠菌进行分离筛选,然后对疑似菌株进行形态学特征、生理生化特征和16S rRNA基因序列进行分析,确定菌株种属序列,然后对鉴定得到的明串菌株进行耐酸耐胆盐性能比较。结果表明：从56?份豆酱样品中共分离到118?株疑似乳酸菌,从中得到6?株明串珠菌,鉴定3?株为乳酸明串珠菌,3?株为肠膜明串珠菌肠膜亚种。综合比较6?株明串珠菌耐酸耐胆盐性,发现菌株FX6益生性最好,在pH?3.0环境培养3?h后存活率可达85.16%,在含0.3 g/100 mL胆盐环境培养6?h后存活率高达96.07%。因此,菌株FX6可用于进一步科研以及工业应用,其在豆酱发酵过程的作用机理仍需深入研究。     

人母乳源乳酸菌的筛选、鉴定及其降血压能力的初步测定

研究旨在从人母乳中筛选乳酸菌,并对其降血压能力进行初步测定。采用透明圈法从新鲜人母乳中分离出22株乳酸菌,经16S rDNA鉴定,分别为植物乳杆菌17株、格氏乳杆菌3株、罗伊氏乳杆菌2株;在pH3.0和含0.3%胆盐条件下分别培养1 h和3 h。结果显示,菌株的活菌数均在108cfu/m L以上;降血压试验的研究显示,22株乳酸菌均具有一定的降血压能力,其ACE抑制率最高可达95.53%。从人母乳中获得的22株乳酸菌表现出了超强的益生潜力及降血压能力,为母乳中益生菌的开发提供了良好的依据。     

酸汤中乳酸菌的鉴定及其耐酸、耐胆盐和抗氧化活性

采用16S rDNA基因序列对从酸汤中分离出的6株乳酸菌进行鉴定,并研究6株菌的耐酸和耐胆盐能力;同时以清除1,1-二苯基-2-苦基肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和羟基自由基为指标,探究其体外抗氧化活性。结果表明,6株菌均为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),可耐受pH2.5和0.3%质量分数的胆盐,且活菌数保持在107 CFU/mL以上,存活率大于87%;菌体浓度为108 CFU/mL时,6株菌对DPPH自由基的清除率在23%~35%之间,对羟基自由基的清除率在6%~16%之间。6株植物乳杆菌中,JMST-1兼具良好的耐酸、耐胆盐和一定的抗氧化能力,在耐酸、耐胆盐试验中存活率达到91%,对DPPH自由基和羟基自由基的清除率分别达到28.60%和15.44%。     

四川牧区乳酸菌分离及保健性能研究

从四川省自然发酵乳中,分离筛选出优良的6株乳酸菌(2-1,3-12,6-15,B,D,K),对其进行保健性能的测定。结果表明:菌株6-15和D与2-1、3-12、B、K4株乳酸菌相比,两株菌在冷藏过程中一直保持很高的活菌数,D菌株保持在109cfu/mL,6-15菌株保持在1010cfu/mL,在pH3.0的酸度、0.5%胆盐、0.5%酚条件下,乳酸菌活菌数仍能保持在107cfu/mL以上,能很好的体现酸奶对人体的保健作用。