陕西洛南烟草病毒病毒原鉴定初报

2005年对洛南县田间发生的烟草病毒病进行了病原鉴定,结果共检出5种为害烟草的病毒,5种病毒为:马铃薯Y（PVY）、烟草普通花叶病毒（TMV）、烟草蚀纹病毒（TEV）、黄瓜花叶病毒（CMV）、烟草环斑病毒（TRSV）,其中烟草马铃薯Y病毒病和烟草普通花叶病毒病是当前生产上发病率较高、造成损失较大的2种病害;马铃薯Y病毒（PVY）和黄瓜花叶病毒（CMV）的复合侵染也是当前生产上亟待解决的主要问题。      

病毒诱导的基因沉默防控烟草马铃薯Y病毒病研究

  背景  病毒诱导的基因沉默（virus-induced gene silencing,VIGS）是植物抗病毒侵染的一种自然机制。  方法  以马铃薯Y病毒（Potato virus Y,PVY）脉坏死株系（PVYN）的外壳蛋白（coat protein, CP）基因为靶向序列,构建烟草脆裂病毒（Tobacco rattle virus,TRV）介导的基因沉默表达载体pTRV2-CP,转化农杆菌GV3101后,与pTRV1-GV3101混合成TRV: : CP（OD₆₀₀ 0.4~0.6）喷施处理剪叶后的烟苗,测定其侵染效率。人工接种PVY于对照及TRV: : CP处理的烟苗,RT-qPCR检测、表型观察和小区试验评价TRV介导的VIGS体系对PVY侵染的沉默效果。  结果  ① 与TRV: : 00相比,接种PVY 35 d时,TRV: : CP处理的烟株中PVY累积量减少了72.8%;②VIGS表达载体45 d内能有效表达;③温室盆栽和田间小区试验TRV: : CP处理对PVY防治效果分别达到85.12%和73.08%。  结论  研究建立的VIGS体系能够沉默PVY CP基因的表达,有效防治烟草马铃薯Y病毒病,为PVY的防治提供了新的方法。      

湖南烟草病毒病种类检测与系统进化分析

为明确湖南烟草病毒病的种类及分布状况,利用小干扰RNA（siRNA）测序和反转录PCR（RT-PCR）对湖南烟区样品进行检测,分析主要病毒侵染类型,最大似然法构建系统进化树确定分类地位。结果表明,湖南烟草受到烟草普通花叶病毒（Tobacco mosaic virus,TMV）、黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus,CMV）、马铃薯Y病毒（Potato virus Y, PVY）、番茄斑驳花叶病毒（Tomato mottle mosaic virus,ToMMV）、地黄花叶病毒（Rehmannia mosaic virus,ReMV）和辣椒轻斑驳病毒（Pepper mild mottle virus,PMMV）等6种病毒的侵染,其中ToMMV、ReMV、PMMV首次被检测到,TMV、CMV和PVY是主要病毒,TMV为优势病毒,复合侵染是主要侵染类型,复合侵染率为71.29%;湖南烟草上的TMV分离物形成3个独立组系,CMV分离物属群组I的亚组IB,PVY分离物属PVY^NTN-a、PVY^E和PVY^SYR-I株系。本研究摸清了湖南烟草病毒种类、分布及侵染情况,明确了TMV、CMV、PVY的分类地位,为病毒病的防治提供了理论依据。     

陕西烟田病害种类调查

以烟田系统调查为主要手段明确了2010-2014年陕西烟区的主要病害种类、分布及其发生程度。结果表明,危害陕西省烟田的主要病害有16种,其中烟草真菌性病害6种：烟草猝倒病、烟草赤星病、烟草根黑腐病、烟草灰霉病、烟草白粉病和烟草黑胫病;烟草细菌性病害3种：烟草青枯病、烟草野火病和烟草角斑病;病毒性病害5种：烟草黄瓜花叶病毒病（CMV）、烟草马铃薯Y病毒病（PVY）、烟草蚀纹病毒病（TEV）、烟草普通花叶病毒（TMV）、烟草脉带花叶病毒（TVBMV）;线虫病害1种：烟草南方根结线虫病;烟草非侵染性病害1种：气候性斑点病。     

河南烟区烟草病毒病种类与分布

为明确近年来河南省烟草病毒病的种类及分布状况,利用9种病毒血清通过酶联免疫吸附法(ELISA)对2015—2017年间河南11个烟叶产区的566份病毒病样品进行了系统检测。结果表明,河南烟区病毒病总检出率为96.47%;烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus, TMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus, CMV)、烟草蚀纹病毒(Tobacco etch virus, TEV)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y, PVY)和烟草脉带花叶病毒(Tobacco vein banding mosaic virus, TVBMV)5种病毒在河南烟区危害最为严重,且TMV已发展为河南烟区病毒的优势种。全省侵染类型中单一病毒侵染率为34.63%,TMV的单一病毒侵染率最高,为26.86%;两种及以上病毒复合侵染率为61.84%,复合侵染主要存在5种类型,即TMV+CMV、TMV+CMV+TEV、TMV+TEV+PVY、TMV+TEV+TVBMV、TMV+CMV+TEV+PVY,侵染率分别为18.73%、3.36%、3.89%、5.83%和7.24%。因此,河南省11个烟叶产区的主要病毒种类确定为TMV、CMV、TEV、PVY和TVBMV,侵染类型为TMV+CMV、TMV+CMV+TEV、TMV+TEV+PVY,TMV+TEV+TVBMV、TMV+CMV+TEV+PVY。     

应用银灰色地膜防治烟草病毒病的研究

烟草上黄瓜花叶病,自七十年代以来在我国主要烟区山东、河南、安徽、陕西、四川、辽宁、福建、广东等省发生普遍且又严重,在流行年份,减产30—50%,品质下降1—2个等级,甚至造成大面积烟草绝产,成为我国烟草上最严重的病毒病害。据我们在山东益部烟区观察,CMV 由多种蚜虫传播,其中以桃蚜为主,有翅蚜是传播 CMV 的主要媒介,同时又可传播马铃薯 Y 病毒,引致 CMV 和 PVY 复合侵染的烟草叶脉坏死病,使烟草遭受更大损     

河南烟草主要病毒发生种类及侵染类型分析

为进一步明确河南烟区主要病毒种类及侵染类型,2020年从河南9个烟区分别采集疑似烟草普通花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、马铃薯Y病毒(PVY)和烟草蚀纹病毒(TEV)侵染的烟草样本共407份,分别利用上述4种病毒的特异性引物进行单重RT-PCR病原检测。检测结果表明,河南烟区病毒病样本的总检出率为98.28%,其中,检出率最高的是CMV为89.19%,其余依次为TMV 63.88%、PVY 28.99%和TEV 24.32%。侵染类型分为单一病毒侵染和复合病毒侵染,单一病毒侵染率为23.34%,该侵染类型中CMV所占比例最高,为16.71%;复合病毒侵染率为74.94%,复合病毒侵染类型中CMV+TMV所占比例最高,为36.86%,其次分别为CMV+TMV+PVY和CMV+TEV+PVY两种侵染类型,侵染比例均是7.62%。因此,CMV是2020年河南烟区的优势病毒,田间侵染以复合病毒侵染为主,侵染类型主要有CMV+TMV、CMV+TMV+PVY及CMV+TEV+PVY。     

用血清学方法检测山东烟草病毒病流行趋势

用血清学方法对烟草病毒进行检测,同时进行生物学测定和电镜观察,研究结果表明:现山东烟区烟草病毒病的流行种类与以前的报道有较大改变。其流行趋势是马铃薯 Y 病毒病(PVY)由次要病害上升为主要病害,黄瓜花叶病(CMV)依然严重,且病毒的复合感染加重。烟草黄斑坏死病(PVY—T)和烟草脉带花叶病(TVBMV)在山东省首次发现。     

重庆地区烟叶辣椒脉斑驳病毒的检测与鉴定

为确定重庆烟区烟草叶片上出现黄化斑点、枯斑等症状的病原,进而制定出科学的综合防治措施,对采自重庆市涪陵和巫溪烟区与北碚试验田的18份烟叶样品进行了病毒种类检测与鉴定。根据病毒外壳蛋白基因序列设计了特异性引物,采用RT-PCR扩增及BLAST序列对比分析,结果表明:涪陵烟区烟叶上出现黄化斑点、枯斑等症状的样品中检测出烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus,TMV）和辣椒脉斑驳病毒（Chilli veinal mottle virus,ChiVMV）,检出率分别为54.55%和100%;巫溪烟区样品中检测出TMV和马铃薯Y病毒（Potato virus Y,PVY）,检出率分别为100%和66.67%;北碚烟草试验田病叶样品中检测出ChiVMV,检出率为100%。其中,ChiVMV为重庆地区烟草上首次发现。      

黔江烟田病毒与周边作物及杂草携毒关系分析

为明确烟田烟叶携带病毒与周边作物和杂草携带病毒的亲缘关系,利用RT-PCR克隆烟田烟叶与周边杂草和作物携带病毒外壳蛋白（CP）,通过MEGA序列比对分析黔江烟田烟叶和周边杂草与作物所带病毒种类及其亲缘关系。结果显示,黔江地区烟草感染病毒有烟草普通花叶病毒（TMV）、黄瓜花叶病毒（CMV）和马铃薯Y病毒（PVY）;在烟田周边杂草和作物番薯、四季豆、糯米团、三悬叶钩草、杂草中检测到了TMV;自番薯、四季豆、蓬蘽、千里光、糯米团、三悬叶钩草中扩增出CMV;自番薯、四季豆、假酸浆、杂草中扩增出了PVY。进化关系分析显示,三悬叶钩草、四季豆、糯米团以及番薯为黔江烟田烟叶TMV的主要来源,蓬蘽为烟叶病毒病CMV的侵染源,假酸浆为烟田PVY的主要来源。     

烟草远缘杂交概况

综述了烟草与不同属以上植物间及烟草属不同种间的远缘杂交的进展，初步探讨了烟草远缘杂交存在的问题，并对烟草远缘杂交的前景进行了初步展望。     

烟草对污染土壤中镉胁迫的响应机制及影响因素研究进展

低危害烟叶的开发研究一直是国内外烟草研究的热点。大量研究表明,土壤镉(Cd)污染是影响我国烟草品质安全性的主要因素之一。烟草属于易累积Cd的作物之一,Cd污染胁迫不仅影响烟草的生理过程,同时也会降低烟叶的品质。笔者针对目前国内外对Cd在土壤-烟草系统中的迁移、转化规律及其影响因素进行了综述,并对降低烟草Cd吸收的主要措施及相关研究进行了展望。     

烟草根细胞原生质体的制备

根细胞是植物单细胞多组学研究的重要材料，烟草作为重要的模式生物之一，其根细胞原生质体的高效分离也越来越重要。为了获得产量和活性较高的烟草根细胞原生质体，以本氏烟草和栽培烟草K326为材料，采用酶解法制备了烟草根细胞原生质体，同时优化了影响原生质体分离纯化的酶解液组合、酶解时间和酶解渗透压等条件，并通过显微镜观察和台盼蓝染色鉴定其活性。结果表明:①以1.5%纤维素酶+1.5%果胶酶+0.4 mol/L甘露醇的酶解液组合，经过2h酶解、500 r/min离心10 min得到的根尖细胞原生质体产量和活性相对较高；②最终获得了活性大于70%、数量达到105数量级的较高质量烟草根原生质体。      

不同晾制阶段白肋烟主要化学成分的变化

对白肋烟晾制过程中主要化学成分的变化进行了初步研究。结果表明，白肋烟晾制过程中烟叶的糖分、总氮、蛋白质含量呈减少趋势；而烟碱和钙的含量呈增加趋势。这种减少或增加的程度以凋萎期和变黄期变化幅度最大。     

不同类型烟草上节肢动物群落的季节特征

洛阳山区烟田的调查发现,黄花烟草单作田,黄花烟与RG17混栽烟田和RG17单作田的节肢动物群落分别由24种、68种、59种组成,其季节变化随烟草生育期不同可以分成3个阶段。烟田的捕食性天敌是控制害虫的优势种群,对害虫具有一定的抑制作用。黄花烟草对烟青虫、棉铃虫产卵具有较强的诱集作用,种植黄花烟草可作为防治烟草害虫的措施之一。      

Expression of a carrot invertase gene in tobacco suspension cells cultivated in batch and continuous culture conditions

Plant cells (Nicotiana tabacum) were genetically modified to produce an heterologous protein, the acidic invertase from carrot, and invertase production from suspension tobacco cells was investigated. Suspension cultures were grown in shake flasks and stirred bioreactor. Total invertase activity was growth related. A 75 d continuous culture in 10 l bioreactor was performed. Our study demonstrates the high potential of plant cell cultures for long term production of heterologous protein.     

水钾互作对烤烟干物质积累的影响

采用田间小区试验研究了水钾互作对烤烟干物质积累的影响,以期为吉林省烤烟生产提出更好的栽培管理措施,指导烟叶生产实践。研究表明,在烤烟不同生育期,适当灌水量和钾肥配合可以提高烟叶的干物质积累量。在本试验条件下伸根期和成熟期保持土壤相对含水率在55%～65%之间,旺长期保持在75%～85%之间,施钾量保持在每公顷施K₂O 180 kg是比较好的组合。在伸根期和旺长期,烤烟根、茎和叶干重的变异主要是由水分引起的;而成熟期,烤烟根、茎和叶干重的变异则主要是由钾肥引起的。在不同生育期合理地控制土壤水分和钾肥用量,将可提高烟叶的产质量。      

典型生态区烟叶腺毛发育及其分泌物比较研究

以烟草品种K326为材料,分别种植在河南平顶山、贵州遵义和云南江川三个典型生态区,在烟草叶片发育过程中对叶面腺毛形态、密度、腺毛分泌物及基因表达水平进行了比较研究。显微观察发现腺毛类型在3个地区间变化不大,都以长柄多腺头腺毛为主,但腺毛密度以贵州遵义产区的烟叶最高,河南次之,云南最低;GC/MS检测表明,西柏三烯二醇含量以河南产区为最高。且河南和云南产区随叶龄变化趋势相同;RT-PCR分析表明,西柏烷类化合物合成关键酶基因CYC-1和CYP71D16转录水平的表达与西柏三烯二醇含量的变化趋势一致。该研究表明生态环境对烟草腺毛发育和物质代谢具有较大影响,典型生态区烟叶叶面化学的差异可能与烟叶的风格特色密切相关。      

不同类型晾晒烟种质资源的化学成分和几种致香成分分析

  目的  筛选品质优良的晾晒烟种质资源。  方法  35份晾晒烟种质资源种植于云南省玉溪市研和镇,取经晾晒调制后的中部烟叶,经相关分析和聚类分析比较其常规化学成分和淀粉、多酚、石油醚提取物、多元酸、高级脂肪酸等成分含量。  结果  各主要成分含量范围(及最高值类别):总氮1.62%~3.44%(晒烟)、烟碱2.30%~9.76%(晒烟)、钾0.73%~3.42%(黄花烟)、多酚1.51%~6.43%(晒烟)、石油醚提取物2.66%~8.94%(雪茄烟)、草酸7.09 mg/g~50.21 mg/g(晒烟)、苹果酸41.97 mg/g~173.39 mg/g(黄花烟)、柠檬酸16.02 mg/g~126.45 mg/g(黄花烟)等。35份晾晒烟种质可聚为5类:第1类为黄花烟资源,钾、苹果酸、柠檬酸等含量高;糖、酚、石油醚提取物、草酸、丙二酸等含量低;第2类有马里兰烟、晒烟和雪茄烟,其石油醚提取物含量高,苹果酸和柠檬酸等含量较高;第3类多为晒烟,多酚含量高;第4类总氮、烟碱含量高,草酸含量较高,第5类总糖、还原糖、淀粉等含量高,两糖差、糖碱比、氮碱比高,苹果酸、柠檬酸等含量低。      

烟草重要基因篇:14.烟草类黄酮合成相关基因

类黄酮是烟草中普遍存在的多酚化合物,是烟草重要的致香前体物质,其合成代谢是烟草香气物质形成的重要途径。对近年来烟草类黄酮合成相关基因的研究进展进行了综述,并展望了其在烟草中调控重要基因表达和提高烟叶品质中的应用潜力。