高效液相色谱法测定混菌发酵乳中乳糖、葡萄糖及半乳糖含量的变化

利用高效液相色谱法测定混菌发酵乳中乳糖、葡萄糖和半乳糖含量及其变化.样品经TCA沉淀蛋白,采用AminexHPX-87C色谱柱,超纯水为流动相,流速0.3mL/min,使用示差折光检测器进行检测.结果表明:利用该方法进行色谱分析,各组分能够达到很好的分离,各糖组分在0.5～10mg/mL范围内呈现良好的线性关系,相关系数均达到0.9999以上,检出限为O.012～0.016mg/mL,样品加标平均回收率为91.30％～103.28％,精密度实验表明,相对标准偏差在0.49％ ～3.82％之间(n=6),该法用于实际样品的测定可靠、准确.     

HPLC测定采后莲雾果实中可溶性糖含量及在贮藏期的变化

建立高效液相色谱法测定台湾"黑珍珠"莲雾果实中的果糖、蔗糖和葡萄糖等可溶性糖含量的方法,并测定采后贮期莲雾果实中可溶性糖含量的变化。色谱条件:采用Waters Carbohydrate柱(4.0μm,4.6mm×250mm),流动相为乙腈/水=90/10(V/V),流速1.5mL/min,柱温45℃。结果表明:利用该法进行色谱分析,各组分能达到较好的分离,在0.625～20mg/mL的糖质量浓度范围内呈现良好的线性关系,相关系数在0.999 8(n=6)以上,3种糖的加标回收率为99.05%～106.39%;精密度试验表明,各组分峰面积RSD为2.55%～3.98%(n=6)。该方法具有较高的灵敏度与精密度,可用于测定采后莲雾果实中的可溶性糖含量及贮藏期间可溶性糖的变化。     

固定pH法连续测定齿果酸模中的总酸度和粗蛋白

为建立一种连续测定齿果酸模中总酸度和粗蛋白含量的新型方法,利用超声波辅助-中性甲醛提取酸性物质,以KOH溶液为标准溶液,用固定pH法滴定样液总酸度并除去过量甲醛后,加入浓硫酸消解完全,中和过量硫酸后用甲醛将NH4+转化为H+,以KOH标准溶液用固定pH滴定法连续测定粗蛋白含量。结果表明：干基样品总酸度(H+)为0.9178mol/kg,相对标准偏差＜5%(n＝6)。干基样品粗蛋白含量为15.30g/100g,相对标准偏差＜3%(n＝6),与国标法对照,测定粗蛋白没有显著性差异。该法操作简单、快速、方便,试剂用量少,工作效率大大提高,利于推广应用。     

国标法和新型试剂盒法测定乳粉中生物素含量

国标法和新型试剂盒法利用植物乳杆菌对生物素的高度特异性和敏感性,定量测出乳粉样品中生物素的含量。通过对标准乳粉质控样品的检测,测得国标法标准曲线在0.00～1.00 ng范围内线性关系良好(R~2=0.999 0),方法检出限为2.0μg/100 g,所测样品RSD为3.22%(n=6);测得试剂盒法标准曲线在0.00～0.52μg/100 g范围内线性关系良好(R~2=0.992 3),方法检出限为0.02μg/100 g,所测样品RSD为3.18%(n=6);两种方法生物素测定值均在给定值范围内,且差异不显著(p0.05)。在50%, 100%和200%添加水平下,生物素回收率均在90%～110%之间(RSD10%),样品重复性试验结果RSD小于5%。两种方法对标准质控样检测结果稳定准确、重复性好,适用于乳粉中生物素含量的检测。     

分光光度法测定落叶松中的总黄酮含量

在高效液相色谱方法测定落叶松中二氢槲皮素含量的基础上,对测定植物提取液中总黄酮含量的三种分光光度法的准确性进行比较。结果为直接测量法较硝酸铝法、三氯化铝法能够更加准确地测量出落叶松提取液中总黄酮的含量,其回归方程为Y ＝ 53.2714X ＋ 0.01053(r ＝ 0.9999),表明溶液质量浓度在0.004～0.024mg/ml 内呈良好线性关系,精密度RSD 为1.36%(n ＝ 5),平均回收率为99.9%。     

高效液相色谱法测定传统发酵乳中的有机酸组成

利用高效液相色谱(HPLC)法研究了传统发酵乳中的7种有机酸的分离测定条件,同时对青海省传统发酵乳酸牦牛奶、酸山羊奶和酸马奶等40个样品的乳酸、乙酸和柠檬酸含量进行了测定。结果表明,选择浓度为0.010 mol/L磷酸—磷酸二氢钠(pH=2.0)和甲醇(体积比为98︰2)做流动相,流速为0.5 mL/min,紫外检测波长为210 nm时可以较好地分离测定发酵乳中的乳酸、乙酸和柠檬酸。该方法不仅相对标准偏差小(0.35%～1.23%),回收率高(95.4%～103.8%),线性相关系数高(乳酸r>0.99994,醋酸r>0.99997,柠檬酸r>0.99999),而且具有较高的准确度和精确度;通过发酵乳样品的有机酸含量测定发现,发酵乳中除主要含有乳酸外还有微量的乙酸、柠檬酸和痕量的甲酸、苹果酸、琥珀酸及丙酸。3种家畜奶发酵乳中各种有机酸含量有较大差别。     

电感耦合等离子体发射光谱法测定米香型白酒中铝含量

将1 000 mL米香型白酒样品浓缩至约5 mL,采用微波消解处理试样,用电感耦合等离子体发射光谱法（ICP-AES）测定白酒中铝含量,线性范围0～0.8 mg/L,相关系数R2为0.999 98,方法检出限为0.002 mg/L,加标回收率为98.0%～101.2%,精密度试验结果相对标准偏差（RSD,n=12）为0.057%。该方法测定精密度高、结果准确性好,适用于白酒产品的日常检验。     

高效液相色谱法测定牛乳中α-乳白蛋白

利用常规的C18色谱柱的高效液相色谱建立测定牛乳中主要过敏蛋白α-乳白蛋白含量的方法。色谱条件:色谱柱Alltima-C18(4.6 mm×200 mm,5μm),柱温为45℃,UV检测波长215 nm,流动相A为含0.1%三氟乙酸的超纯水,流动相B为乙腈:超纯水:三氟乙酸=400:100:0.5,采用梯度洗脱方法,流速0.8 mL/min。结果表明:α-乳白蛋白的线性范围分别为50～1 000μg/mL(r=0.990 9);α-乳白蛋白平均回收率为97.27%,RSD=0.76%(n=5);该方法简便、准确,适合于乳制品中α-乳白蛋白含量的测定。     

紫外分光光度法测定糖蜜中5-羟甲基糠醛含量

采用紫外分光光度法测定甘蔗糖蜜中5-羟甲基糠醛(5-HMF)含量,以5-羟甲基糠醛为标准品,在284nm波长处对糖蜜样品进行了定量分析。测定结果表明,回归方程为Y=0.02046+0.1145X,R=0.9995,线性范围0～15μg/mL,测定精密度RSD为1.27%,重现性良好。平均回收率为97.91%,回收率RSD为1.67%(n=6),检出限为0.08μg/mL。     

发酵火麻仁乳的工艺优化及抗氧化活性变化

将熟化火麻仁乳作为原料,以乳酸菌复配比例、菌种添加量、发酵温度与发酵时间为自变量,活菌数、酸度、感官评价为评价指标,采用模糊综合评价法通过单因素试验及响应面试验确定火麻仁发酵乳最佳生产工艺配方。实验表明:当保加利亚乳杆菌:嗜热链球菌:干酪乳杆菌:嗜酸链球菌复配比例为2:2:1:1.78、接种量为6.21%、发酵温度为39.42℃、发酵时间为7.12 h条件下时,模糊综合评价值最高,为0.927分,其活菌数、酸度及感官评分分别为1.9×10~8 CFU/m L、78 ~oT和8.74分。发酵后火麻仁乳的总糖、总固形物含量分别为69.29 mg/mL、6.08±0.22 g/100 g,与发酵前相比含量显著降低(p0.05),总酸、总酚和总黄酮含量分别为7.99±0.34mg/m L、28.04±0.82 mg GAE/100 mL、27.11±1.34 mg GAE/100 mL,含量均比发酵前显著提高(p0.05)。抗氧化实验表明,当DPPH自由基清除率、ABTS~+自由基清除率为50%时,发酵后火麻仁乳浓度分别为26.09 mg/mL、7.22±0.13 mg/mL,与0.25 mg/mL和0.13mg/mL生育酚相当,抗氧化活性得到了显著提高(p0.05)。     

传统发酵豆制品中丙烯酰胺检测的HPLC-MS方法构建

采用HPLC-MS法检测中国传统发酵豆制品中丙烯酰胺含量。以ACQUITY UPLC C18色谱柱(210 mm×20 mm,1.7μm)为分离柱,流动相为0.1%甲酸水溶液和甲醇(体积比为99∶1),采用电喷雾正离子MRM模式检测和内标法定量(丙烯酰胺m/z:72.2∶55.0;内标13C3-丙烯酰胺m/z:74.79∶58.0)。该方法在0.01～1μg/mL有良好的线性关系(R=0.992 425),腐乳、豆豉以及豆酱的平均回收率分别为86.6%、91.7%和85.0%,RSD≦10%(n=5)。该方法灵敏度高,重现性好,适合于传统发酵豆制品中丙烯酰胺含量的测定。     

Lactoferrin and immunoglobulin contents in camel's milk (Camelus bactrianus, Camelus dromedarius, and Hybrids) from Kazakhstan

Lactoferrin (Lf) and IgG were estimated in camel's milk from Kazakhstan, where 2 species of camels (Camelus bactrianus, Camelus dromedarius) and their hybrids cohabit. The concentrations of Lf and IgG were determined according to 3 variation factors: region (n = 4), season (n = 4), and species (n = 5; sample 4 was mixed milk and sample 5 was of unknown origin). The mean values in raw camel's milk were 0.229 ± 0.135 mg/mL for Lf concentration and 0.718 ± 0.330 mg/mL for IgG concentration. The seasonal effect was the only significant variation factor observed, with the highest values in the spring for Lf and in the winter for IgG. The Lf concentration varied in 1-wk postpartum milk from 1.422 to 0.586 mg/mL. The range in IgG concentration was wide and decreased from 132 to 4.75 mg/mL throughout the 7 d postpartum, with an important drop after parturition. In fermented milk, the lactoproteins are generally hydrolyzed. For milk samples from undefined species, discriminant analyses did not allow the origin of the species to be determined. A slight correlation between Lf and IgG concentrations was observed in raw milk. The values were slightly higher than those reported in cow's milk, but this difference was insufficient to attribute medicinal virtues to camel's milk.     

HPLO法测定发酵乳中Y-氨基丁酸条件的优化

本文优化了乳酸菌发酵乳中7-氨基丁酸（GABA）的HPLC检测方法。以三氟乙酸．水溶液为提取液,通过60℃水浴、10000r／min离心10min等方法去除样品中的杂质,对乳酸菌发酵乳制品中的GABA进行提取。通过调整流动相的洗脱方式、流动相比例与pH、柱温等条件,使用专用氨基酸分析柱、恒温柱温箱、自动进样器和仪器自动衍生程序,建立了一种高效快速检测发酵乳制品中GABA的方法。该方法对GABA的检出限LOD（S／N=3）为0．005gg／mL（质量浓度）,定量限LOQ（S／N=10）为0．02gg／mL（质量浓度）。线性范围是0．005-500lag／mL（质量浓度）,相关系数R2=l。该方法具有准确度高、快速、环保、经济等特点。采用该方法对功能食品样品、红曲米样品、乳酸菌发酵液样品中的GABA进行检测,均能得到满意的效果,证明该法具有较广泛的适用性。     

UPLC-MS/MS法快速测定乳酸菌发酵食品中的苯乳酸

建立一种超高效液相色谱-串联质谱(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)快速测定发酵食品中苯乳酸的方法,并利用此方法对45种乳酸菌发酵食品中苯乳酸的含量进行测定。样品经甲醇提取,采用UPLC-MS/MS法,色谱柱为Shim-pack XR-ODS C₁₈(3.0 mm×75.0 mm,2.2μm),流动相为0.3%甲酸-水和0.3%甲酸-乙腈,梯度洗脱,流速为0.4 mL/min。苯乳酸在1~500 ng/mL范围内线性关系良好(R²=0.9999),检出限和定量限分别为0.3和1 ng/mL,回收率为90.5%~105.0%,相对标准偏差为1.2%~4.4%。采用此方法对16种市售乳酸菌饮料、8种发酵乳、11种黄酒样品、发酵豆制品、米酒、奶酪、发酵香肠、馒头、面包等食品中苯乳酸的含量进行测定,结果显示所有样品中均含有苯乳酸。该研究所建立的方法前处理简单、分析时间短、灵敏度高、准确性好,适用于发酵食品中苯乳酸的测定。可以为高产苯乳酸菌株资源的挖掘以及发酵食品品质与营养功能的进一步研究提供科学依据。     

Associations among milk quality indicators in raw bulk milk

The objective of this study was to determine characteristics and associations among bulk milk quality indicators from a cohort of dairies that used modern milk harvest, storage, and shipment systems and participated in an intensive program of milk quality monitoring. Bulk milk somatic cell count (SCC), total bacteria count (TBC), coliform count (CC), and laboratory pasteurization count (LPC) were monitored between July 2006 and July 2007. Bulk milk samples were collected 3 times daily (n = 3 farms), twice daily (n = 6 farms), once daily (n = 4 farms), or once every other day (n = 3 farms). Most farms (n = 11) had direct loading of milk into tankers on trucks, but 5 farms had stationary bulk tanks. The average herd size was 924 cows (range = 200 to 2,700), and daily milk produced per herd was 35,220 kg (range = 7,500 to 105,000 kg). Thresholds for increased bacterial counts were defined according to the 75th percentile and were >8,000 cfu/mL for TBC, >160 cfu/mL for CC, and ≥310 cfu/mL for LPC. Means values were 12,500 (n = 7,241 measurements), 242 (n = 7,275 measurements), and 226 cfu/mL (n = 7,220 measurements) for TBC, CC, and LPC, respectively. Increased TBC was 6.3 times more likely for bulk milk loads with increased CC compared with loads containing fewer coliforms. Increased TBC was 1.3 times more likely for bulk milk with increased LPC. The odds of increased TBC increased by 2.4% for every 10,000-cells/mL increase in SCC in the same milk load. The odds of increased CC increased by 4.3% for every 10,000-cells/mL increase in SCC. The odds of increased CC increased by 1% for every 0.1°C increase in the milk temperature upon arrival at the dairy plant (or at pickup for farms with bulk tank). Laboratory pasteurization count was poorly associated with other milk quality indicators. Seasonal effects on bacterial counts and milk temperature varied substantially among farms. Results of this study can be used to aid the interpretation and analysis of indicators of milk quality intensively produced by dairy processors’ laboratories.     

比色法测定巴西虫草菌丝体中虫草酸的含量

利用比色法简便、准确和快速地测定了巴西虫草菌丝体中虫草酸的含量.结果表明,虫草酸即D-甘露醇的最大特征吸收峰在412 nm处,质量浓度在10～50 mg/L范围内线性良好,它的线性回归方程为:Y=0.0102X-0.00029,R2=0.9989;仪器精密度良好,RSD为0.35%(n=6);样品显色后在180 min内基本没变化;平均回收率为100.30%,RSD为1.44%(n=5);干扰试验表明在葡萄糖、鼠李糖和果糖中,只有果糖对检测结果有较大影响.通过果糖的特征吸收峰和高效液相色谱法表明,巴西虫草菌丝体中没有果糖的存在,验证了比色法测定巴西虫草菌丝体中虫草酸含量的准确性;用该方法测定的巴西虫草菌丝体中虫草酸的质量分数为8.45%,RSD为0.34%(n=6).     

气相色谱-三重四极杆串联质谱法同时测定乳粉中22种邻苯二甲酸酯

建立了气相色谱-三重四极杆串联质谱法测定乳粉中22种邻苯二甲酸酯含量的方法。乳粉样品以水溶解,通过乙腈提取,以氯化钠盐析后,采用气相色谱-三重四极杆串联质谱的多反应监测模式（MRM）进行定量分析。结果表明,采用基质匹配标准曲线,在5~500 ng/mL范围内,22种邻苯二甲酸酯线性关系良好,相关系数(r)均大于0.99,方法检出限在1.0~5.0 μg/kg范围,定量限在3.0~15.0 μg/kg范围。在奶粉基质中3个加标水平下邻苯二甲酸酯的平均回收率在82.4%~111.4%之间,平行测定6次相对标准偏差（RSD）为2.4%~9.5%。该方法高效便捷、灵敏度高、稳定性好,适用于乳粉中22种邻苯二甲酸酯检测。     

离子色谱法测定蔗糖中的微量SO_2

建立了离子色谱测定蔗糖中微量亚硫酸根(SO_2)残留量的方法。选择体积分数为1%的甲醛为亚硫酸盐的稳定剂。在 IonPac AS11分析柱上以8．0 mmol/L 的 NaOH 为淋洗液,进行抑制电导检测。结果表明,亚硫酸盐的浓度与其峰面积在0．25～5．0 mg/L 范围内呈良好的线性关系,相关系数为0．9990,检出限为0．05mg/ L。回收率92．5%～95．0%,RSD＜3．3%(n=5),该法用于实际样品的分析,结果令人满意。     

毛细管气相色谱法测定肉制品中脱氢乙酸含量

建立肉制品中脱氢乙酸含量的毛细管气相色谱测定方法。该法采用WBI进样口,毛细管色谱柱（弱极性）DB-5（30m×0.53mm,0.5μm）,FID检测器进行检测。进样口温度：250℃;载气流速：10mL/min;程序升温：初始80℃,以10℃/min升至200℃,保持5min;检测器温度：250℃,样品用硫酸溶液酸化无水乙醇定容后直接进样测定。方法简单、快速、重现性好,平均回收率为97.5%,RSD为1.16%,线性范围为10～200μg/mL。     

苦荞对发酵豆乳纳豆激酶活力、风味及抗氧化活性影响

相较于纳豆,以纳豆芽孢杆菌发酵获得的发酵豆乳食用更方便,但同样存在纳豆激酶活性低、风味不良等缺点。作者首先研究了苦荞、糙米、薏米、藜麦、燕麦粉对纳豆芽孢杆菌产纳豆激酶能力的影响。结果表明,添加苦荞的效果最好,当添加质量分数为3%时,纳豆芽孢杆菌液体发酵的酶活力由原来的5 803.12 U/mL提高到23 326.23 U/mL;然后研究了苦荞粉对纳豆芽孢杆菌发酵豆乳的纳豆激酶活力、风味及抗氧化活性的影响。结果显示,当添加的苦荞质量为大豆质量的50%时,发酵豆乳的纳豆激酶活力、挥发性盐基氮质量浓度和总抗氧化能力分别为 4 460.28 U/mL、3.45 mg/dL和16.34 mmol/L,分别为纯大豆发酵所得豆乳的161.42%、79.84%和196.39%。添加苦荞能够明显提高发酵豆乳中纳豆激酶活力,并且改善风味和抗氧化活性。该研究可为开发富含纳豆激酶、食用方便的纳豆食品提供借鉴。