蜜环菌液体培养基配方优选及其活性成分和抗氧化活性研究

目的 从4种蜜环菌液体培养基配方中筛选出最佳液体培养基配方，并测量其菌丝提取物和发酵液提取物的活性成分含量及抗氧化活性。方法 采用目前4种较常用的液体培养基配方在相同温度、转速、时间条件下对蜜环菌进行液体发酵，制备菌丝提取物和发酵液提取物，通过紫外分光光度法测量其主要活性成分含量和抗氧化活性。结果 4种配方菌丝生物量、生物活性物质含量及抗氧化能力差异显著。其中配方1菌丝生物量最高，为1.21 g/L，显著高于其余3种配方(P<0.01)。4种配方菌丝提取物总黄酮、总三萜、总酚含量差异显著，均为配方2最高且显著高于子实体(P<0.001)；发酵液提取物主要活性物质含量，配方4总黄酮和总酚含量最高，配方2总三萜含量最高，均显著高于子实体(P<0.01)。抗氧化能力方面，配方1菌丝提取物-OH自由基清除率及总还原力最高；配方4发酵液提取物总还原能力表现最佳，且抗氧化能力表现更为稳定。结论 针对不同目标产物筛选出了具体的最佳蜜环菌液体培养基配方，对后续蜜环菌的研究提供参考借鉴意义，也为今后蜜环菌的开发利用奠定基础。     

不同栽培基质桑黄化学成分及抗氧化活性比较

目的 以杨树桑黄Sanghuangporus vaninii为研究对象,比较分析了应用段木和木屑栽培的桑黄子实体中 水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物、粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维、总多糖、总黄酮、总三萜含量,麦角甾醇和麦角甾酮的含量差异,并研究了其乙醇提取物的体外抗氧化活性。方法 分别选取段木和木屑栽培的桑黄子实体,依据国家标准对其水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物、粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维的含量进行测定,通过紫外分光光度法、高效液相色谱法（HPLC）测定总多糖、总黄酮、总三萜、麦角甾醇、麦角甾酮含量,采用DPPH·自由基清除能力、ABTS+·自由基清除能力评价其乙醇提取物的抗氧化活性。结果 不同栽培基质对上述13个指标均具有影响。段木栽培的桑黄中水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物、粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维、总多糖、总三萜、麦角甾酮含量均高于木屑栽培桑黄;木屑栽培的桑黄中总黄酮、麦角甾醇含量高于段木栽培的桑黄;段木栽培桑黄的抗氧化活性高于木屑栽培桑黄。结论 段木培养基更适宜桑黄子实体中各种化学成分的积累,从而提高其抗氧化活性,代料栽培产桑黄子实体的培养基需进一步优化,研究结果为桑黄栽培基质的优化和桑黄饮品质量评价提供了科学的参考。     

“长林”系列油茶籽中非油类主要功能性成分比较

对“长林”系列10个品种油荼籽种仁中4种非油类主要功能性成分进行测定和分析,采用香草醛-冰醋酸-高氯酸比色法测定总三萜含量,采用亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定总黄酮含量,采用苯酚-浓硫酸比色法测定总多糖含量,采用Lowry法测定总蛋白含量.结果表明,总蛋白质量分数为12.96％～17.38％,总三萜为2.56％～5.37％,总多糖为0.65％ ～ 1.43％,总黄酮为0.53％～1.06％,4类功能性成分含量在油荼品种间均存在较大的差异.因此,针对油茶不同功效产品的开发应选择相应的品种.     

长白山地区蜜环菌菌种的分离与筛选

本文主要对从长白山地区采集到的天麻和蜜环菌的了实体分离鉴定，得到了16个蜜环菌菌株。通过固体培养和液体培养，开展了各菌株的菌丝和菌索萌发时间及其形态特征、荧光特性、液体培养时菌丝球的形态、大小，发酵液色泽，荧光强度，产物的生物量等方面的实验研究，进一步筛选出生长性状良好的8个菌株Ar-02，Ar-03，Ar-06，Ar-08，Ar-09，Ar-11，Ar-13，Ar-31。     

蜜环菌抑菌作用的初步研究

采用滤纸片法、液体培养法和活菌计数法,研究了蜜环菌菌索提取液对常见微生物的抑制作用。通过测定MIC值,蜜环菌的抑菌能力依次为:大肠杆菌>金黄色葡萄球菌>枯草芽孢杆菌>啤酒酵母菌。15%的蜜环菌浸提液可抑制细菌生长,高于20%的蜜环菌浸提液可对霉菌和酵母菌产生抑制作用。     

鸡枞菌不同溶剂提取物成分分析及抗氧化作用研究

利用分光光度法和液相色谱法测定鸡枞菌8种不同极性溶剂提取物中总黄酮、总酚、麦角甾醇及腺苷含量;通过清除DPPH·、ABTS~+·、羟自由基以及总抗氧化和总还原能力来比较不同极性溶剂提取物的抗氧化活性。结果表明:不同极性溶剂提取物得率最高的为蒸馏水;蒸馏水提取物中还含有最高的总酚和腺苷;正乙烷提取物中总黄酮含量最高;甲醇提取物中麦角甾醇含量最高。蒸馏水和甲醇提取物具有更好的清除自由基效果;溶剂极性越大,抗氧化活性越强;综合抗氧化能力与总酚含量呈正相关。鸡枞菌中含有多种生物活性成分,具有很好的抗氧化作用。     

"长林" 系列油茶籽中4种非油类主要功能性成分比较

对"长林" 系列10个品种油茶籽种仁中4种非油类主要功能性成分进行测定和分析,采用香草醛-冰醋酸-高氯酸比色法测定总三萜含量,采用亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定总黄酮含量,采用苯酚-浓硫酸比色法测定总多糖含量,采用Lowry法测定总蛋白含量。结果表明,总蛋白质量分数为12.96%～17.38%,总三萜为2.56%～5.37%,总多糖为0.65%～1.43%,总黄酮为0.53%～1.06%,4类功能性成分含量在油茶品种间均存在较大的差异。因此,针对油茶不同功效产品的开发应选择相应的品种。     

以环核苷酸和三萜酸为评价指标确定枣果最佳采收期

以环核苷酸(环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷)和三萜酸(白桦脂酸、齐墩果酸和熊果酸)含量为评价指标考察河北产地3种不同品种枣果的最佳采收期。采用快速溶剂萃取法以上述5种成分为指标对枣果进行提取并优化提取条件,利用高效液相色谱法测定8、9、10月份采摘的河北行唐大枣、河北武邑大枣、小枣和马牙枣枣果中环核苷酸和三萜酸的含量,以环核苷酸和三萜酸总含量作为评价枣果采收期指标。结果发现,行唐大枣的最佳采收期为9月份,武邑大枣、小枣以及马牙枣的最佳采收期均为8月份,表明不同品种枣果中营养成分含量变化存在明显差异。研究结果为开发枣功能性食品提供参考依据。     

蜜环菌水溶性多糖的分离鉴定与发酵条件优化

目的:筛选出产蜜环菌多糖和菌丝体生长的最适碳氮源,对蜜环菌水溶性多糖进行结构和组成分析。方法:改变蜜环菌发酵的不同种类碳氮源,测定多糖含量和菌体干重,经热水浸提、除蛋白等步骤分离纯化到水溶性多糖,利用紫外、红外光谱、气相衍生化法分析其基本结构信息。结果:红薯粉和豆粕的组合最适合产多糖,玉米浆和玉米粉的组合菌丝体得率最高;多糖结构由吡喃葡萄糖组成。结论:在富含天然类成分的培养基中,蜜环菌菌丝体生长和产多糖能力较高;提取到的水溶性多糖,成分单一;糖醇乙酸酯气相衍生化法可简便、准确地测出蜜环菌多糖中所含的各种单糖。     

HPLC法同时测定蛹虫草中虫草素、腺苷和麦角甾醇的含量

建立一种利用高效液相色谱法同时测定蛹虫草中虫草素、腺苷和麦角甾醇含量的方法,并对沈阳、广东、江苏3个产地的蛹虫草进行测定结果的比较。结果表明,虫草素、腺苷和麦角甾醇分别在5μg/mL～65μg/mL、5μg/mL～35μg/mL和25μg/mL～300μg/mL范围内线性关系良好,江苏的虫草素含量最高,为1.3 mg/g,广东的含量最低,为0.5 mg/g,广东的腺苷和麦角甾醇含量最高分别为1.9、5.8 mg/g。不同产地蛹虫草中的腺苷、虫草素和麦角甾醇的含量差异较大;该方法准确性高,重复性好,适用于蛹虫草中腺苷、虫草素和麦角甾醇的含量测定,为其质量评价提供参考。     

榛蘑与菌丝体中蜜环菌素的超声波辅助提取条件优化及其提取物中化合物分析

目的:为分析榛蘑与菌丝体中化合物差异,本研究以东北野生榛蘑子实体和液态菌丝体为研究对象,探究蜜环菌素的最佳提取工艺条件,并对提取物中化合物进行分析。方法:以提取物得率和蜜环菌素含量为指标,采用超声波细胞破碎辅助石油醚进行萃取,通过单因素实验和正交试验对提取工艺参数进行优化;采用超高效液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）技术,对液态菌丝体和榛蘑子实体中化合物进行分析和鉴定。结果:确定最佳提取工艺条件为料液比1:20 g/mL,超声波功率300 W,超声时间20 min,溶剂回流时间50 min,在该条件下液态菌丝体提取物得率为26.8%,蜜环菌素含量为0.74 mg/g;液态菌丝体和榛蘑子实体中化合物分别为305和592个。解析出16种蜜环菌素类和5种疑似蜜环菌素碎片物质,其中菌丝体中含有15种蜜环菌素和3种碎片,总含量分别为2.551和0.588 μg/mL;子实体中含有7种蜜环菌素和4种碎片,总含量分别为2.413和2.124 μg/mL。两者同有组分有6种蜜环菌素和2种碎片;液态菌丝体独有9种蜜环菌素和1种碎片为:10-dehydroxymelleoloede、蜜环菌辛素、Arnamiol、蜜环菌壬素、A52a、4-dehydroxyarmillarin、蜜环菌丙素、（4R,5S,7R,9S,13R）-2’,5-epoxy-4-dehydroxyarmillarin、4’-demethoxyarmillaribin以及碎片C;榛蘑子实体独有1种蜜环菌素和2种碎片为:Melledonal以及碎片D和E。结论:液态菌丝体蜜环菌素类化合物多于子实体中,为开发辅助功能食品及药物提供参考。     

榛蘑多糖对尼古丁诱导大鼠肺损伤的保护作用

目的:研究榛蘑多糖（Armillaria mellea polysaccharides）对尼古丁诱导的大鼠肺损伤的保护作用及其作用机制。方法:将SD大鼠随机分为对照组,模型组,榛蘑多糖低、高剂量组。造模时,除对照组,其余各组腹腔注射尼古丁2 mg/kg体质量,榛蘑多糖低、高剂量组分别以200、400 mg/kg体质量灌胃榛蘑多糖。苏木精-伊红染色（Hematoxylin and Eeosin staining,HE）观察肺组织形态学变化;酶联免疫吸附方法检测肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白介素-6（interleukin-6,IL-6）、白细胞介素-1β（Interleukin 1β,IL-1β）水平,TBA法检测丙二醛（malonaldehyde,MDA）水平,WST-1法检测超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力;蛋白免疫印迹方法观察肺组织核因子相关因子2（nuclear factor erythroid 2-relted factor,Nrf2）、血红素加氧酶（heme oxygenase 1,HO-1）蛋白表达情况以及核因子-κB（nuclear fator-kappa B,NF-κB）蛋白的磷酸化水平。结果:与对照组相比,尼古丁诱导后血浆TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA水平升高,SOD活力降低,肺组织NF-κB蛋白磷酸化表达水平升高,Nrf2、HO-1蛋白表达水平下降;与模型组相比,榛蘑多糖干预后减轻肺组织损伤程度,明显降低血浆TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA水平,提高SOD活力,明显下调肺组织NF-κB蛋白磷酸化表达水平,提高Nrf2、HO-1蛋白表达水平。结论:榛蘑多糖对尼古丁诱导的肺损伤有抑制作用,其作用机制可能与NF-κB、Nrf2/HO-1信号通路的调控有关。     

HS-SPME/GC-MS法测定榛蘑中挥发性成分

为分析干品榛磨的挥发性成分,本文选用PDMS/DVB萃取头,应用顶空固相微萃取技术(HS-SPME),结合气相色谱-质谱检测方法(GC-MS),鉴定榛蘑中的挥发性成分,并以化合物匹配度≥90%为定性标准,采用峰面积归一化法计算各化学成分的相对质量分数。结果表明,SPME-GC-MS法可以较好的分离鉴定榛蘑中的挥发性成分。从榛蘑中鉴定出39种香气成分,占其总香气成分的88.74%,其中含酯类物质15种,含量为54.9%,酸类物质8种,含量为12.97%,芳香类物质4种,含量为7.25%。含量最高的三种化合物为顺-9-十八碳烯酸甲酯,9,12-十八碳二烯酸甲酯和油酸乙酯,含量分别为13.93%、12.7%和8.74%。研究证明弱极性的大分子酯类成分是干燥榛蘑的主要挥发性成分,为榛蘑干品的品质评价提供依据。     

蜜环菌的活性成分研究及其在功能性食品中的应用

蜜环菌(Armillariamellea)是一种与传统中药天麻(GastrodiaelataBlume)共生的著名的药用真菌。经国内外多年的研究,分离得到了蜜环菌多糖、倍半萜类化合物和嘌呤类化合物等多种活性成分并对其理化特性和生物活性进行了研究。经功能性实验证明,蜜环菌具有较强的神经调节功能,有明显的镇静作用,抗惊厥作用等,并可提高机体免疫功能。现已开发了大量的蜜环菌产品,包括脑心舒口服液、蜜环菌浸膏、蜜环菌片、蜜环菌糖浆等。本文主要介绍了蜜环菌的研究近况以及蜜环菌在功能性食品中的应用前景。     

固态发酵生产蜜环菌饮料

以蜜环菌固态发酵物为原料制得一种蜜环菌饮料。以蜜环菌固态发酵物为原料,提取其中的多糖等营养和药效成分,进行风味调配,通过正交试验和感官评价的方法确定蜜环菌饮料的配方。该发酵饮料的培养基配方为:白砂糖1.5%,大米80%,黄豆1%,麸皮10%,红薯7.5%;饮料配方为:蜜环菌发酵液添加比例为30%、白砂糖为20 g/L、柠檬酸0.6 g/L、黄原胶0.2 g/L,测得成品饮料中各成分的含量为:多糖0.049 mg/mL,还原糖0.042 mg/mL,蛋白质53.0 mg/mL,氨基酸1.226 mg/mL。饮料的感官指标、理化指标和微生物指标均达国家标准。     

珊瑚菌子实体和菌丝体营养成分与抗氧化活性的比较

采用国标及常规分析方法对珊瑚菌子实体和菌丝体中营养成分和活性物质多糖、多酚含量及其抗氧化活性进行分析,结果表明:珊瑚菌子实体与菌丝体碳水化合物含量分别为38.74±1.27%和63.55±3.17%;脂肪含量分别为2.52±0.14%和3.21±0.19%;蛋白含量分别为11.02±1.21%和22.30±1.18%;灰分含量分别为5.77±0.14%和5.98±0.11%。子实体矿质元素含量普遍高于其菌丝体,Mg元素除外;必须氨基酸,菌丝体含量(7.08±0.15)g/100 g高于其子实体(2.55±0.24)g/100 g。子实体多糖含量(23.22±1.60)mg/g低于其菌丝体(35.51±1.78)mg/g,多酚含量(6.85±0.41)mg/g高于其菌丝体(3.66±0.29)mg/g。比较珊瑚菌多糖、多酚体外抗氧化活性强弱依次为子实体多酚菌丝体多酚菌丝体多糖子实体多糖。研究表明对于珊瑚菌菌丝体多糖,有望代替子实体应用于食药产品,而菌丝体多酚仍有待进一步开发利用。     

酸浸高压法破壁对灵芝孢子中三种主要成分变化影响的研究

研究酸浸高压法对未破壁灵芝孢子中灵芝多糖、灵芝总三萜和麦角固醇含量的影响,与未经酸浸高压的未破壁及已破壁的灵芝孢子进行含量比较。以无水葡萄糖为对照品,用紫外–可见分光光度法,对灵芝孢子的灵芝多糖含量进行测定;以齐墩果酸为对照品,用紫外–可见分光光度法,对灵芝孢子的灵芝总三萜含量进行测定;以麦角固醇为对照品,用反相高效液相色谱法,对灵芝孢子的麦角固醇含量进行测定,根据结果对三种成分含量进行比较。结果表明,经酸浸高压的未破壁灵芝孢子,其灵芝多糖的含量明显高于未经酸浸高压的未破壁及已破壁灵芝孢子,其灵芝总三萜和麦角固醇的含量明显高于未经酸浸高压的未破壁灵芝孢子。酸浸高压法可作为一种新的灵芝孢子破壁方法,该法获得的灵芝多糖、灵芝总三萜和麦角固醇的含量明显高于对照组。     

不同枣品种果实中功能性成分含量的比较研究

采用紫外分光光度法对10个枣品种果实中总黄酮、总酚、三萜和皂苷等活性物质成分含量进行测定分析,评价不同枣品种果实功能性产品的开发价值。结果表明,10个枣品种果实中总黄酮、总酚、三萜和皂苷含量平均值分别为3.07、17.39、39.45、30.50 mg/g,相关性分析显示三萜含量与皂苷含量呈极显著的正相关。不同枣品种各活性物质成分含量对比和对应分析结果均显示,总黄酮与总酚含量最高的枣品种分别为灰枣优株、京39,三萜与皂苷含量最高的枣品种均为赞2与骏1。灰色关联度法研究表现为枣果实中功能性成分含量综合表现较高的枣品种依次为赞2、灰枣优株、京39、中枣1号、骏1,可作为新疆枣功能性产品开发的适宜品种。