可再生电化学传感器同步检测贝类中痕量铅和镉

目的：针对贝类中高毒重金属铅（Pb）和镉（Cd）,开发一种可再生、廉价、快速、灵敏的电化学传感器。方法：以自制离子液体/石墨烯电极（IL/GNs HME）为工作电极,采用微分脉冲阳极溶出伏安法（DPASV）原位镀铋,根据得到的溶出峰电流,实现对Pb2+和Cd2+的同步测定。结果：在铋离子质量浓度500 μg/L,富集时间420 s,搅拌速度600 r/min,富集电压-1.1 V,缓冲体系HAc-NaAc pH 4.2的条件下,利用电化学传感器测得的Pb2+和Cd2+的线性范围均为1.0~45.0 μg/L,检测限分别达0.5 μg/L和0.8 μg/L。采用IL/GNs HME电化学传感器同时检测扇贝、褶牡蛎、长竹蛏、菲律宾蛤子中Pb2+、Cd2+含量时,所得结果均与电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）检测结果相符。结论：基于IL/GNs HME构建的电化学传感器操作简便、灵敏度高,可实现对贝类中Pb2+、Cd2+含量的快速、同步测定。     

废水中Cr6+的离子树脂交换-电感耦合等离子体质谱法测定

废水中的Cr⁶⁺经H-732苯乙烯型强酸性阳离子树脂交换分离后,浓缩。用电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）检测,该法的线性范围为0～100ng.mL^-1、线性相关系数R²=0.9997、检出限为0.02ng.mL^-1（3δ）、加标回收率为88%～105%,相对标准偏差≤5%。     

微波消解-氢化物发生原子荧光法同时测定紫薯中的硒和锗

目的:建立一种微波消解-氢化物发生原子荧光法同时测定紫薯中硒和锗含量的方法。方法:以微波消解为前处理,在优化仪器分析条件和反应试剂的基础上,采用氢化物发生原子荧光法同时测定紫薯中的硒和锗。结果:此方法硒元素标准曲线的回归方程为:Y=61.998X+5.130,R=0.9997,线形范围为0.5～10ng/mL,检出限为0.19ng/mL;锗元素标准曲线的回归方程为:Y=153.69X-106.4,R=0.9934,线形范围为0.5～10ng/mL,检出限为0.40ng/mL。精密度RSD均小于2%,重现性RSD均小于5%。样品的加标回收率在79.96%～102.22%。结论:法简便,准确,灵敏度高,重现性好,可用于同时检测紫薯中硒和锗的含量。     

罗耳阿太菌多糖对Cu2+和Cd2+的吸附工艺优化及表征

以罗耳阿太菌多糖(Athelia rolfsii polysaccharide,AEPS)为生物吸附剂,探究其对水中铜(Cu2+)和镉(Cd2+)重金属离子的吸附。在单因素实验的基础上,采用正交试验优化AEPS吸附Cu2+和Cd2+效果,通过扫描电子显微镜(SEM)、X射线能谱仪(EDS)和傅里叶红外光谱仪(FTIR)对AEPS吸附重金属离子前后的表面形貌进行表征和分析,初步揭示了AEPS吸附Cu2+和Cd2+机理。结果表明,Cu2+吸附效果最优条件为:pH4.5,AEPS浓度1.5 g/L,吸附温度40 ℃,吸附时间45 min时,Cu2+吸附率为88.27%;Cd2+吸附效果最优条件为:pH6.5,多糖浓度1.5 g/L,吸附温度45 ℃,吸附时间60 min时,Cd2+吸附率为77.81%。SEM、EDS和FTIR结果表明,AEPS中的O-H、C-H、C-O和CCO官能团参与吸附反应,吸附Cu2+和Cd2+的AEPS的表面结构也发生明显变化,试验结果表明AEPS对Cu2+和Cd2+有良好的吸附作用。     

固定化酿酒废酵母吸附Pb2+的动力学及等温吸附研究

将酿酒废酵母包埋制成固定化小球,研究其对Pb2+的吸附动力学和吸附等温线。吸附动力学结果表明,当Pb2+初始浓度为20mg/L时,固定化酿酒酵母对Pb2+的吸附在3h即达到平衡。Pb2+在固定化酿酒废酵母上的吸附过程可用准二级动力学方程来描述(R2=0.999 4),动力学参数k2为0.002 9g/(mg.min),qe为18.12mg/g。吸附等温线结果表明,Pb2+在酿酒酵母上的生物吸附可以用Langmuir和Freundlich方程来描述,但以Langmuir方程较好(R2=0.995 7),qmax为18.69mg/g,b=0.127 2g/(mg.min)。     

高灵敏度磁荧光免疫层析试纸模式构建及在呕吐毒素检测中的应用

构建基于磁荧光纳米材料的免疫层析试纸模式,弥补现在免疫层析技术的不足,为更灵敏的免疫学快速检测提供技术支撑。以呕吐毒素（deoxynivalenol,DON）为靶标,采用溶剂热法制备羧基修饰的超顺磁颗粒,碳二亚胺法将磁颗粒、绿色荧光蛋白及DON单克隆抗体进行偶联,一步法制备磁荧光抗体探针,以DON人工抗原（DON-BSA）为检测线建立磁荧光免疫层析试纸。同时用胶体金标记DON单克隆抗体,以DON-BSA为检测线建立胶体金免疫层析试纸;制备的磁荧光抗体探针具有很好的磁性、荧光特性及抗体反应性,基于该探针成功制备了DON磁荧光免疫层析试纸,该试纸回归方程为y=－0.562x＋0.921,R2=0.990,IC50为5.611 ng/mL,检出限为1.089 ng/mL;制备了DON胶体金免疫层析试纸,该试纸裸眼检测灵敏度为500 ng/mL;定量检测回归方程为y=－0.543x＋1.485,R2=0.991,IC50为65.16 ng/mL,检出限为11.94 ng/mL。DON磁荧光免疫层析试纸的灵敏度是胶体金免疫层析试纸的10.96 倍。本实验建立的磁荧光免疫层析试纸模式可以同时实现样品的富集及荧光信号检测,提高检测灵敏度,并成功用于DON的检测,为磁荧光纳米颗粒广泛应用于免疫层析领域提供参考。     

纳米SiO2富集水样重金属镉-hicELISA检测方法的建立

目的:探究纳米SiO₂富集分离水样中Cd2+的条件,制备抗Cd2+单克隆抗体,建立水样中痕量Cd2+异源性间接竞争ELISA（heterologous indirect competitive ELISA,hicELISA）快速检测方法。方法:以纳米SiO₂富集、EDTA-2Na竞争洗脱Cd2+,ICP法测定处理过程中的Cd2+含量。人工合成Cd-ITCBE-BSA免疫Balb/C小鼠,制备Cd2+单克隆抗体。人工合成异源性包被抗原,建立镉离子hicELISA检测方法。结果:纳米SiO₂对Cd2+的吸附容量为13.3 mg/g,富集倍数可达20倍,EDTA-2Na可有效洗脱被富集的Cd2+。以Cd-ITCBE-BSA为免疫原,小鼠血清效价达到1:1.28×104;腹水效价为1:2.0×105,亲和力Ka为8.1×108 L/moL。以Hg-ITCBE-OVA包板建立的hicELISA检测限为2.9 μg/L,与Hg2+、Cu2+、Zn2+、Pb2+、Cr3+、Mo6+、Fe3+、Co2+ 无明显交叉反应。在湖水、自来水、超纯水样品中镉的加标回收率为92.47%~102.86%。结论:建立的纳米SiO₂富集重金属镉-hicELISA检测方法灵敏、特异、准确,能用于水样中镉离子的检测。     

石墨烯修饰酶脂质体生物传感器检测重金属的研究

通过自组装技术将葡萄糖氧化酶脂质体与纳米石墨烯共修饰于玻碳电极表面,制备出新型葡萄糖氧化酶电化学生物传感器,并利用其构建重金属残留检测体系。结果表明,经超声处理的石墨烯片层较薄,厚度在5 nm左右;以Hg2+和Cu2+作为重金属模型,分别在0.15和0.20 V时出现氧化峰电流,且不同浓度下峰电流未发生偏移;Hg2+在10-10~10-5和10-5~10-2 mmol/L浓度范围内,工作曲线方程分别为I （%）=0.0244 lgC+0.3543和I （%）=0.1552 lgC+1.0219,决定系数R2分别为0.9747和0.9937,检测限分别为10.97和3.60 ng/mL;Cu2+在10-10~10-2 mmol/L浓度范围内,工作曲线方程为I （%）=0.0406 lgC+0.8582,相关系数R2为0.9885,检出限为87.70 ng/mL,说明该检测方法灵敏度高。回收率试验结果显示所建立的检测方法对检测重金属具有较高的准确度,且精密度高,具有很好的应用前景。     

基于量子点建立铅镉快速串联检测方法

将鼠抗Cd2＋-IEDTA单克隆抗体和鼠抗Pb2＋-IEDTA单克隆抗体分别与包载CdSe/CdS量子点聚苯乙烯微球偶联,建立一种可快速检测铅镉的量子点荧光定量串联卡及免疫层析竞争检测方法。串联卡的最佳反应时间为5?min,可检测的Pb2＋和Cd2＋质量浓度范围分别为1～500?ng/mL和1～400?ng/mL,检测变异系数小于10%;检测特异性良好,与其他金属离子无明显交叉反应;利用该方法与电感耦合等离子体-质谱（inductively coupled plasma-mass spectrometry,ICP-MS）法进行肉类食品检测对比,检测结果与ICP-MS相关性良好。该检测方法为同时定量检测铅镉提供快速简便的有效途径,适用于监测肉中Pb2＋和Cd2＋含量是否超标。     

浊点萃取-热喷雾火焰炉原子吸收光谱法测定荔枝和桂圆肉中痕量Pb和Cd

为测定荔枝和桂圆肉中的Pb和Cd。采用浊点萃取-热喷雾火焰炉原子吸收光谱法对该样品进行分析,考查二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)浓度、溶液pH值、TritonX-100浓度、加热时间、水浴温度、干扰离子等实验条件对浊点萃取效率的影响。在最优试验条件下,即pH5.0、温度100℃、萃取时间15min、TritonX-100体积分数0.3%、DDTC质量浓度0.02g/100mL、进样速率0.3mL/min,该方法对Pb和Cd的富集倍数分别为30倍和26倍;方法的检出限对Pb和Cd分别为2ng/mL和0.1ng/mL,相对标准偏差分别为5.2%和3.6%。利用该方法对荔枝和桂圆中的铅和镉进行测定,结果令人满意。     

碳纳米管修饰电极差分脉冲伏安法测定微量Pb2+

以碳纳米管(CNT)修饰玻碳电极为工作电极,于-1.0V吸附富集后差分脉冲伏安法测定水中微量铅离子,实验优化了支持电解质、pH、CNT用量。从富集电位正向扫描至0V,在-0.58V处产生铅的阳极溶出峰,溶出峰电流值与Pb2+浓度在0.005～1μg/mL范围内呈良好的线性关系,线性方程为y=16.0911x-0.2284(r=0.9962),检测下限为0.005μg/mL,回收率为95.4%～105.5%,6次重复测定RSD为1.69%。碳纳米管显著改善了铅离子检测信号,所提出的检测方法简单、灵敏、快速、选择性好,能应用于实际样品测定。     

基于核酸适配体的镉离子可视化检测方法

利用适配体对镉离子的特异性识别作用,以镉离子适配体及互补链为生物识别单元,建立基于核酸适配体的镉离子可视化检测方法,实现对自来水中镉离子痕量检测。该方法将镉离子适配体固定在微孔板上,再与适配体互补链及-辣根过氧化物酶(HRP)复合物进行竞争性结合,通过HRP对底物的催化水解反应引起450nm处特征峰的变化来定量检测镉离子。结果表明:该检测体系在0.1~5.0ng/mL时具有线性关系(R~2=0.995 8),检测限低至0.5ng/mL。该方法选择性良好、操作简单、灵敏度高,并且具有较好的实用性,可用于食品安全分析和环境监测中金属离子镉的检测。     

重金属镉特异性抗体的制备及icELISA检测方法的建立

为检测食品中的重金属镉残留问题,本研究建立了基于重金属镉抗体的酶联免疫分析方法。利用异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(Isothiocyanobenzyl-EDTA,ITCBE)螯合Cd~(2+)并偶联牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA),合成了针对Cd~(2+)的免疫原Cd-ITCBE-BSA和包被原Cd-ITCBE-OVA,通过紫外扫描鉴定说明偶联成功;以Cd-ITCBE-BSA免疫Balb/c小鼠,制备出Cd~(2+)抗血清并对其免疫学特性进行鉴定,进一步说明了抗原合成成功,在此基础上进行了条件优化并建立了针对镉的icELISA检测方法。方法的检测限(IC10)为0.18 ng/mL,IC50为1.15 ng/mL,线性检测范围(IC20～IC80)为0.24～5.54 ng/mL。除了与Hg~(2+)有2.16%的交叉反应率,该方法对Pb~(2+)、Fe~(3+)、Cu~(2+)和Cr3+交叉反应率均小于0.3%,板内变异系数和板间变异系数都低于10%。此抗体特异性强灵敏度高,建立的icELISA方法可应用于食品中重金属镉的快速检测。     

基于NOTA的重金属铅人工抗原的合成与鉴定

为研究杂环类双功能螯合剂在重金属人工抗原制备方面的效果,选取2-S-(4-氨基苯)-1,4,7三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸(P-NH2-Bn-NOTA)和重金属铅为研究对象,以NOTA为双功能螯合剂,采用戊二醛法将重金属铅分别与载体蛋白BSA和OVA偶联制备人工抗原,经测定其结合比分别为9∶1和7∶1。以免疫原免疫兔子制备高效价的多克隆抗体并建立ic-ELISA,其回归方程为y=12.127ln(x)-11.386(R2=0.9961),IC50和IC20分别为157.89,13.30 ng/mL,说明制备的多抗具有较高的检测灵敏度。交叉反应试验显示:除了与镉交叉反应率为12.3%外,该抗体与重金属铁、铜和锌的交叉反应率均小于5.3%,具有较好的特异性。本研究成功制备了重金属铅人工抗原及多克隆抗体,采用杂环类双功能螯合剂制备的重金属人工抗原效果较好,为下一步开展杂环类双功能螯合剂在重金属人工抗原中的应用提供依据。     

基于Au/SiO2信号放大的沙门氏菌检测方法

目的：基于Au/SiO2信号放大,通过循环伏安法实现对沙门氏菌（Salmonella）的高灵敏度检测。方法：将与沙门氏菌靶基因DNA互补配对的碱基序列（捕捉DNA和显示DNA）,分别修饰于导电玻璃电极（indium tin oxide,ITO）及Au/SiO2纳米颗粒表面,构建捕获探针和显示探针,当在体系中加入沙门氏菌靶DNA后,会形成捕捉DNA-靶DNA-显示DNA构成的“三明治夹心”结构。由于Au/SiO2的含量与靶DNA浓度呈正相关,因此靶DNA浓度的变化可导致ITO峰电流值相应变化,从而达到检测目的。结果：在最优实验条件下,检测沙门氏菌靶DNA时,浓度在10－11～10－7 mol/L范围内呈现出良好的线性关系,线性回归方程为y=－0.000 3x＋0.000 1（R2=0.998 9）,最低检测限为6 pmol/L;检测沙门氏菌时,线性范围为50～7 910 CFU/mL,线性回归方程为y=－1.6×10－7x＋0.003 2（R2=0.994 0）,最低检测限为35 CFU/mL。结论：经特异性及实验加标回收实验证明本方法可用于实际样品的检测。     

基于核壳型荧光纳米颗粒检测的人免疫球蛋白G免疫分析方法研究

生物分子标记的荧光检测技术已广泛应用于生物学检测和疾病诊断。实验利用反向微乳液技术,制备出Ru(bpy)3Cl2掺杂SiO2荧光纳米粒子。IgG的检测是基于IgG和荧光纳米颗粒标记的羊抗人IgG的特异性结合。实验中,IgG检测的线性范围为1~100 ng/mL,检出限达到0.3ng/mL,对30 ng/mL人IgG进行11次检测,相对标准偏差为2.2%。实验结果表明,该检测新方法具有检测灵敏度高、操作简单和重复性好。     

HPLO法测定发酵乳中Y-氨基丁酸条件的优化

本文优化了乳酸菌发酵乳中7-氨基丁酸（GABA）的HPLC检测方法。以三氟乙酸．水溶液为提取液,通过60℃水浴、10000r／min离心10min等方法去除样品中的杂质,对乳酸菌发酵乳制品中的GABA进行提取。通过调整流动相的洗脱方式、流动相比例与pH、柱温等条件,使用专用氨基酸分析柱、恒温柱温箱、自动进样器和仪器自动衍生程序,建立了一种高效快速检测发酵乳制品中GABA的方法。该方法对GABA的检出限LOD（S／N=3）为0．005gg／mL（质量浓度）,定量限LOQ（S／N=10）为0．02gg／mL（质量浓度）。线性范围是0．005-500lag／mL（质量浓度）,相关系数R2=l。该方法具有准确度高、快速、环保、经济等特点。采用该方法对功能食品样品、红曲米样品、乳酸菌发酵液样品中的GABA进行检测,均能得到满意的效果,证明该法具有较广泛的适用性。     

紫外分光光度法测定糖蜜中5-羟甲基糠醛含量

采用紫外分光光度法测定甘蔗糖蜜中5-羟甲基糠醛(5-HMF)含量,以5-羟甲基糠醛为标准品,在284nm波长处对糖蜜样品进行了定量分析。测定结果表明,回归方程为Y=0.02046+0.1145X,R=0.9995,线性范围0～15μg/mL,测定精密度RSD为1.27%,重现性良好。平均回收率为97.91%,回收率RSD为1.67%(n=6),检出限为0.08μg/mL。