猪肚菇子实体多糖的分离纯化及抗氧化活性测定

目的：研究多猪肚菇子实体多糖的抗氧化活性。方法：用热水浸提新鲜猪肚菇子实体,乙醇沉淀多糖,Sevag 法去除多糖中的蛋白,DEAE-52 纤维素柱层析、Sephadex S-200 凝胶柱层析进一步纯化,然后进行抗氧化活性测定。结果：DEAE 柱层析纯化后得到两种多糖组分A 和B,Sephadex S-200 凝胶柱层析证实A 为单一组分,组分A 的抗氧化活性测定结果显示其具有抗氧化活性,且抗氧化活性随其质量浓度的升高而升高。结论：分离纯化后的猪肚菇多糖具有抗氧化活性,且活性呈现剂量效应,随质量浓度升高而升高。     

紫芝胞外多糖分离纯化及抗氧化性的研究

目的:探讨紫芝(Ganoderma Sinense)胞外多糖的分离纯化及抗氧化活性.方法:采用乙醇沉淀法、聚酰胺脱蛋白法,DEAE-52阴离子交换色谱柱法分离纯化紫芝胞外多糖;通过对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基的清除能力的测定确定抗氧化活性.结果:粗多糖经DEAE-52柱层析纯化得到三种多糖组分GSP1、GSP2和GSP3,均具有抗氧化活性.其中GSP2的抗氧化活性尤为明显,在1.6mg/mL时DPPH自由基清除率达到76.3％;在5mg/mL时羟自由基的清除率达到81.5％.结论:三种紫芝胞外多糖组分具有较强的抗氧化活性,其中GSP2最为明显.     

橄榄叶黄酮类抗氧化物质的分离纯化研究

将橄榄液黄酮粗提取液用聚酰胺柱层析分离,所分离的组分经抗氧化活性筛选得到A5,再由制备型薄层色谱纯化样品A5,经过抗氧化活性筛选得到C3,经过高效液相色谱分析,结果表明,所得到的组分是一个纯物质.     

金针菇多糖制备过程中体外抗氧化活性研究

采用热水浸提、乙醇沉淀、Sevage法除蛋白的方法对金针菇多糖进行提取及纯化,依次得到不同纯度的粗多糖,分别为金针菇多糖1(Flammulina velutipes polysaccharide1,FVP1)、金针菇多糖2(Flammulina velutipes polysaccharide2,FVP2)、金针菇多糖3(Flammulina velutipes polysaccharide3,FVP3),研究纯化过程中金针菇多糖的含量及抗氧化活性变化。采用苯酚硫酸法和3,5-二硝基水杨酸法(3,5-dinitrosalicylic acid,DNS)分别测定提取物中的总糖及还原糖含量,以总抗氧化能力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力及抑制羟基自由基能力为检测指标,对纯化过程中金针菇粗多糖的抗氧化能力进行评价。结果表明:FVP1、FVP2、FVP3中多糖的含量分别为10.35%、19.48%、55.21%;得率分别为54.9%、9.26%、1.52%。以上3种不同纯度金针菇粗多糖在0.5 mg/mL~2.0 mg/mL的浓度范围内抗氧化活性能力大小依次为:抑制羟基自由基能力清除DPPH自由基能力总抗氧化能力。FVP1、FVP2、FVP3抗氧化能力均随着浓度升高而增强,抗氧化能力的大小依次为FVP1FVP2FVP3,这表明分离纯化工艺有降低金针菇多糖体外抗氧化能力的趋势。     

云南铜色牛肝菌多糖分离纯化及抗氧化活性研究

通过对铜色牛肝菌多糖进行分离纯化和活性分析,为野生铜色牛肝菌的进一步推广和应用提供理论依据。本研究采用热水浸提法提取的粗多糖为原料,并利用DEAE-52纤维素柱层析和Sephadex G-100柱层析对所获得的粗多糖进行纯化,得到两种单一多糖PB-1A、PB-2A,比旋光度和紫外扫描方法鉴定多糖的纯度。通过体外抗氧化实验评价体系研究,比较铜色牛肝菌粗多糖及纯化后的多糖PB-1A、PB-2A对羟基自由基、DPPH自由基的清除活性以及总还原能力。结果表明:铜色牛肝菌多纯化糖前后的对羟基自由基、DPPH自由基的清除活性以及总还原能力呈现一定效量关系,且均为PB-2APB-1A铜色牛肝菌粗多糖。     

金针菇多糖-Zn~(2+)螯合物对L929肿瘤细胞的增殖抑制作用及其抗氧化活性

比较研究金针菇多糖-Zn~(2+)螯合前后的抗肿瘤作用与其体外抗氧化活性。通过小鼠成纤维肉瘤细胞L929培养实验,观察不同质量浓度金针菇多糖溶液对体外培养L929细胞形态的影响,四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)实验评价金针菇多糖对L929细胞生长和增殖的影响。结果表明:在质量浓度为5~50μg/mL时,金针菇粗多糖及其纯化组分对L929细胞的抑制作用不强烈,金针菇多糖-Zn~(2+)对L929细胞有较强的抑制作用。相比较金针菇多糖直接作用于L929细胞,金针菇多糖介导的RAW 264.7巨噬细胞上清液对L929细胞的抑制率作用显著增强。同时,以对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、超氧阴离子自由基(O_2~-·)、羟自由基(·OH)、H_2O_2的清除率为评价指标,体外抗氧化实验结果显示金针菇多糖-Zn~(2+)抗氧化活性较螯合Zn~(2+)前有所提高。即金针菇多糖中Zn含量的提高有助于提升其抗氧化活性。     

玉米淀粉及黄浆发酵产小核菌多糖抗氧化活性

玉米淀粉及黄浆发酵产小核菌粗多糖,探究其体外抗氧化活性,分别考察小核菌粗多糖对ABTS自由基、超氧阴离子自由基和亚硝基自由基的清除能力及其对亚油酸过氧化的抑制作用。小核菌粗多糖经Sephacryl S400-HR凝胶柱层析分离纯化,得到两个组分FRAC1和FRAC2,红外光谱分析表明FRAC1和FRAC2中存在C==O键及—OH基团。小核菌粗多糖对ABTS自由基有较好的清除效果;对超氧阴离子自由基和亚硝基自由基有一定的清除效果,清除能力随粗多糖的质量浓度增大而升高。试验表明,玉米淀粉及黄浆发酵获得的小核菌粗多糖具有一定的抗氧化活性。     

桦褐孔菌多糖的分离纯化及其抗氧化活性测定

以桦褐孔菌为原料,测定其化学组分,并采用水提醇沉法提取桦褐孔菌粗多糖（IOP）。将获取的桦褐孔菌粗多糖进行脱蛋白、脱色素的初步纯化,然后利用DEAE-52纤维素层析柱及Sephadex-100凝胶柱对多糖提取液进行分离纯化,通过抗氧化活性筛选出活性较高的多糖组分,并通过高效液相色谱分析多糖组分的纯度。实验结果表明,桦褐孔菌子实体的化学成分组成丰富,其中多糖13.10%±0.31%、还原糖4.21%±0.40%、蛋白质2.70%±0.71%、灰分9.60%±0.31%。通过对桦褐孔菌粗多糖脱蛋白、脱色素的试验方法进行筛选,得到聚酰胺层析法为最佳的脱除方法。蛋白质的脱除率为93.1%、脱色率为75.8%,多糖的保留率为90.3%。IOP经过DEAE-52纤维素柱层析后得到四个单糖组分:IOP-1、IOP-2、IOP-3、IOP-4。对四个多糖组分进行抗氧化实验发现,IOP-2对DPPH自由基的清除率最高,清除率为81.9%。IOP-2经过Sephadex-100层析柱后获得两个多糖组分:IOP-2a、IOP-2b。对比其抗氧化活性,筛选出活性较高的多糖组分为IOP-2a。采用高效液相色谱法鉴定多糖组分IOP-2a,只检查出一个对称峰,说明IOP-2a为均一性多糖。     

化橘红多糖的提取纯化及抗氧化活性研究

对化橘红粗多糖及其纯化组分的抗氧化活性进行研究。化橘红粉末经热水提取、乙醇沉淀、sevage法脱蛋白、透析得到粗多糖,粗多糖经DEAE-52纤维素阴离子交换层析柱分离,得到2个纯化组份ECP1和ECP2。采用化学法分别测定了粗多糖及其纯化组分的体外清除自由基(DPPH.,.OH,ABTS.+)能力、还原能力。粗多糖的多糖含量为74.29%,经DEAE-52纯化的组分ECP1和ECP2的多糖含量分别为83.39%和85.77%。结果表明粗多糖及其两个纯化组分均具有较好的抗氧化清除自由基的能力,并且抗氧化能力与多糖浓度之间存在良好的相关性。其中ECP2的抗氧化清除自由基能力强于ECP和ECP1,但是低于对照VC。     

胡萝卜多糖硫酸酯化修饰及其抗氧化活性研究

采用水提醇沉法提取胡萝卜粗多糖,经Sevage法与木瓜蛋白酶相结合法除蛋白后,以DEAE纤维素柱层析分离纯化得到具有抗氧化活性的多糖组分。用浓硫酸法对其进行硫酸酯化修饰,经红外光谱比和硫酸钡比浊法定性定量分析多糖酯化率。研究结果表明:当硫酸取代度为18.4%,即硫酸酯化率为2.94时硫酸酯化胡萝卜多糖的抗氧化活性比未修饰多糖增加1.5倍。     

沙棘果水溶性多糖的分离纯化、组分分析及抗氧化活性的研究

用热水提取沙棘果多糖，乙醇沉淀，并用正交实验确定最佳条件，Sevage法去蛋白，酸性乙醇分级沉淀，分出A、B、C及D四个组分，其中C用DEAE柱层析进一步纯化出C1和C2两个级分，Sephadex G-75及聚丙烯酰胺凝胶电泳证明C1为单一组分，C2为两种多糖混合组分，经薄层层析分析，C1中含葡萄糖。C2的主要级分中含木糖和一未知组分。抗氧化实验表明沙棘多糖具有抗氧化活性，且抗氧化作用随浓度增加而加大。     

桦褐孔菌多糖脱色方法及其成分分析

对桦褐孔菌多糖的脱色方法和单糖的组成进行研究。首先考察活性炭粉、过氧化氢、壳聚糖、聚酰胺层析柱的脱色效果。经脱蛋白、脱色后的多糖进行1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生化,采用高效液相色谱法分析单糖组成。4 种脱色方法对桦褐孔菌多糖均有效果,活性炭和聚酰胺层析柱脱色效果明显优于过氧化氢和壳聚糖脱色法,聚酰胺层析柱脱色是较好的方法,其脱色率为89.3%、多糖保留率为91.7%。结果表明：桦褐孔菌多糖粗品主要由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖组成,其物质的量比为2.13∶1.36∶7.01∶2.98∶1∶1.78。     

兰州肉苁蓉多糖的组成分析及抗氧化活性

对兰州肉苁蓉多糖进行组成分析和抗氧化活性研究。采用沙生植物兰州肉苁蓉肉质茎鲜样,使用传统水提醇沉法进行兰州肉苁蓉粗多糖（CLP）的提取,利用DEAE-纤维素阴离子交换色谱柱法对粗多糖CLP进行洗脱,得到中性糖CLP-1和酸性糖CLP-2。用高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）和高效液相色谱法（HPLC）对其分子量和单糖组成进行测定,通过DPPH自由基清除实验和总抗氧化能力实验进行抗氧化活性测定。根据HPGPC对分子量测定得出兰州肉苁蓉多糖有多个洗脱峰,其多糖分子量主要分布在0~10 kDa之间,为不均一的小分子量杂多糖;经过分级得到的中性糖CLP-1和酸性糖CLP-2的单糖组成差异明显,CLP-1中较明显的单糖及占比分别为:甘露糖2.78%、半乳糖醛酸4.07%、葡萄糖88.62%、半乳糖1.80%、阿拉伯糖2.39%;CLP-2中为:鼠李糖5.79%、半乳糖醛酸7.78%、葡萄糖9.99%、半乳糖13.30%。根据抗氧化实验结果分析,CLP-1的抗氧化效果最好,2.0 mg/mL浓度下对DPPH自由基清除能力高达91.73%,IC₅₀为0.383 mg/mL,且同一浓度下总抗氧化能力高于CLP和CLP-2。本文对兰州肉苁蓉多糖进行初步分析,为兰州肉苁蓉的进一步研究提供基础的数据支撑。     

冬枣多糖的分离纯化及抗氧化活性研究

目的：分离纯化冬枣多糖,并研究其组分、结构特征和抗氧化活性。方法：采用水提醇沉、脱蛋白脱色、DEAE-52纤维素柱和Sephadex G-100凝胶色谱柱分离纯化冬枣多糖;利用Sephadex G-100凝胶色谱柱进行纯度鉴定和分子质量的测定;通过紫外光谱、红外光谱、气相色谱法进行了初步结构分析;采用邻二氮菲法和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）体系对纯化多糖进行抗氧化活性的研究。结果：冬枣多糖经DEAE-52分离和Sephadex G-100纯化得到2 个组分DPA和DPB,经Sephadex G-100鉴定均为均一组分,DPA和DPB分子质量分别为1.04×104、3.02×105 D,不含蛋白质和核酸,为吡喃型糖苷环骨架,DPA的单糖组成为阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其物质的量比为6.66∶1.00∶6.75∶2.09;DPB的单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其物质的量比为4.33∶10.90∶1.00∶3.25∶4.78;DPA和DPB均具有一定的抗氧化活性,随着多糖质量浓度的增加,其抗氧化活性增强,在质量浓度为8 mg/mL时对羟自由基清除率分别为28.52%、78.79%,在质量浓度为0.4 mg/mL时对DPPH自由基清除率分别为9.97%、24.54%。结论：DPA和DPB均具有一定的抗氧化活性。     

绿球藻多糖分离纯化及抗氧化活性研究

天然多糖具有良好的生物活性和功能,而微藻具有生长速度快、适应性强、在人工培养下能够大量繁殖、占地面积小、生产成本低等特性。为深入挖掘更多的微藻多糖资源,采用传统热水浸提方法对绿球藻(Chlorococcum sp.GD)多糖进行分离,并采用DEAE-52纤维素柱层析和Sephadex G-150柱层析对所获得的粗多糖进行纯化,并研究其抗氧化活性。结果表明:1)粗多糖提取率为6.07%,通过分级纯化,得到4个组分CPP-Ⅰ、CPP-Ⅱ、CPP-Ⅲ和CPP-Ⅳ,且纯度较高;2)绿球藻纯化多糖对DPPH自由基和羟基自由基具有明显的清除效果,清除率分别超过90%和70%,且纯化组分CPP-Ⅳ的效果优于粗多糖;3)绿球藻纯化多糖对超氧阴离子和ABTS+自由基也具有一定的清除效果,清除率分别超过50%和27%,且还原力为0.404。研究结果虽然低于VC的清除率,但仍然表明绿球藻多糖纯化后具有较好的抗氧化活性,并且清除率随多糖的浓度增大而增加。     

单环刺螠体壁多糖的分离纯化、理化性质及抗脂质过氧化活性

为研究和开发单环刺螠中活性多糖成分,采用酶法提取和色谱分离技术,从单环刺螠的体壁中提取分离多糖组分,采用化学和仪器分析方法对其单糖组成、分子质量等理化性质进行研究,并通过体外清除脂质过氧化物实验对其进行初步的活性评价。结果表明：采用木瓜蛋白酶和胰蛋白酶两步酶解后,单环刺螠多糖（unicinctus polysaccharide,UP）得率为5.3%。通过离子交换柱层析分离纯化后主要得到两个组分UP-1和UP-2。UP-1是主要由葡萄糖（Glc）组成的高聚葡聚糖,分子质量340 kD,而UP-2为组成复杂的类糖胺聚糖,分子质量约为7.9 kD,主要含有葡萄糖（Glc）、半乳糖（Gal）、氨基葡萄糖（GlcN）和岩藻糖（Fuc）,还含有少量的甘露糖（Man）和氨基半乳糖（GalN）。其单糖组成Man、GlcN、GalN、Glc、Gal、Fuc物质的量比例为1.0∶1.47∶0.64∶6.49∶2.5∶3.0。和其他海洋动物来源类糖胺聚糖类似,UP-2还含有少量的硫酸基,含量为7.4%。对UP-1和UP-2进行初步体外抗氧化活性研究表明,类糖胺聚糖UP-2具有显著的脂质过氧化物清除活性,半数清除质量浓度为5.0 mg/mL。     

南海鸢乌贼墨汁多糖分离纯化及组分分析

目的:从南海鸢乌贼墨汁中分离纯化多糖,并分析其多糖组分。方法:利用水提醇沉法得粗多糖,通过固相萃取层析法除色素对多糖进行纯化,纯化多糖依次经DEAE-52离子交换柱、Sephacryl HR-300凝胶柱分级纯化,按峰收集得单一组分,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,PMP)衍生化方法,通过超高效液相色谱分析多糖组分。结果:粗多糖经DEAE-52离子交换柱、Sephacryl HR-300凝胶柱后收集得到3个糖组分,分别为SIP1、SIP2、SIP3;通过PMP衍生化方法分析单糖组成,得:SIP1是由D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖3种单糖缩合而成;SIP2和SIP3分别是由D-甘露糖、鼠李糖、D-葡萄糖、D-半乳糖及L-(-)-岩藻糖5种单糖按照不同比例缩合而成。     

鸡胸软骨多糖组分的分级及自由基清除活性研究

直接用木瓜蛋白酶水解鸡胸软骨,经三氯乙酸除蛋白质、乙醇沉淀、干燥得多糖粗品,采用DEAESepharoseFast Flow 离子交换柱色谱和Sepharose 6B Fast Flow 分离纯化粗多糖,并进行光谱学分析和自由基清除活性研究。结果显示：乙醇沉淀多糖的自由基清除活性显著高于初步透析后的粗多糖,纯化后的硫酸软素的活性最小。粗多糖经DEAE-Sepharose Fast Flow 离子交换柱层析和Sepharose 6B Fast Flow 凝胶柱层析后,得到硫酸软骨素和其他5 种非糖胺聚糖类多糖。5 种多糖的自由基清除活性均显著大于硫酸软骨素。     

双孢菇菇柄多糖柱层析纯化及单糖组成

以双孢菇菇柄为试材,首先对经超声提取得到的菇柄多糖进行柱层析分离纯化,然后对柱层析得到的多糖组分别采用紫外光谱和柱层析进行纯度分析,并进行红外光谱分析和单糖组成分析。结果表明,脱蛋白双孢菇菇柄多糖经DEAE Sephadex A-25柱层析纯化共得到4个组分,收集其中两个较多的组分(蒸馏水和0.1 mol/L NaCl洗脱组分),经紫外光谱扫描无核酸和蛋白质,经Sephadex G-200柱层析鉴定均为单一峰。所得两种多糖组分经FT-IR红外光谱分析,均含有多糖特征吸收峰,且均为吡喃糖环β-异构体的多糖。菇柄蒸馏水洗脱多糖组分由葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖、阿拉伯糖组成,0.1 mol/L NaCl洗脱组分是由葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖、阿拉伯糖、鼠李糖、氨基葡萄糖、氨基半乳糖组成。