金针菇下脚料多糖脱色工艺及其抑菌活性

以金针菇下脚料为原料,采用水浴浸提法提取金针菇多糖,以蛋白脱除率、多糖保留率和脱色率为指标,探讨金针菇下脚料多糖聚酰胺柱层析脱色工艺,并对金针菇下脚料多糖的抑菌活性进行研究。结果表明:聚酰胺层析法为金针菇下脚料多糖最佳的脱蛋白方法,其脱色的最佳工艺条件为:聚酰胺用量为50 g,聚酰胺柱用1.5倍柱体积的去离子水以1.5 m L/min的流速进行洗脱,在此工艺条件下,蛋白质脱除率达到94.2%。金针菇下脚料多糖对黑曲霉和酿酒酵母没有抑菌活性,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌有一定的抑菌作用,最小抑菌浓度分别为2.25、5、2.25 mg/m L,且抑菌活性与多糖质量浓度呈正相关关系。     

常熟“沙家浜”绿茶多糖的纯化

以"沙家浜"粗绿茶为原料制取茶多糖,并对茶多糖进行脱蛋白和脱色纯化研究。结果表明:聚酰胺吸附柱层析法作为茶多糖纯化(脱蛋白、脱色)的最佳方法,其脱色的适宜工艺条件为,聚酰胺用量为粗多糖质量的6倍,聚酰胺柱用1.5倍柱体积的去离子水以1.5mL/min的流速进行洗脱,在此工艺条件下,蛋白质脱除率达到95.8%。     

普洱茶多糖分离及纯化

研究10种树脂对普洱茶多糖溶液色素脱除的效果,比较sevag法、三氯乙酸法、盐酸等电点法对普洱茶多糖的脱蛋白质效果.脱色、脱蛋白后的茶多糖经冷冻干燥、透析后,再用DEAE-52纤维素柱层析分离纯化.结果表明:D101大孔吸附树脂为普洱茶多糖脱色的最佳树脂,脱色率为72.27%,多糖保留率为46.97%,脱蛋白率为71.38%;三氯乙酸的脱蛋白效果最佳,添加2%(体积分数)质量分数为50%的三氯乙酸可脱除95.2%的蛋白质;选择水和NaCl溶液作为洗脱剂的温和条件,DEAE-52纤维素柱水洗脱的多糖得率最高,为51.23%.     

菠萝皮渣多糖脱蛋白脱色方法研究及其抗氧化活性

以菠萝皮渣粗多糖为原料,对其脱蛋白和脱色工艺进行了探讨,并评价了所得精多糖的抗氧化能力。以脱蛋白率和多糖保留率为评价指标,对盐析法、三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)法、Sevag法、TCA-正丁醇法、TCASevag法、聚酰胺法和酶法的脱蛋白效果进行对比,筛选最佳的脱蛋白方法;采用活性炭对脱蛋白后的多糖溶液进行脱色,在单因素试验的基础上通过正交试验优化脱色工艺;利用清除DPPH·法和ABTS+法评价所得精多糖的体外抗氧化活性。结果表明:TCA-正丁醇法脱蛋白效果最好,蛋白质脱除率为81.47%,多糖保留率为85.91%;活性炭脱色最佳工艺条件为:活性炭添加量3.0%,脱色温度60℃,脱色时间80 min,样液pH 4.0,此条件下脱色率和多糖保留率分别为64.60%和83.97%。所得精多糖对DPPH·和ABTS+自由基均有一定的清除作用,随着质量浓度的增加,清除率逐渐增大,当浓度为3.0 mg/mL时,清除率分别达到83.27%和49.12%。筛选方法可有效去除菠萝皮渣粗多糖中的蛋白质和色素,所得精多糖具有良好的抗氧化作用。     

茶叶多糖的纯化工艺

较系统地研究了茶叶粗多糖的初步纯化工艺。脱蛋白工艺中,三氯乙酸易降解茶多糖,Sevag法效果较好,而且以处理3次为好。比较大孔吸附树脂DM130、S8、HPD500、HZ801、AB8、NKA2和聚酰胺对茶多糖的脱色效果,结果表明聚酰胺的脱色效果和多糖保留率相对都较高,而且聚酰胺动态脱色效果比静态好。进一步脱色工艺中,DEAE-纤维素柱脱色效果好,但得率低,而且柱材料不能再生,而用Sephadex G50柱不仅效果好,柱材料还可以再生。因此,茶多糖初步纯化工艺可首先用Sevag法脱蛋白,然后用聚酰胺柱脱色,再用Sephadex G50进一步脱色,这样多糖的纯度可达到89%。     

响应面法优化龙胆草多糖的脱色工艺

采用响应面法优化聚酰胺对龙胆草多糖的脱色工艺。在单因素实验的基础上,选取龙胆草多糖脱色过程中的上样体积、上样流速和上样浓度为影响因素,以龙胆草多糖的脱色率和多糖保留率的综合评分(OD)为响应值,由Box-Behnken实验设计对龙胆草多糖的脱色工艺进行响应面分析,对龙胆草多糖的脱色工艺进行优化。结果表明,最佳脱色条件为:上样体积为5 BV,上样流速为2 BV/h,上样浓度为3.50 mg/mL。在此条件下,龙胆草多糖的脱色率为80.60%±0.91%,多糖保留率为86.28%±0.67%,其综合评分(OD)为0.8344,而模型预测的OD值为0.8756,两者误差较小。聚酰胺的重复利用实验表明,经过5次重复使用后,脱色率降为76.85%±0.59%,多糖保留率有所增大到98.32%±0.37%,循环使用效果较好,该优化工艺可靠。     

骏枣多糖的提取及脱色工艺

以阿克苏骏枣为原料,采用生物复合酶解对骏枣多糖进行提取,以多糖得率和纯度为指标,探讨酶解温度、酶解时间、酶解pH、加酶量对多糖得率和纯度的影响,通过响应面分析法优化骏枣多糖最佳提取工艺,并探讨骏枣多糖的聚酰胺柱层析脱色工艺条件。确定骏枣多糖最佳的生物复合酶解提取工艺条件为:酶解温度60℃,酶解时间65 min,pH6,加酶量1%。在此条件下,多糖得率为12.29%,纯度为39.23%。聚酰胺柱层析最佳脱色工艺为:聚酰胺用量为骏枣粗多糖的4倍,用1倍柱体积的去离子水以1.5 m L/min的流速进行洗脱。     

芒果皮渣多糖脱蛋白和脱色工艺研究

探讨芒果皮渣多糖纯化过程中蛋白质和色素的脱除方法。以蛋白质脱除率和多糖保留率为评价指标,比较三氯乙酸法、三氯乙酸-正丁醇法、Sevage法、HCl法、木瓜蛋白酶法、三氯乙酸+Sevage法、木瓜蛋白酶+三氯乙酸法、木瓜蛋白酶+Sevage法和木瓜蛋白酶+三氯乙酸-正丁醇法对芒果皮渣多糖的脱蛋白效果;以脱色率和多糖保留率为评价指标,在单因素实验的基础上,通过正交实验优化活性炭对脱蛋白后多糖溶液的脱色工艺。结果表明:三氯乙酸-正丁醇法脱蛋白效果最佳,其条件为三氯乙酸-正丁醇与样液体积比2:1、三氯乙酸与正丁醇体积比1:20、振荡时间2 h,此时蛋白质脱除率为90.08%,多糖保留率率为94.40%;活性炭脱色最佳工艺条件为:样液pH3.0,活性炭添加量1.5%,脱色温度50℃,脱色时间75 min,此条件下脱色率为70.98%,多糖保留率为92.77%。本实验筛选的方法切实可行,可用于芒果皮渣多糖的脱蛋白和脱色。     

树脂法同时脱除虫草粗多糖中色素与蛋白质

引入综合吸附效应指数反映树脂的脱色、脱蛋白以及多糖保留能力,并以该效应指数评价了8种树脂对虫草粗多糖的脱色、脱蛋白效果。结果表明,D113树脂具有理想的脱色、脱蛋白效果。在优化的静态吸附工艺条件下,D113脱色率可达79.5%±1.7%,脱蛋白率达82.2%±1.7%,多糖保留率达75.0%±1.8%。对D113树脂的动态吸附性能研究表明,流速为1.5BV/h,树脂床径高比为1∶15,树脂处理量为8.4mg/mL时,D113脱色率为85.1%±1.9%,脱蛋白率为85.0%±2.0%,多糖保留率为80.2%±2.2%。50%乙醇盐酸溶液以12BV/h流速洗脱1h后,树脂再生性能良好。     

胰蛋白酶-Sevag法联用脱柿多糖蛋白

目的寻找柿多糖脱蛋白的适宜方法。方法通过正交实验找出酶法脱蛋白的最优条件,比较酶法、Sevag法、酶-Sevag联用法的脱蛋白效果和多糖保存率。结果柿多糖脱蛋白的最佳工艺为胰酶液(1mg/mL)和粗多糖液(50mg/mL)的比例为0.4∶1时,在37℃下恒温5h处理后,加0.2倍体积pH7.0的10%H2O2反应过夜,再加1/3体积氯仿-正丁醇溶液,充分混合20min,4000r/min离心5min,重复操作3次至两相界面不再出现蛋白沉淀,透析24h,得水提多糖精品,4℃保存,此时蛋白质含量为0.368mg/mL,多糖含量为86.9%,蛋白的脱除率为83.8%。结论酶-Sevag联用法蛋白脱除率和多糖保存率均较高,工艺简单,适宜于脱除柿多糖蛋白。     

冬枣多糖的分离纯化及抗氧化活性研究

目的：分离纯化冬枣多糖,并研究其组分、结构特征和抗氧化活性。方法：采用水提醇沉、脱蛋白脱色、DEAE-52纤维素柱和Sephadex G-100凝胶色谱柱分离纯化冬枣多糖;利用Sephadex G-100凝胶色谱柱进行纯度鉴定和分子质量的测定;通过紫外光谱、红外光谱、气相色谱法进行了初步结构分析;采用邻二氮菲法和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）体系对纯化多糖进行抗氧化活性的研究。结果：冬枣多糖经DEAE-52分离和Sephadex G-100纯化得到2 个组分DPA和DPB,经Sephadex G-100鉴定均为均一组分,DPA和DPB分子质量分别为1.04×104、3.02×105 D,不含蛋白质和核酸,为吡喃型糖苷环骨架,DPA的单糖组成为阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其物质的量比为6.66∶1.00∶6.75∶2.09;DPB的单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其物质的量比为4.33∶10.90∶1.00∶3.25∶4.78;DPA和DPB均具有一定的抗氧化活性,随着多糖质量浓度的增加,其抗氧化活性增强,在质量浓度为8 mg/mL时对羟自由基清除率分别为28.52%、78.79%,在质量浓度为0.4 mg/mL时对DPPH自由基清除率分别为9.97%、24.54%。结论：DPA和DPB均具有一定的抗氧化活性。     

茄枝多糖的分离纯化及成分分析

研究茄枝多糖的提取工艺和主要单糖组分。通过水提工艺,比较三氯乙酸（trichloroacetic acid,TCA）、Sevag、TCA与木瓜蛋白酶结合、Sevag与木瓜蛋白酶结合4 种脱除蛋白方法,使用DEAE-D22纤维素柱与SephadexG-100柱层析精制获得茄枝多糖ESP1-1,并对其进行薄层色谱（thin layer chromatography,TLC）、高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）检测与组分分析。木瓜蛋白酶与TCA法结合脱除蛋白效果最佳,蛋白清除率达到93%,多糖损失率为45.3%;TLC、HPLC检测与分析证明ESP1-1具有多糖的理化性质,主要由甘露糖、葡萄糖、果糖、木糖4 种单糖组成。研究结果可为茄枝多糖的开发应用提供理论支持。     

树脂对普洱茶多糖的纯化与分离

研究10 种树脂对普洱茶多糖脱色和蛋白质去除的效果及DEAE-52纤维素离子交换树脂对普洱茶多糖的分离效果。结果表明,D101树脂适合于对普洱茶多糖同时脱色和蛋白质去除,当普洱茶多糖溶液体积为50 mL时,在pH 4、温度50 ℃、料液质量浓度3.8 mg/mL、树脂用量11 mL的条件下,普洱茶多糖的脱色率为82.33%、蛋白质去除率为70.89%。DEAE-52纤维素离子交换树脂分离经D101树脂处理的普洱茶多糖能得到6 个不同多糖级分。     

不同处理方法对贺兰山紫蘑菇多糖抗氧化活性的影响

采用热水浸提法提取贺兰山紫蘑菇多糖,分别考察真空冷冻干燥法、真空干燥法（丙酮乙醚洗涤、乙醇洗涤）对其抗氧化活性的影响,确定最优干燥方法;干燥后多糖再分别经Sevag法脱蛋白、大孔树脂脱色、双氧水脱色3 种方法进一步处理,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼法分析不同处理方法对其抗氧化活性的影响。结果表明,真空干燥法（乙醇洗涤）对贺兰山紫蘑菇多糖的抗氧化活性影响最小;大孔树脂脱色效果优于双氧水脱色,Sevag法对该多糖抗氧化活性影响较大,应尽量避免使用。     

巢湖蓝藻酸性多糖的理化性质及其体外抗氧化作用

目的：以从巢湖蓝藻中分离纯化的一种多糖（acidic polysaccharide from Cyanobacteria of Chaohu,CHAP）为研究对象,对其纯度、分子质量、光谱特征、单糖组成、抗氧化作用进行研究,旨在为水华蓝藻资源进行综合开发利用提供有价值的参考。方法：采用60 ℃的热水抽提蓝藻,采用硫酸铵去除其中蛋白质,粗多糖经DEAE-52阴离子交换层析柱分离并用Sephadex G-150进行纯化得到纯化多糖CHAP。结果：CHAP中多糖和蛋白质含量分别为91.49%和0.18%,紫外-可见光谱表明CHAP不含核酸,高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）测定CHAP的分子质量为2.209×105 D,离子色谱（ion chromatography,IC）表明CHAP由6.36%的阿拉伯糖、35.47%的葡萄糖、5.03%的木糖、17.09%的半乳糖、27.36%的甘露糖及一种未知单糖构成。红外光谱表明CHAP是具有α-D-半乳吡喃糖的特征吸收峰的吡喃糖,CHAP的抗氧化作用表明：CHAP对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基和超氧阴离子自由基（O2－·）有较强的清除能力,其IC50分别为276 μg/mL和186.05 μg/mL。CHAP对羟自由基（·OH）的清除能力较弱,清除率不到10%。     

径向流色谱脱除灵芝多糖中蛋白质和色素的工艺优化

径向流色谱是一种新型色谱分离纯化技术,在生物工程领域具有很大的应用潜力。文中利用径向流色谱法对灵芝粗多糖进行纯化,以脱除其中的蛋白质和色素。通过单因素及响应面试验,确定了纯化过程的最优化条件:上样流速2 mL/min,洗脱流速40 mL/min,上样量100 mL。在此条件下,蛋白脱除率、色素脱除率和多糖回收率分别达到80.35%、88.52%、85.06%。径向流色谱法与Sevag法、三氯乙酸法、活性炭法及双氧水法等传统化学方法比较的结果表明:径向流色谱脱蛋白、脱色及多糖保留效果均优于其他方法,且在处理过程中未使用有机试剂,突出了径向流色谱法高效、经济、安全、环保等优势。     

大孔树脂纯化黑果腺肋花楸多酚的工艺优化

以黑果腺肋花楸为原料,采用大孔树脂纯化黑果腺肋花楸中多酚类物质。通过对比6 种大孔树脂对黑果腺肋花楸多酚吸附-解吸效果,筛选出XAD-7大孔树脂作为最佳纯化材料,并通过单因素试验确定XAD-7大孔树脂纯化黑果腺肋花楸多酚的静态吸附-解吸最佳工艺条件为：吸附时间4 h、解吸时间2 h、上样液质量浓度3.6 mg/mL、上样液pH 4、乙醇体积分数95%、乙醇溶液pH 7;其对黑果腺肋花楸多酚动态吸附-解吸最佳工艺条件为：上样流速2 mL/min、上样量560 mL、蒸馏水洗脱用量350 mL、洗脱流速2 mL/min、洗脱体积300 mL。在此条件下,黑果腺肋花楸多酚纯度由11.62%提高到64.37%,表明XAD-7大孔树脂对于黑果腺肋花楸多酚具有较好的纯化效果。     

径向流耦合超滤分离纯化铜藻多糖及其烟丝保润的应用

研究铜藻提取液通过径向流色谱快速脱除蛋白质的工艺参数,以蛋白质脱出率和多糖保留率为考查指标,考察进样浓度、进样量、进样速度以及洗脱速度参数的影响。结果表明:当上样流速5 mL/min,洗脱速度40mL/min,上样量100 mL,上样浓度5mg/mL时,蛋白质脱除率为74.35%,多糖保留率为80.75%。利用超滤技术将通过径向流后和未通过径向流的铜藻多糖分离为10 ku以下、10～100 ku和100 ku以上各3个组分,通过对比多糖组分的蛋白质脱除率,得出径向流耦合超滤较单一法蛋白质脱除率上都有提高,耦合法脱除率达95%以上。对铜藻多糖各组分的保润性能进行测定,结果显示,铜藻多糖无论在防止解吸还是防止吸湿方面都有提高。     

凝胶层析法分离猪股骨降血压肽及其体外稳定性

将猪股骨酶解液超滤分离后,对分子质量小于5 kD的酶解滤液（IC50值为1.362 mg/mL）进行凝胶层析分离,研究洗脱液、流速、上样量3 个因素对猪股骨降血压肽分离纯化效果的影响。结果表明：以去离子水为洗脱液,流速0.6 mL/min,上样量体积分数1%时,能够得到最佳分离效果,其最高活性组分IC50值达到0.401 6 mg/mL。研究凝胶层析分离后抑制率最高的组分的稳定性,发现其有较好的耐热和耐酸碱、耐盐性,在pH 2～6中有良好的溶解性。