市售鲫鱼体内菌株及其抗生素耐药性分新

分离健康鲫鱼体内菌株,通过显微镜观察和16S rDNA分析对菌株进行鉴定,并进行产纤维素酶和淀粉酶菌株筛选。分离到的菌株分别属于假单胞菌、气单胞菌、希瓦氏菌等。在美国国家生物信息中心NCBI Genbank基因库中提交了其中两个菌株16S rDNA序列,登录号是:FJ796224和FJ796225。筛选到多株产淀粉酶菌株,其中产酶活性较高的菌株命名为Aeromonas veronii F2。在鲫鱼肠道没有筛选到产纤维素酶菌株。抗生素检测分析显示,鲫鱼体内抗卡那霉素、氨苄青霉素和氯霉素三种药物的细菌有11.29%,显示鲫鱼体内菌株抗药性比从田野环境中获得的菌株高5~6倍,这需要引起人们的关注。     

淀粉酶产生菌MSP13筛选及其产酶条件初步优化

从优质白酒窖泥中分离筛选出13 株产淀粉酶的兼性厌氧细菌,通过测定α-淀粉酶、β-淀粉酶、糖化酶和脱支酶酶活力,最终筛选出一株生产4 种淀粉酶活力均相对较高的菌株,并对其进行形态观察,生理生化指标和16S rDNA鉴定,确定该菌株为解淀粉芽孢杆菌,并将其命名为MSP13。对菌株MSP13产酶条件进行初步优化,确定其产酶的较佳条件是：CaCl2质量浓度0.15 g/L、MgSO4·7H2O质量浓度0.3 g/L,pH 5.5和温度37 ℃。优化后的菌株MSP13生产4 种酶的酶活力平均提高了31.645%。     

山西老陈醋发酵阶段一株产酶芽孢杆菌的分离与鉴定

从山西老陈醋酒化阶段和醋化阶段分离筛选产淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶的芽孢杆菌。初筛以水解圈与菌落直径的比值为衡量标准;复筛采用DNS法和福林酚法对分离菌株的粗酶提取液进行淀粉酶、纤维素酶和蛋白酶酶活力的测定。结果表明:获得1株芽孢杆菌JX4-13。该株菌的淀粉酶、酸性蛋白酶和纤维素酶酶活力均相对较高。经形态观察、生理生化反应及16SrDNA鉴定,菌株JX4-13为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。     

产复合酶枯草芽孢杆菌QLB6的激光诱变育种

以产复合酶枯草芽孢杆菌QLB6为出发菌株,利用氦-氖(He-Ne)激光进行诱变育种。通过计算存活率和正突变率,确定激光诱变育种的照射剂量。通过透明圈筛选和酶活力测定,筛选获得1株编号为QLB6F的菌株,其纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶酶活力相对于出发菌株分别提高219%、38%和71%。进行30代遗传稳定性实验,证明它具有良好的遗传稳定性,无回复突变。     

习酒酒曲中产淀粉酶细菌分离及性质研究

从习酒酒曲中分离筛选出16株产α-淀粉酶菌株，镜检及生理生化试验初步鉴定均为革兰氏阳性芽孢杆菌；菌株产酶最适宜温度在45-80℃之间，除一株高温型α-淀粉酶菌株外，其余均为中温型α-淀粉酶菌株；酶解产物纸层析分析，既有液化型α-淀粉酶，也有糖化型α-淀粉酶。     

泡菜中乳酸菌的分离及功能性菌株的筛选与鉴定

泡菜是一种含有丰富乳酸菌资源的传统发酵食品。研究从16种泡菜中分离出41株乳酸菌,并通过过氧化氢酶接触试验、革兰氏染色后显微镜观察进行确定。对41株乳酸菌的耐酸性、胆盐水解酶活性、淀粉酶活性、羧甲基纤维素酶活性、蛋白酶活性以及产胞外多糖和γ-氨基丁酸的能力进行了测定,最终筛选出4株分别具有耐酸性、胆盐水解酶活性、产胞外多糖及产γ-氨基丁酸能力的优良菌株,并通过16S rDNA基因序列分析对菌株分类进行了鉴定,丰富了乳酸菌资源,同时为其在发酵食品中的应用及功能性物质的生产奠定了基础。     

丹参内生真菌产生淀粉酶菌株的筛选鉴定及酶学性质分析

目的:从丹参内生真菌中筛选耐热性强的酸性生淀粉酶菌株,并对其酶学性质进行初步研究。方法:以50株丹参内生真菌作为筛选对象,通过淀粉固体培养基初筛、液体发酵复筛,筛选产生淀粉酶活力较高的菌株;通过形态学观察和ITS序列分析对产酶菌株进行鉴定。结果:从50株丹参内生真菌中,筛选出5株产生淀粉酶活力较高的菌株,其中菌株ZDH2-2-1-1为产淀粉酶活性最强的菌株,酶活力达到117.63 U/m L,经鉴定为互隔链格孢(Alternaria alternata)。该淀粉酶最适p H为4.0,最适反应温度为55℃,具有较好的热稳定性和p H稳定性,对生淀粉具有广谱的降解能力。通过薄层层析发现,ZDH2-2-1-1所产淀粉酶的酶解产物为葡萄糖。结论:丹参内生真菌能产生高活性的耐热性酸性生淀粉酶,在生淀粉深加工中具有极大的开发潜力。     

异淀粉酶产生菌的筛选

从淀粉厂附近的土壤中分离产脱枝酶的菌株,通过筛选得到了多株菌株。对其中一类产脱枝酶的菌落为黄色的菌株进行了研究,从中筛选到了一株产异淀粉酶酶活相对较高的菌株D15,依据菌株特性初步鉴定该菌株属于黄杆菌属。对菌株D15的液体发酵条件进行了初步优化,其发酵64 h时产酶活力最大,达到1.62 U/mL。     

组成型纤维素酶高产菌的筛选及产酶条件优化

从富含植物纤维素的土样中筛选得到一株组成型纤维素酶产生茵LC-9,结合Biolog微生物自动鉴定仪和16S rDNA序列分析,该茵株鉴定为Bacillus subtilis.通过发酵与产酶条件优化,确定了菌株最佳培养条件.在优化条件下发酵35 h后,内切纤维素酶活力可达1 301.4U/ml,,木聚糖酶活力可达289.2 U/mL.该菌株产酶发酵周期短,无需纤维素类物质的诱导,推测为一株新型组成型多功能纤维素酶高产菌株.     

产淀粉酶芽孢杆菌的分离和鉴定

从土壤中分离筛选出产淀粉酶的菌株,经淀粉培养基初筛后,采用DNS法对发酵提取的粗酶液进行总酶活和α-淀粉酶活力的测定,通过形态观察和生理生化反应对筛出的菌株进行鉴定。结果表明:分离到4株产淀粉酶芽孢杆菌,测得其透明圈直径与菌落直径比值在1.7~3.5之间,其中有2株菌株产淀粉酶能力较高,总酶活达到19.760 U/mL和15.432 U/mL;4株芽孢杆菌所产α-淀粉酶酶活在6.4 U/mL~10.4 U/mL之间。经鉴定,1株为枯草芽孢杆菌,3株为蜡样芽孢杆菌,枯草芽孢杆菌的产淀粉酶能力优于蜡样芽孢杆菌。     

山西老陈醋发酵阶段高产淀粉酶芽孢杆菌的筛选与鉴定

从山西老陈醋酒化阶段和醋化阶段筛选高产淀粉酶的芽孢杆菌（Bacillus）。采用水解圈法和3,5-二硝基水杨酸（DNS）法对分离菌株进行初筛和复筛,并对筛选出的菌株进行环境耐受性分析。得到一株产淀粉酶能力较高的菌株JT10-9,淀粉酶活力可达到228.73 U/mL。该菌株能耐受9%的乙醇体积分数,在pH 3.5的条件下可生长,在20～50 ℃环境中生长良好。通过形态观察、生理生化试验及16S rDNA鉴定,鉴定菌株JT10-9为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）。     

一株α-淀粉酶产生菌的分离、鉴定及产酶条件研究

为获得具有高产α-淀粉酶能力的菌株,从不同土壤环境中分离产酶菌株,对其进行分类鉴定和产酶条件研究。通过透明圈法初筛、3,5-二硝基水杨酸(3,5-dinitrosalicylic acid,DNS)法复筛分离得到产α-淀粉酶能力较强的菌株,利用形态学和生理生化反应特征,结合16S rDNA序列分析,对其进行分类鉴定;通过单因素试验和正交试验确定该菌株的最佳产酶条件。结果表明:从土壤环境中分离得到一株产α-淀粉酶菌株MF04,初步鉴定为蜡状芽胞杆菌(Bacillus cereus),其初始产酶活力为32.5 U/mL;产酶条件试验结果显示其最适培养温度为37℃,初始pH值为6.0,培养时间为72 h,经优化后液体发酵得到的粗酶液酶活力为60.2 U/mL,是优化前的85.2%。因此分离得到菌株MF04在工业生产中具备潜在开发价值。     

广西地区青年人肠道乳酸菌的分离及其发酵酸奶品质的评价

采用传统的可培养方法对广西青年人肠道乳酸菌进行了分离与纯化,通过16S rRNA序列分析对菌株进行了鉴定,并将筛选菌株作为酸奶发酵剂应用。结果表明,分离到的23株乳酸菌中被鉴定为发酵乳杆菌（Lactobacillus fermentum）11株,唾液乳杆菌（Lactobacillus salivarius）6株,格氏乳杆菌（Lactobacillus gasseri）2株,副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）1株,融合魏斯氏菌（Weissella confuse）2株和口乳杆菌（Lactobacillus oris）1株。筛选乳酸菌制作的酸奶之间芳香类物质差异并不显著（P＞0.05）,而酸奶样品间酸味、后味A和丰度差异较大。进一步分析表明,副干酪乳杆菌HBUAS54287、唾液乳杆菌HBUAS54223与HBUAS54248、格氏乳杆菌HBUAS54233、发酵乳杆菌HBUAS54238与HBUAS54318乳酸产生能力较强,可进一步筛选用于酸奶复合发酵剂的开发。     

Amylolytic Cultures of Lactobacillus acidophilus : Potential Probiotics to Improve Dietary Starch Utilization

ABSTRACT: The amylase activity of twenty strains of Lactobacillus species isolated from intestinal contents of pigs was studied in vitro. Hydrolysis of starch was measured by following the disappearance of starch in a broth medium during the growth of all three strains. The amount of enzyme activity varied among strains. Three strains (A-4, L9 and L23) were selected for further study based on their high amylolytic activity in a broth containing soluble starch as the only carbohydrate source. Strains A-4 and L23 were identified as L. acidophilus and strain L9 was identified as L. fermentum. Among the three cultures, L. acidophilus L23 was selected as a potential candidate for use as a probiotic for improving digestion of starch in pigs based on its growth and hydrolysis of raw starch. The enzyme activity of L. acidophilus L23 was associated with the cell envelope and that of L. fermentum L9 was extracellular. The enzyme activity of L. acidophilus A4 was found in both locations. The enzyme activity of L. acidophilus L23 was inducible rather than constitutive.     

鱼肠道中抗氧化活性乳酸菌的筛选及鉴定

从海水和淡水鱼肠道的乳酸菌中筛选具有抗氧化活性的乳酸菌菌株,旨在降低和预防水产品加工过程中氧化导致的质量问题。结果表明：从48 株乳酸菌中筛选出5 株具有较强抗氧化活性的乳酸菌,进一步复筛获得来源于草鱼肠道的菌株CY1-2的活性最强。菌株CY1-2对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基清除率和抗脂质过氧化率分别为（67.29±0.42）%、（60.67±1.44）%、（29.87±1.14）%和（40.77±0.50）%,其无细胞提取物对羟自由基、超氧阴离子自由基清除率和抗脂质过氧化率分别为（64.27±1.26）%、（21.97±1.47）%和（51.03±0.40）%。此外,菌株CY1-2对革兰氏阳性菌地衣芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌和革兰氏阴性菌志贺氏菌、埃希氏大肠杆菌、铜绿假单胞菌及荧光假单胞菌均有抑菌活性。经生理生化和16S rDNA序列分析,菌株CY1-2被鉴定为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）。植物乳杆菌CY1-2具有较强的抗氧化活性和广谱抑菌活性,对开发新型水产品天然微生物源性抗氧化剂具有一定的应用价值。     

健康成人粪便中双歧杆菌的分离鉴定及其发酵乳体内特性研究

为筛选具有潜在益生功能的双歧杆菌,采用MRS培养基,结合菌落形态观察和16S rDNA基因序列同源性分析,从上海地区健康的成人粪便中分离鉴定双歧杆菌,通过7 L发酵罐发酵试验筛选优良菌株,并利用其制备发酵乳,对发酵乳的体内特性进行研究。结果表明,分离并鉴定到3株长双歧杆菌（Bifidobacterium longum）（编号为P-1、P-2和P-3）,其中菌株P-2制备的发酵乳在稳定期活菌数最高,遗传稳定性好,被确定为优良菌株,并被命名为DD98。菌株DD98制备的发酵乳能显著增加小鼠胃肠道内有益菌、减少有害菌的表达（P＜0.05）,具有调节肠道菌群的作用。此外,能维持小鼠正常的体质量、血常规指数,有利于小鼠脏器的生长。     

鳙鱼肠道菌群多样性及潜在益生菌的分离鉴定

该研究利用三代16S rRNA扩增子测序技术分析天然池塘生境鳙鱼肠道菌群特征,并从中分离潜在益生菌。该生境鳙鱼肠道菌群以厚壁菌门（Firmicutes,10.28%）和变形菌门（Proteobacteria,21.47%）为主。在属水平上,以未命名菌属ZOR006（21.63%）、严格梭菌属（Clostridium_sensu_stricto_1,10.84%）、罗姆布茨菌属（Romboutsia,10.34%）、类梭菌属（Paeniclostridium,9.63%）、甲基孢囊菌属（Methylocystis,8.74%）为主。为分离到既有利于营养物质的吸收又能抑制病原微生物的鳙鱼源芽孢杆菌（Bacillus）,对从该生境鳙鱼肠道中分离的菌株进行产酶、抑菌等功能相关益生特性试验。试验共分离出3株细菌,YB6、YB42和YB56,通过菌落形态观察及16S rRNA序列分析,鉴定结果显示其分别为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis strain）、暹罗芽孢杆菌（Bacillus siamensis strain）和解淀粉酶芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens strain）。试验结果表明,3株菌均具有良好的产胞外蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶及抑制病原菌的能力,可以作为促消化和病原拮抗益生菌做进一步的研究。     

庆阳豆豉优势菌株的分离鉴定

为了确定庆阳豆豉的主要作用微生物,获得优势发酵菌株,以甘肃庆阳7个县区农户所制的发酵豆豉为材料,采用不同培养基分离纯化,通过平板透明圈法初筛,发酵液蛋白酶、纤维素酶和淀粉酶活性测定,对传统豆豉发酵微生物进行了分离筛选,最后对优势菌株进行生理生化鉴定及16S rDNA分子生物学鉴定。共分离出22株细菌菌株,初筛获得10株均可分解蛋白质、淀粉和纤维素能力的菌株,其中QY2b蛋白酶和纤维素酶活性最高,分别达到了25.37 U/mL和6.015 U/mL。通过对QY2b的形态观察及生理生化试验,结合16S rDNA鉴定手段,确定该优势发酵菌种为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。     

豆瓣中产磷脂酶菌株的筛选及系统发育分析

以一级郫县豆瓣为原料筛选磷脂酶高产菌株,通过磷脂平板初筛和摇瓶复筛法,以磷脂酶水解圈作为筛选模型,并对产酶菌株进行了酶活力的检测及细菌16S rRNA系统发育分析。结果表明,从一级豆瓣中筛选出10株产磷脂酶菌株,其中产酶活力最高的为编号LZ8,酶活力为68.32 U/mL,经鉴定该菌株为Bacillus sonorensis,属于芽孢杆菌属,其与最高同源性菌株相似性为100%。