EGCG乙酰化衍生物清除自由基活性的构效分析

以不同取代度乙酰化表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)为对象,研究了在逐步取代过程中高效液相色谱图出峰时间的变化,以及总抗氧化活性、清除羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH自由基活性。结果表明:乙酰化EGCG出峰时间为14.6~30.6 min,随着乙酸酐添加量的增多,取代羟基数逐渐增加,出峰时间逐渐向后推移。乙酰化EGCG的清除自由基活性表现出不同的规律,其中,总抗氧化活性、清除DPPH自由基活性和清除羟自由基活性随着取代度增加逐渐减弱,其中乙酰化EGCG清除羟自由基活性转变为产生羟自由基活性,清除超氧阴离子自由基活性随着取代度的增加会先升高后降低。由此可见,随着乙酰化程度的增加,EGCG的抗氧化活性有所下降,为乙酰化EGCG产品的研发提供理论依据。     

四川黑茶活性成分、抗氧化能力及品质评价

目的：以26种市售四川黑茶（S1~S26）为材料,分析茶多酚单体、咖啡碱（CAF）、总多酚（TPC）和总黄酮（TFC）含量,并考察其体外抗氧化活性。方法：采用梯度洗脱分析茶多酚单体、咖啡碱含量,分别采用福林酚法和化学分析法分析总多酚和总黄酮含量,并以DPPH自由基和ABTS自由基清除能力评价抗氧化活性。结果：黑茶中没食子酸（GA）、没食子儿茶素（GC）、表没食子儿茶素（EGC）、儿茶素（C）、表儿茶素（EC）、表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）、没食子儿茶素没食子酸酯（GCG）、表没食子儿茶素（ECG）、儿茶素没食子酸酯（CG）、咖啡碱（CAF）、总酚酸（TPC）、总黄酮（TFC）含量分别为0.26~19.64,0.72~4.73,0.00~20.28,0.00~0.95,0.00~6.06,0.32~9.44,0.62~63.12,0.29~17.08,0.21~1.81,9.53~44.43,20.96~279.05,7.92~17.49 mg/g。ABTS自由基清除力以水溶性维生素E当量计算为33.49~232.87 mg/g,DPPH自由基清除力以水溶性维生素E当量计算为45.26~237.59 mg/g。相关性分析表明DPPH自由基清除能力与10个单体化合物以及总多酚和总黄酮含量均存在显著（P＜0.05）或极显著（P＜0.01）的正相关;ABTS自由基清除能力与GC、GA、CAF含量存在极显著正相关（P＜0.01）,与TPC和TFC含量存在显著正相关（P＜0.05）。主成分分析表明EGCG、C、TPC 3个成分累计贡献率为87.566%。结论：S16、S23、S19 3种黑茶得分较高,品质较好。     

茶提取物抗氧化活性与茶多酚、儿茶素关系探究

以6种茶提取物为研究对象,测定它们的总酚含量、儿茶素含量以及抗氧化能力和自由基清除率。根据实验结果分析茶的抗氧化活性、自由基清除率与总酚含量、儿茶素含量之间的关系。分析结果显示:茶提取物抗氧化活性与总酚含量的相关性总体上高于与儿茶素总量和EGCG的相关性,表明茶多酚中非儿茶素类多酚物质同样具有重要的抗氧化能力;茶提取物抗氧化活性与EGCG含量的相关性总体上高于与儿茶素总量的相关性,表明EGCG的抗氧化活性高于儿茶素的平均水平;总酚、儿茶素、EGCG对不同自由基的清除能力不同。     

3个引进油橄榄品种初榨油多酚类化合物含量及抗氧化活性研究

以3个引进油橄榄品种初榨油为材料,测定总多酚含量和各单体酚含量并评价其抗氧化活性,同时采用SPSS应用软件分析总多酚含量、各单体酚含量与体外抗氧化活性的相关性。结果表明:3个品种总多酚含量分别为21.26、23.31、26.04μg/g,品种间无显著差异,而单体酚含量均较少;3个品种中佛奥对DPPH自由基的清除能力最强,而对羟基自由基的清除能力和Fe2+螯合能力则是豆果最强;羟基酪醇含量与DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力和Fe2+螯合能力极显著负相关或显著正相关,相关系数分别为-0.956、0.713、0.721;对羟基苯甲酸含量与Fe2+螯合能力显著正相关;槲皮素含量与DPPH自由基清除能力显著负相关,与Fe2+螯合能力显著正相关;而总多酚含量、咖啡酸和表儿茶素含量与体外抗氧化能力的的相关程度较低,因此羟基酪醇、对羟基苯甲酸和槲皮素是主要的抗氧化成分。     

红苋菜提取物抗氧化活性的研究

研究红苋菜不同部位提取物的抗氧化活性。用75%的乙醇溶液,分别对红苋菜的根、茎、叶3个部位进行超声浸提,进一步评价各提取物清除超氧自由基、清除DPPH自由基、清除羟自由基、总抗氧化力与还原力。结果发现,叶部位提取物对超氧自由基清除、DPPH自由基清除和总抗氧化力最强;而茎部提取物清除羟自由基能力最强。红苋菜具有较好的抗氧化活性,其中活性较强的部位为叶。     

大麦发芽过程中不同存在形式的酚类物质及其抗氧化活性变化

以甘啤4号为原料,研究发芽过程中4类多酚物质提取物的含量及其抗氧化活性的变化,采用的评价指标为DPPH自由基清除活性、ABTS自由基清除活性和铁还原力,同时利用HPLC法依次检测4类粗多酚中9种单体酚酸的含量及其变化。试验结果表明:发芽显著影响大麦粗多酚、单体酚酸的种类和含量及其抗氧化活性。游离粗多酚在原麦和萌发过程中始终占总粗多酚含量的最大比例,并且其综合抗氧化活力也显著高于其它3类粗多酚提取物。4类粗多酚提取物和各单体酚酸的总含量及抗氧活性总是原麦高于各萌发时期,在浸泡阶段统一显著下降,萌发后期又有显著升高。相关性分析表明,4类粗多酚的铁还原能力、清除DPPH和ABTS自由基的能力均与其含量密切相关,与粗多酚显著相关的单体酚酸,同样显著影响着其抗氧化活性。阿魏酸、儿茶素、对香豆酸是主要的活性酚酸。     

浒苔多酚在鲣鱼肉冻融过程中的抗脂质氧化活性研究

目的 探究浒苔多酚及其3种主要单体多酚在鲣鱼肉冻融过程中的抗脂质氧化活性与其单体多酚之间的联系。方法 分别用蒸馏水和质量分数为0.1%的表儿茶素(epicatechin, EC)、表儿茶素没食子酸酯(epicatechin gallate, ECG)、表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate, EGCG)、浒苔多酚溶液对5组鲣鱼肉进行浸泡处理, 再分别进行0、1、3、5次冻融循环, 测定比较5组鱼肉的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH)自由基、2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐[2,2’-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) ammonium salt, ABTS]阳离子自由基清除率、还原力、过氧化值、硫代巴比妥酸反应物、酸价、游离脂肪酸含量、脂质羰基值和双烯值, 分析浒苔多酚抗氧化活性与其单体多酚之间的关系。结果 浒苔多酚对鲣鱼肉的脂质氧化具有较强的抑制作用, 主要与EC、ECG和EGCG螯合金属离子、清除自由基和捕获羰基的能力有关。其中, EGCG是浒苔多酚发挥抗氧化作用的关键成分。EC、ECG和EGCG较强的脂质抗氧化活性与其B环儿茶酚部分和A环C-5,7羟基密切相关, 而其脂质抗氧化活性的差异取决于B环和C环相连基团的不同。同时, 浒苔多酚6种单体多酚之间可能存在着拮抗作用。结论 浒苔多酚的脂质抗氧化活性与其3种主要单体多酚的化学结构密切相关, 本研究为浒苔多酚作为天然抗氧化剂用于冷冻鲣鱼肉保鲜的可行性提供了理论依据。     

枯草芽孢杆菌发酵对豆类中酚类物质及抗氧化活性的影响

多酚是豆类的主要活性成分,对该类食品的抗氧化功能具有重要影响。本研究利用枯草芽孢杆菌ATCC 6051发酵8种豆类,分析发酵对豆类食品中酚类物质含量和抗氧化活性的影响。发酵红豆、菜豆、蚕豆、绿豆、大豆、扁豆和豌豆的总酚含量分别增加了24.19%,57.89%,123.78%,172.90%,225.32%,300.00%,343.17%。对发酵前、后8种豆类中19种酚类化合物含量的比较发现,发酵影响儿茶素、表儿茶素、水杨酸和芥子酸的含量。发酵绿豆、大豆、豌豆和扁豆提取物的DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除活性以及铁离子还原能力均提高。总酚含量与DPPH自由基清除活性、ABTS+自由基清除活性以及铁离子还原能力均极显著相关(P<0.01),儿茶素、水杨酸和芥子酸与DPPH极显著相关(P<0.01),表儿茶素与DPPH显著相关(P<0.05)。研究表明,绿豆、大豆、豌豆和扁豆是利用枯草芽孢杆菌发酵制备富含酚类和高抗氧化活性产品的理想食品原料,适用于发酵豆类功能食品的开发。     

多酚类单体物质抗氧化活性的研究

以抗坏血酸作为对照,采用邻苯三酚自氧化法,邻二氮菲-Fe2+法和DPPH法评价了茶多酚(儿茶素80.9%)、芦丁-NF11、黄岑甙、柚皮甙四种多酚类黄酮清除自由基的能力和对油脂的抗氧化能力,并简述了多酚单体抗氧化活性的强弱与其结构的关系。结果显示:在清除超氧阴离子自由基(O2-.)和清除羟基自由基(.OH)能力上,茶多酚、芦丁的作用都强于黄岑甙与柚皮甙;在清除DPPH自由基方面,茶多酚、芦丁、黄岑甙作用较明显,都超过了60%,而柚皮甙的清除率最弱;在抗油脂自动氧化能力方面,芦丁作用最强,黄岑甙最弱。多酚单体的抗氧化活性主要取决于其B环上的邻二羟基结构。     

贮藏时间对雅安藏茶中活性成分及其抗氧化活性的影响

为研究贮藏过程中雅安藏茶中茶色素、多酚及其抗氧化活性的变化情况,对不同贮藏时间藏茶中茶色素、总多酚、总黄酮及其抗氧化活性进行比较。结果表明,随着贮藏时间从4年递增到10年的过程中,藏茶中茶褐素含量从5.95 g/100 g显著提升到8.54 g/100 g（P<0.05）,而茶黄素、茶红素、总多酚、总黄酮、咖啡碱、儿茶素以及儿茶素单体（EGC、CG、ECG、EGCG、EC）含量显著降低（P<0.05）。此外,藏茶ABTS自由基清除能力从6759.54 μg/g显著减弱到4086.43 μg/g（P<0.05）,而DPPH自由基清除能力同样从43.50 μg/g显著减弱到 21.02 μg/g（P<0.05）,且与总多酚、总黄酮、儿茶素、咖啡碱、EGC、EC、EGCG、ECG、茶红素、茶黄素呈显著正相关（P<0.05）。而茶褐素与总多酚、总黄酮、儿茶素、咖啡碱、CG、EGC、EC、EGCG、ECG、茶黄素以及茶红素呈现显著负相关（P<0.05）。贮藏时间越长,藏茶中多酚类物质降低而茶褐素含量越高,使得陈化藏茶具有降脂减肥等保健功效。     

Lipase-catalyzed synthesis of acetylated EGCG and antioxidant properties of the acetylated derivatives

(−)-Epigallocatechin-3-O-gallate (EGCG) acetylated derivatives were prepared by lipase catalyzed acylation of EGCG with vinyl acetate to improve its lipophilicity and expand its application in lipophilic media. The immobilized lipase, Lipozyme RM IM, was found to be the optimum catalyst. The optimized conditions were as follows, 1:1 of the molar ratio of EGCG to vinyl acetate, 2.0% (w/w of both substrates) of enzyme amount, and 84.5% conversion was obtained after 8 h reaction at 40 °C in acetonitrile. The presence of mono-, di- and tri-acetylated derivatives in acetylated EGCG were confirmed by LC–MS–MS and the tri-acetylated EGCG was identified as 5′,3″,5″-3-O-acetyl-EGCG by NMR. Their enhanced lipophilicity was confirmed by octanol–water partition coefficient. The antioxidant activity of the acetylated EGCG derivatives were superior to butylated hydroxytoluene (BHT), tert-butyl hydroquinone (TBHQ) and EGCG as determined by peroxide values (POVs) in sunflower oil as well as by the p-anisidine method. Acetylated EGCG exhibited the highest 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity (IC₅₀ of 0.09 mg/mL) compared to EGCG, BHT and TBHQ. Acetylated EGCG might be used as a potent antioxidant for controlling oxidation of sunflower oil.     

酶促乙酰化EGCG清除自由基及抗脂质过氧化活性研究

利用脂肪酶Lipozyme RM IM在乙腈反应体系中催化表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)与乙酸乙烯酯进行乙酰化反应,得到EGCG乙酰化产物。通过液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)和红外光谱对乙酰化产物进行了确证,其产物为不同取代度的混合物。反应前后红外图谱对照表明,酰化后EGCG主体结构与EGCG类似,但增加了明显的羰基、甲基吸收峰。通过测定乙酰化EGCG对超氧阴离子自由基(O2-·)、羟基自由基(·OH)、DPPH自由基的清除能力,研究其体外抗氧化活性,结果表明乙酰化EGCG对O2-·、·OH、DPPH·均具有较强的清除能力,半抑制率(IC50)分别为0.52 mg/mL、0.43 mg/mL和11.5 mg/L。体外抗脂质过氧化实验表明当乙酰化EGCG浓度为320 mg/L时,对H2O2诱导大鼠肝线粒体丙二醛(MDA)生成的抑制率为61.11%,对H2O2诱导大鼠红细胞氧化溶血的抑制率达93.54%。乙酰化EGCG具有良好的体外抗氧化活性,其浓度与抗氧化活性呈现一定的量效关系。     

六堡茶在体外模拟胃肠道消化过程中的成分变化与抗氧化活性变化

本文通过胃肠道消化,研究了六堡毛茶、成品茶中主要酚类物质在的含量、抗氧化能力上的变化,并以成品茶乙酸乙酯相作为对照。说明六堡茶制作过程中成分的差异导致抗氧化活性上的变化。消化前,六堡毛茶中GA含量相对较高;六堡成品茶中咖啡碱含量相对较高。消化后,主要的酚类物质(GA、原儿茶酸、原花青素、EGCG、GCG和ECG)均有80~90%的下降。抗氧化性随之降低。GA、原花青素、EGCG、ECG和GCG在毛茶水提物中与抗氧化活性呈显著相关性,在六堡茶水提物中原花青素(0.994)、EGCG(0.997)呈极其显著相关。六堡毛茶和六堡成品茶的酚类含量分别为28.41%和17.87%,对应的抗氧化能力为16.73 mg/L和15.37 mg/L。消化以后,多酚含量分别下降了68.85%和69.72%,对应的抗氧化活性下降了88%和82%。六堡成品茶抗氧化功能下降比例更低,保持能力更强。最可能影响的抗氧化活性的物质为GA、原花青素、EGCG和ECG。     

茶叶中的EGCG3″Me研究

设置茶鲜叶的不同采摘成熟度、不同采摘时间以及不同烘干温度等,制备茶样,研究不同成熟度、不同采摘时间以及不同烘干温度等对茶叶中表没食子儿茶素-3-O-(3-O-甲基)没食子酸酯(EGCG3″Me)含量的影响。研究发现,随着茶鲜叶成熟度的增加,叶片中EGCG3″Me含量有增加的趋势,一般在第3叶(或者第4叶)含量达到最高;1d中,茶鲜叶中EGCG3″Me含量在中午达到最高;在90℃烘干温度下,茶叶中的EGCG3″Me含量能得到有效的保持。     

EGCG磷脂复合物抗氧化活性的研究

本文研究了表没食子儿茶素没食子酸酯磷脂复合物的体外抗氧化活性。将EGCG和大豆卵磷脂溶于无水乙醇,制备得到EGCG磷脂复合物。通过高效液相色谱(HPLC)测定,发现制备得到的EGCG磷脂复合物中EGCG的复合率大于99%,并利用紫外扫描、红外光谱、X射线衍射等方法对其结构进行表征,说明通过本实验方法制备得到了目标复合物。通过DPPH、FRAP、TEAC等方法测定EGCG磷脂复合物的体外抗氧化活性,结果表明EGCG磷脂复合物的体外抗氧化能力显著高于VE(P0.05)。同时测定添加EGCG磷脂复合物后,不同贮藏时间(3、6、9、12和15 d)反映大豆油氧化的指标。结果表明EGCG磷脂复合物对于大豆油的氧化具有抑制作用且呈现剂量依赖关系,并且在贮藏15 d时,抗氧化效果显著好于BHT(P0.05)。研究表明,制备得到的EGCG磷脂复合物具有显著的抗氧化活性,并且可以有效抑制大豆油的氧化。     

高效液相色谱-二极管阵列法检测四川绿茶、黄茶、黑茶、红茶和青茶中甲基化儿茶素含量

采用高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-DAD)对四川省雅安、成都、乐山、宜宾、绵阳23家企业生产的绿茶、黄茶、黑茶、红茶和青茶中48个茶样的(-)-表没食子儿茶素-3-O(3-O-甲基)没食子酸酯(EGCG3″Me)含量进行了比较研究。结果表明:青茶EGCG3″Me含量最高,在3.14~6.08 mg/g之间,平均值为4.40 mg/g;黑茶EGCG3″Me含量在0~1.72 mg/g,平均值为0.35 mg/g;绿茶和黄茶中EGCG3″Me含量较低;绿茶中含量在0~0.39 mg/g之间,平均值为0.10 mg/g;黄茶中含量在0~0.09 mg/g之间,平均值为0.05 mg/g;红茶中未检出。各茶类间EGCG3″Me含量差异显著,主要原因在于加工所用鲜叶原料(品种、采摘标准等)及加工工艺等不同。建议易过敏人群应适当饮用青茶。     

The development of a suitable manufacturing process for ‘Benifuuki’ green tea beverage with anti‐allergic effects

Epigallocatechin‐3‐O‐(3‐O‐methyl) gallate (EGCG3″Me) has been reported to inhibit type I allergy better than epigallocatechin gallate (EGCG), a major catechin in tea leaves (Camellia sinensis L). We examined the effects of extraction and sterilization on the catechin content and histamine release from mast cells, as a representative reaction of early phase allergy, in the manufacture of ‘Benifuuki’ green tea beverage. Among various varieties of tea, the cultivar ‘Benifuuki’ contains approximately 2% of EGCG3″Me. Ester‐type catechins and their epimers increased with the increased extraction temperature of the tea. A tea infusion, extracted at 90 °C, strongly inhibited histamine release from mast cells. Furthermore, sterilization affected the catechin content in the manufactured green tea beverage. Sterilization at high temperature promoted the isomerization of catechins and the sterilized green tea beverage had a strong inhibitory effect. When EGCG3″Me, EGCG, epicatechin‐3‐O‐gallate (ECG) and their epimers, GCG3″Me (gallocatechin‐3‐O‐(3‐O‐methyl) gallate), GCG (gallocatechin‐3‐O‐gallate) and CG (catechin‐3‐O‐gallate) were compared, the anti‐allergic effect of GCG3″Me was strongest, and the order of activity was GCG3″Me > EGCG3″Me > GCG > EGCG. We consequently suggest that it was necessary to extract components from tea at the highest temperature possible, and to pasteurize under retort conditions (118.1 °C, 20 min), to manufacture functional green tea beverage with an anti‐allergic action. Copyright © 2005 Society of Chemical Industry     

DETERMINATION OF DYNAMIC MODULI OF SOY DOUGHS USING AN ORTHOGONAL RHEOMETER1

The orthogonal rheometer in principle provides a relatively simple means of applying a dynamic strain to polymers to determine the dynamic storage and loss moduli (G′, G″) as functions of frequency and strain. In applying this technique to soy doughs, surface evaporation of water from the samples was found to be a serious problem, but when evaporation was controlled, good reproducibility for G′ and G″, was obtained. The moduli were very sensitive to dough moisture level, with G’ changing by a factor of 10 over the moisture range 40 to 50%. Plate diameter and percent strain both affected the absolute values of G′ and G″, though the effects were relatively small. Log G′ and log G″ increased linearly with decreasing nitrogen solubility index. The two major advantages of the orthogonal rheometer for such food systems are the ease of operation and the fact that sample thickness can be chosen to obviate problems associated with sample heterogeneity. Nevertheless, the effects of plate diameter and percent strain need more extensive study.     

产油脂真菌PJX-29抗氧化活性成分研究

对一株红树林来源的产油脂真菌PJX-29发酵产物中的抗氧化成分进行分离和鉴定。利用溶剂萃取、硅胶柱色谱及制备HPLC等分离手段从发酵产物中分离得到2个甘油酯类化合物和其他5个化合物,通过理化性质分析及波谱学方法鉴定其化学结构分别为:十五碳单甘油酯,9″,12″-十七碳二烯酸,十六烷基甘油酯,6-戊基-α-吡喃酮4,,6-二羟基-9,10-二甲基苯乙酮,双(8-8’-7羟基-4-甲氧基-5-甲基香豆素),对羟基苯甲酸6,-氨基苯甲醛,并以DPPH法评价了化合物的抗氧化活性,结果表明化合物1,化合物2和化合物6具有较强的抗氧化活性,其IC50分别为:(11.38±0.61)(、9.33±0.80)和(11.12±1.01)μg/mL。     

Antioxidant and antiviral activities of lipophilic epigallocatechin gallate (EGCG) derivatives

The water soluble green tea polyphenol epigallocatechin gallate (EGCG) was lipophilised by esterification with different fatty acids for expanded applications. Four lipophilic ester derivatives of EGCG, namely EGCG-O-tetrastearate, EGCG-O-tetraeicosapentaenoate, EGCG-O-tetradocosahexaenoate, and EGCG-O-octabutyrate, were prepared and evaluated for their antioxidant and antiviral activities in vitro. Incorporation of fatty acids, especially the long chain polyunsaturated fatty acids (PUFA), into EGCG resulted in increased peroxyl radical scavenging activity, as measured by ORAC (oxygen radical absorbance capacity) assay, and metal chelation capacity. However, the esters exhibited decreased reducing power. Antiviral activities of EGCG derivatives were remarkably higher than the parent EGCG molecule, which showed relatively weak effects. The EGCG–PUFA esters were 1700-fold more effective in inhibiting hepatitis C virus (HCV) protease than the positive control embelin. The derivatives also acted as α-glucosidase inhibitors, suggesting their potential in anti-HIV (human immunodeficiency virus) treatment. The results suggest that ester derivatives of EGCG with improved bioactivities may serve as excellent functional food ingredients and natural health products. Moreover, the omega-3 PUFA in the derivatives may also render additional or synergistic health benefits.